In the current study, the mesenchymal stem cells (MSCs) isolated and propagated from the human umbilical cord blood (UCB) were tested for their capabilities of differentiation into chondrocytes in vitro. The mesenchymal progenitor cells (MPCs) collected from UCB were cultured in a low glucose DMEM medium with 10% FBS, L-glutamine and antibiotics. The human MSC colonies were positively stained by PAS reaction. When the immunophenotypes of surface antigens on the MSCs were analyzed by fluorescence-activated cell sorter (FACS) analysis, these cells expressed positively MSC-related antigens of CD 29, CD44, CD 90 and CD105, whereas they did not express antigens of CD14, CD31, CD34, CD45, CD133 and HLA-DR. Following induction these MSCs into chondrocytes in the chondrogenic differentiation medium for 3 weeks or more, the cells were stained positively with safranin O. We clearly confirmed that human MSCs were successfully differentiated into chondrocytes by RT-PCR and immunofluorescent stain of type-II collagen protein. These data also indicate that the isolation, proliferation and differentiation of the hUCB-derived MSCs in vitro can be used for elucidating the mechanisms involved in chondrogenesis. Moreover this differentiation technique can be applied to developing cell-based tissue regeneration or repair damaged tissues.
Kim, Jae-Yeol;Lee, Jae-Cheol;Kang, Min-Jong;Park, Jae-Seok;Yoo, Chul-Gyu;Kim, Young-Whan;Han, Sung-Koo;Shim, Young-Soo;Lee, Jae-Ho
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.42
no.5
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pp.703-712
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1995
Background: Peripheral blood monocytes are important immune effector cells that play a fundamental role in cellular immunity. In addition to their antigen-presenting and phagocytic activities, monocytes/macrophage produce a vast array of regulatory and chemotactic cytokines. Interleukin-8(IL-8), a potent neutrophil-activating and chemotactic peptide, is produced in large quantities by mononuclear phagocytes and may be an important mediator of local and systemic inflammation. Overexpression by IL-8 of such inflammation may be an important step of tissue injury frequently seen in inflammatory reaction. So it could be hypothesized that the agents which block the production of IL-8 can decrease the inflammatory reaction and tissue injury. To evaluate this, we described the effect of Dexamethasone, $PGE_2$, Indomethacin and Interferon-$\gamma$(IFN-$\gamma$) on IL-8 mRNA and protein expression from LPS-stimulated human peripheral blood monocytes(PBMC). Method: PBMC was isolated from healthy volunteers. To evaluate the effect of Dexamethasone, $PGE_2$ & Indomethacin, these drug were treated for 1 hour before and after LPS stimulation and IFN-$\gamma$ was only treated I hour before the LPS stimulation. Northern blot analysis for IL-8 mRNA and ELISA for immunoreactive IL-8 protein in culture supernatant were performed. We repeated above experiment three times for Northern blot analysis and two times for ELISA and got the same result. Results: 1) Pre- and post-treatment of Dexamethasone suppressed both the LPS stimulated IL-8 mRNA expression and IL-8 protein release in PBMC. 2) IFN-$\gamma$ pre-treatment suppressed the IL-8 mRNA expression and IL-8 protein release in unstimulated cells. 3) In LPS stimulated cells, IFN-$\gamma$ suppressed the IL-8 mRNA expression but IL-8 protein release suppression was not observed. 4) $PGE_2$ and Indomethacin exert no effect on the LPS-stimulated IL-8 mRNA and protein expression in concentration used in this experiment ($PGE_2;10^{-6}M$, Indomethacin; $10{\mu}M$). Conclusion: One of the mechanism of antiinflammatory action of Dexamethasone can be explained by the suppressing effect of IL-8 production in some extent and by this antiinflammatory effect, dexamethasone can be used to suppress local and systemic inflammation mediated by IL-8.
The detection methods are required to monitor and diagnose the abnormality on the insulation condition inside a gas-insulated switchgear (GIS). Due to a good sensitivity to the products decomposed by partial discharges (PDs) in $SF_6$ gas, the development of a SWNT gas sensor is actively in progress. However, a few numerical studies on the diffusion mechanism of the $SF_6$ decomposition products by PD have been reported. In this study, we modeled $SF_6$ decomposition process in a chamber by calculating temperature, pressure and concentration of the decomposition products by using a commercial CFD program in conjunction with experimental data. It was assumed that the mass production rate and the generation temperature of the decomposition products were $5.04{\times}10^{-10}$ [g/s] and over 773 K respectively. To calculate the concentration equation, the Schmidt number was specified to get the diffusion coefficient functioned by viscosity and density of $SF_6$ gas instead rather than setting it directly. The results showed that the drive potential is governed mainly by the gradient of the decomposition concentration. A lower concentration of the decomposition products was observed as the sensors were placed more away from the discharge region. Also, the concentration increased by increasing the discharge time. By installing multiple sensors the location of PD is expected to be identified by monitoring the response time of the sensors, and the information should be very useful for the diagnosis and maintenance of GIS.
The accidental releases of total petroleum hydrocarbons (TPH) due to oil spills frequently ended up with soil and ground water pollution. TPH may be degraded through physicochemical and biological processes in the environment but with relatively slow rates. In this study an attempt has been made to develop an integrated chemical and biological treatment technology in order to establish an efficient and environment-friendly restoration technology for the TPH contaminated soils. A Fenton-like reaction was employed as a preceding chemical treatment process and a bioaugmentation process utilizing a diesel fuel degrader consortium was subsequently applied as a biological treatment process. An efficient chemical removal of TPH from soils occurred when the surfactant OP-10S (0.05%) and oxidants ($FeSO_4$ 4%, and $H_2O_2$ 5%) were used. Bioaugmentation of the degrader consortium into the soil slurry led to an increase in their population density at least two orders of magnitude, indicating a good survival of the degradative populations in the contaminated soils ($10^8-10^9$ CFU/g slurry). TPH removal efficiencies for the Fenton-treated soils increased by at least 57% when the soils were subjected to bioaugmentation of the degradative consortium. However, relatively lower TPH treatment efficiencies (79-83%) have been observed in the soils treated with Fenton and the degraders as opposed to the control (95%) that was left with no treatment. This appeared to be due to the presence of free radicals and other oxidative products generated during the Fenton treatment which might inhibit their degradation activity. The findings in this study will contribute to development of efficient bioremediation treatment technologies for TPH-contaminated soils and sediments in the environment.
Choi, Byoung-Mi;Yun, Jae Seong;Kim, Seong Gil;Kim, Seong-Soo;Choi, Ok In;Son, Min Ho;Seo, In-Soo
Journal of Marine Life Science
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v.1
no.2
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pp.95-108
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2016
This study was performed to investigate the community structure of macrobenthic assemblages in the Environmental Conservation area, Korea. Benthic animals were collected by van Veen grab sampler at spring (May) and summer (August) 2009. The total species number and mean density were 195 species 5.6 m-2 and 667 individuals m-2, respectively. Polychaetes were the most dominant faunal group in species (96 species) and abundance (431 individuals m-2). The major dominant species were the polychaetes Lumbrineris longifolia (76±224 individuals m-2), Mediomastus californiensis (42±117 individuals m-2), Tharyx sp.3 (26±110 individuals m-2), the bivalvia Theora fragilis (54±78 individuals m-2) and the amphipod Eriopisella schellensis (70±146 individuals m-2). Based on the cluster and nMDS ordination analysis, macrobenthic communities were divided into three faunal groups. The first group was characterized by high abundance of the polychaeta Sternaspis scutata and the amphipod Ampelisca cyclops iyoensis, which is located by most stations of Hampyeong Bay and St. 4 of Deungnyang Bay. The second group was numerically dominated by the polychaeta Capitella capitata at St. 4 and St. 5 in Gamak Bay where was most pollutant area. Finally, the third group was dominated by the polychaetes Heteromastus filiformis, Tharyx sp.3 and the amphipod Sinocorophium sinensis. Therefore, geochemical characteristics such as the bay shape and pollution gradient may be important factors controlling of the macrobenthic community structure in Environment Conservation Area.
Background : Bronchial asthma has been known as an inflmmatory disease. There have been many evidences that polymorphonuclear leukocytes (PMN) might play an important role in the pathogrnesis of asthma. Although many investigators suggested that pneumocyte injury by PMN-derived oxygen radicals may contribute to the pathogenesis of asthma, there has been few report for a direct evidence of oxygen radicals-mediated pneumocyte injury in bronchial asthma. Furthermore the exact mechanism of oxygen radicals-mediated pneumocyte injury is still controversy. This study was designed to establish a direct in vitro evidence and its clinical significance of pneumocyte injury by PMN-derived superoxide anion in bronchial asthma and to elucidate the main mechanism of superoxide anion-mediated pneumocyte injury. Methods : 12 stable asthmatics and 5 healthy volunteers were participated in this study. PMN was separated from peripheral venous blood samples by using dextran sedimentation and Ficoll-Hypaque density gradient separation method. Superoxide anion productions by PMN and plasma SOD activities were measured by spectrophotometric assay using the principle of SOD inhibitable cytochrome c reduction. PMN-mediated pneumocyte injuries were measured by $^{51}Cr$-release assay using A549 pneumocytes and were expressed as percent lysis and percent detachment. Results: 1) PMN from asthmatics produced more amount of superoxide anion compared to PMN from normal subjects ($6.65{\pm}0.58$ vs $2.81{\pm}0.95\;nmol/1{\times}10^6$ cells, p<0.05), and showed an inverse correlation with $FEV_1$(R=-0.63, p<0.05), but no correlation with $PC_{20}$ histamine in asthmatics. 2) Plasma SOD activities were decreased in asthmatics compared to normal subjects but not significant, and showed a positive correlation with $FEV_1$(R=0.63, p<0.05) but no correlation with $PC_{20}$ histamine in asthmatics. 3) There were a positive correlation between plasma SOD activity and superoxide anion production by PMN in normal subjects (R=0.88, p<0.05) but not in asthmatics. 4) PMN-mediated pneumocyte injury was predominantly expressed as cell detachment rather than cell lysis in both groups, and PMN from asthmatics showed more potent cytotoxic effect on A549 pneumocytes compated to PMN from normal subjects. PMN-mediated detachment rather than lysis of A549 pneumocytes was significantly inhibited by in vitro SOD but not by diluted serum. 5) PMN-mediated detachment rather than lysis of A549 pneumocytes showed a good correlation with superoxide anion production by PMN (R=0.90 in normal subjects, R=0.82 in asthmatics, p<0.05) but no correlation with plasma SOD activity. PMN-mediated pneumocyte injuries were not correlated with $FEV_1$ or $PC_{20}$ histamine in asthmatics. 6) There were no significant differences in PMN-mediated pneumocyte injuries between allergic and nonallergic asthmatics. Conclusion : Our results suggest that pneumocyte injury by PMN-derived superoxide anion may partially contribute to the pathogenesis of asthma and that cell detachment rather than cell lysis may be the mechanism of superoxide anion-mediated pneumocyte injury.
Background: Oxygen free radicals have generally been considered as cytotoxic agents. On the other hand, recent results suggest that small nontoxic amounts of these radicals may act a role in intracellular signal transduction pathway and many efforts to reveal the role of these radicals as secondary messengers have been made. It is evident that the oxygen radicals are released by various cell types in response to extracellular stimuli including LPS, TNF, IL-1 and phorbol esters, all of which translocate the transcription factor $NF{\kappa}B$ from cytoplasm to nucleus by releasing an inhibitory protein subunit, $I{\kappa}B$. Activation of $NF{\kappa}B$ is mimicked by exposure to mild oxidant stress, and inhibited by agents that remove oxygen radicals. It means the cytoplasmic form of the inducible tanscription factor $NF{\kappa}B$ might provide a physiologically important target for oxygen radicals. At the same time, it is well known that LPS induces the release of oxygen radicals in neutrophil with the activation of $NF{\kappa}B$. From above facts, we can assume the expression of IL-8 and IL-$1{\beta}$ gene by LPS stimulation may occur through the activation of $NF{\kappa}B$, which is mediated through the release of $I{\kappa}B$ by increasing amounts of oxygen radicals. But definitive evidence is lacking about the role of oxygen free radicals in the expression of IL-8 and IL-$1{\beta}$ gene in mononuclear phagocytic cells. We conducted a study to determine whether oxygen radicals act a role in the expression of IL-8 and IL-$1{\beta}$ gene in mononuclear phagocytic cells. Method: Human peripheral blood monocytes were isolated from healthy volunteers. Time and dose relationship of $H_2O_2$-induced IL-8 and IL-$1{\beta}$ mRNA expression was observed by Northern blot analysis. To evaluate the role of oxygen radicals in the expression of IL-8 and IL-$1{\beta}$ mRNA by LPS stimulation, pretreatment of various antioxiants including PDTC, TMTU, NAC, ME, Desferrioxamine were done and Northern blot analysis for IL-8 and IL-$1{\beta}$ mRNA was performed. Results: In PBMC, dose and time dependent expression of IL-8 and IL-$1{\beta}$ mRNA by exogenous $H_2O_2$ was not observed. But various antioxidants suppressed the expression of LPS-induced IL-8 and IL-$1{\beta}$ mRNA expression of PBMC and the suppressive activity was most prominant when the pretreatment was done with TMTU. Conclusion: Oxygen free radical may have some role in the expression of IL-8 and IL-$1{\beta}$ mRNA of PBMC but that radical might not be $H_2O_2$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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