본 연구에서는 재사용이 가능한 NIPAM 팬텀의 열적 민감도를 측정하여 조직유사 팬텀의 열변성 특성을 평가하였으며, 초음파 재사용 횟수와 재사용 기간에 따른 음향학적 특성 및 열 변성 형태 특성을 관찰하였다. 측정 결과조사 횟수가 증가함에 따라 NIPAM 팬텀의 음속은 100 m/s 정도 감소하고 감쇠계수는 조금 증가하는 경향을 보였다. 반면에 재사용 기간에 따른 변화는 관찰되지 않았다. 초음파 조사에 따른 열변성의 형태 및 크기는 유효할 정도의 변화는 확인되지 않았다. 본 연구를 통하여 NIPAM 팬텀이 반복 조사를 통한 초음파 치료 평가에도 적합한 것으로 판단되었다.
본 실험에서는 국산 유아용 조제분유의 열처리 정도를 파악하기 위하여 HMF 함량, lactulose 함량, 유청단백질 변성율 등을 측정하였다. 조제분유의 HMF 함량은 $21.0{\sim}43.9{\mu}mol/l$로 분말상의 경우 각종 영양성분의 함량이 더 강화된 (ii)단계 제품에서 많은 HMF 함량을 보였으나, 액상의 경우 can 포장용 제품에서 더 많았다. 조제분유의 lactulose 함량은 분말상에서 $2.5{\sim}11.4mg/100ml$였고 액상에서 $27.0{\sim}164.8mg/100ml$으로 제품의 형태에 따라 많은 차이가 있었다. ADPI에서 제시한 열처리 등급을 기준으로 분류했을 때 대부분의 조제분유 제품이 medium-heat 등급에 해당되었으며, 조제분유의 유청단백질 열변성율을 측정한 결과, 분말상에서는 $1.1{\sim}69.4%$였고 액상에서는 $37.4{\sim}71.3%$이었다.
한국답토양십종(韓國畓土壤十種)을 시료(試料)로하여 유효인산정량(有動燐酸定量)에 적합한 화학적(化學的) 추출방법(油出方法)을 찾고저 A-value인(燐)-32 추적자법(追跡子淪)에 의한 유효인산정량치(有效燐酸定量値)를 표준으로 하여 시험한 결과 다음과 같은 결과(讀果)를 얻었다. 1 A·value는 Fe-P(인산철(燐酸鐵))와만 1%수준(水準)의 유의상관(有意相鬪)이 있으므로 답토양(畓土壤)의 유효인산(有刻燐酸)은 Fe·p계(系)에 의하여 지배(支配)되고 있다고 볼 수 있다. 2. 본(本) 실험(實驗)에 사용(使用)한 6개침출법(個浸出法)은 Fe-P와 상안(相關)이 없으므로 답토양유효인산정량법(容土壤有效燐酸定量法)으로 적합하지 않다. 3. 답토양유효인산(容土壤有效燐酸)에 적합한 침출법(浸出法)은 Fe-P계(系)의 환원강도(還元强度)를 측정(測定)할 수 있는 것이어야 하며 침출강도(浸出强度)는 평균(平均) 270 ppm 으로 추정(推定)된다. 4. Bray No. 2-p는 Lancaster-p, Spurway-p, Truog-p 및 (Ca+Al)-p와 5% 수준(水準) 이상(以上)에서 유의상관(有意相關)이 있고 Al-P는 Olsen-P 및 Lancaster-p와, Ca-p는 Spurway-p와 1% 수준(水準)에서 유의상관(有意相關)이 있다.
In order to study the effect of temperature of denaturation, annealing and extension and cycles on amplification of DNA by PCR method, We isolated the hepatitis B virus DNA from hepatitis B patient blood and compared the density of DNA amplified by Reference PCR Program (denaturation at $94^{\circ}C$ for 30 sec., annealing at $60^{\circ}C$ for 1 min., extension at $72^{\circ}C$ for 1 min., holding at $72^{\circ}C$ for 5min., 30 cycles) that is usually used in laboratory to the density of DNA amplified by PCR program changed only the denaturation temperature or annealing temperature or extension temperature. We amplified about 341bp of hepatitis B virus DNA by Reference PCR Program from hepatitis patient blood, but the DNAs denatured at $72^{\circ}C$ or $60^{\circ}C$ were not detectable on photoradiography film. The DNA amplified at $37^{\circ}C$ of annealing temperature was not detectable, but the DNA annealed at $72^{\circ}C$ was detectable the lower density of DNA than the DNA amplified by Reference PCR Program. Each DNA amplified by PCR program changed only the extension temperature to $37^{\circ}C$ or $60^{\circ}C$ was almost same density as DNA amplified by Reference PCR Program. We compared the density of hepatitis B virus DNA amplified by Reference PCR Program for 30 cycles, 20 cycles, 10 cycles, and 5 cycles. The DNA cycled for 20 cycles was not amplified well as cycled for 30 cycles, but the DNA was detectable on the photoradiography film. The DNAs amplified for 10 cycles or 5 cycles were not detectable on photoradiorgaphy film. The concentration of hepatitis B virus DNA amplified in Reference PCR condition for 30 cycles, 20 cycles, 10 cycles, and 5 cycles were $72{\mu}g/m{\ell}$, $83{\times}10^{-3}{\mu}g/m{\ell}$, $27{\times}10^{-6}{\mu}g/m{\ell}$, and nondetectable, respectively.
각종 어육의 동결 및 가열과정 중의 이화학적 품질변화의 규명하고 저온저장 및 가열조건의 확립과 장치의 설계를 위하여 필요로하는 열물성과 변성온도를 DSC를 이용 측정함으로서 다음의 결과를 얻었다. 1. 어육의 발열반응개시온도는 냉각속도가 증가할수록 강하하였으며, 활성화에너지, 엔탈피 및 엔트로피는 냉각속도의 증가와는 상반되는 경향을 보였다. 동결잠열은 냉각속도에 관계없이 거의 -정한 값을 나타내었다. 2. 어육의 동결과정 중의 자유에너지의 변화는 냉각속도와 조성성분의 영향보다는 온도에 의한 영향이 큰 것으로 나타났다. 3. 어육속의 지질 및 단백질의 변성온도는 가열속도와 상관관계를 나타내었으며, 지질의 함양이 많을수록 변성온도가 낮게 나타났다. 변성엔탈피는 각각 0.04-0.13, 0.07-0.17cal/g 값을 얻었다.
본 연구에서는 열충격에 의한 세포내 단백질 변성을 정량하는 방법을 소개하고 있다. Thiol compound인 diamide [azodicarboxylic acid bis (dimethylamide)]는 단백질변성시 노출된 sulfyhydryl기를 cross-link 시킨다. 정상 상태에서는 노출되지 않는 sulfyhydryl group이 변성된 단백질에서는 노출되기 때문에 diamide에 의한 cross-linking이 선택적으로 일어날 것이다. 그러므로 diamide는 변성된 단백질을 "trap"하는 작용을 할 수 있다. 본 연구진은 세포내 열충격후 고분자 단백질 응집물 (high molecular weight protein aggregate, HAA)이 나타남을 비환원 (non reducing) SDS-PAGE에서 관찰하였고 이를 gas flow counter로 scanning하여 정량하였다. 실험 결과 세포에 열충격을 가한후 diamide를 처리하면 HMA가 열충격 용량의존적으로 증가함을 관찰하였다. 이는 HMA의 양을 측정함으로써 열충격에 의하여 변성된 단백질을 정량할 수 있음을 반증한다. 열내성이 유도된 세포와 그렇지 않은 세포를 비교하였을 때 열내성이 유도된 세포에서는 열충격에 의한 HMA의 형성이 억제됨을 관찰하였다. 열충격후 정상온도에서 회복기를 주면서 시간대별로 diamide를 첨가하고 이때 형성된 HMA양을 측정하여, 단백질 원형복구의 역동성을 실험하였다. 그 결과, HMA는 열내성의 유도 여부와 상관없이 빠르게 없어짐을 알 수 있었다. 그러나 열내성이 유도된 세포에서 HSP70 단항체를 electroporation에 의하여 투여하였을 때 HMA가 현저히 증가하였고, 이는 열내성이 유도된 세포에서는 HSP70의 증가에 의하여 HMA생성이 억제되었음을 나타낸다. HSP70 항체를 이용하여 면역침전을 시행한 결과 변성된 세포내 단백질이 HSP70과 같이 침전됨이 관찰되었다. 이 결과는 HSP70 단백질이 변성된 단백질과 일시적으로 결합하여 정상 상태로 돌아가거나 복구될 수 있도록 도와줄 수 있음을 시사한다.
Saso, Luciano;Valentini, Giovanni;Mattei, Eleonora;Panzironi, Claudio;Casini, Maria Luisa;Grippa, Eleonora;Silvestrini, Bruno
Archives of Pharmacal Research
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제22권5호
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pp.485-490
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1999
The mechanism of action of fish oil (FO), currently used in different chronic inflammatory conditions such as rheumatoid arthritis (RA), is not completely understood, although it is thought that it could alter the metabolism of endogenous autacoids. In addition, we hypothesized that the known capability of fatty acids (FA) of stabilizing serum albumin and perhaps other proteins, may be of pharmacological relevance considering that it is shared by other anti-rheumatic agents (e.g. nonsteroidal antiinflammatory drugs). Thus, we studied the effect of oral administration of FO and corn oil (CO), a vegetable oil with a different composition, on the stability of rat serum proteins, evaluated buy a classical in vitro method based on heat-induced protein denaturation. FO, and, to a lower extent, CO inhibited heat-induced denaturation of rat serum (RS): based on the inhibitory activity (EC50) of the major fatty acids against heat-induced denaturation of RS in vitro, it was possible to speculate the in vivo effects of palmitic acid (C16:0) and eicosapentaenoic acid (EPA, C20:5, n-3) may be more relevant than that of linolenic acid (C18:2). To better investigate this phenomenon, we extracted albumin from the serum of animals treated or not with FO with a one-step affinity chromatography technique, obtaining high purity rat serum albumin preparations (RSA-CTRL and RSA-FO), as judged by SDS-PAGE with Coomassie blue staining. When these RSA preparations were heated at $70^{\circ}C$ for 30 min, it was noted that RSA-FO was much more stable than RSA-CTRL, presumably due to higher number of long chain fatty acids (FA) such as palmitic acid or EPA. In conclusion, we provided evidences that oral administration of FO in the rat stabilizes serum albumin, due to an increase in the number of protein bound long chain fatty acids (e.g. palitic acid and EPA). We speculate that the stabilization of serum albumin and perhaps other proteins could prevent changes of antigenicity due to protein denaturation and glycosylation, which may trigger pathological autoimmune responses, suggesting that this action may be involved in the mode of action of FO in RA and other chronic inflammatory diseases.
$\alpha$-La(holo-, apo form)과 $\alpha$-La과 $\beta$-Lg의 혼합물의 열 처리 시 변화의 정도를 DSC를 실시하여 비교하였다. Holo-$\alpha$-La의 열 변성 정점 온도(Td)는 apo-$\alpha$-La에 비해 높게 나타남으로써 열에 의한 변성에 더 안정함을 알 수 있었다. 두 종류 $\alpha$-La의 혼합물의 경우 Td는 일치하지 않았으며 ago-$\alpha$-La이 holo-$\alpha$-La보다 더 낮게 나타났는데 이는 apo-$\alpha$-La이열에 더 불안정함을 의미한다. $\alpha$-La과 $\beta$-Lg의 혼합물의 경우 hole-$\alpha$-La과 $\beta$-Lg의 혼합물의 변성 온도는 holo-$\alpha$-La 하나만을 열처리 했을 때보다 변성 온도가 더 낮아져서, 열에 의한 변성이 $\beta$-Lg의 유리 SH기에 의해 촉진되었음을 유추할 수 있었고, ago-$\alpha$-La과 $\beta$-Lg의 혼합물의 경우 변성 온도는 apo-$\alpha$-La하나만을 열처리 했을 때보다 변성 온도가 2배 가까이 상승하면서, 열 처리에 더 안정해짐을 보여주었다. $\beta$-Lg의 열 변성 양상은 pH 6.8의 조건에서 살펴보았을 때 가열 초기 단계부터 다소불안정한 peak를 보였으며 $\alpha$-La과 혼합되었을 때 변성을 더 촉진시키면서 열에 불안정해짐을 시사하였다.
목적: 본 연구에서는 UV-A 차단 콘택트렌즈의 UV-A 차단효과를 일반 콘택트렌즈의 효과와 비교하여 보고자 하였다. 방법: RNase A, catalase 및 superoxide dismutase(SOD)를 일반 콘택트렌즈(UV-A 차단율 20%) 및 자외선 차단 콘택트렌즈(UV-A 차단율 85%)로 차단하였을 때의 UV-A에 의한 변성을 아크릴아미드 겔 전기영동법으로 확인하였다. 효소의 용액은 각각 1, 3, 6, 24 및 96시간 동안 365 nm의 UV-A에 노출시켰으며, 콘택트렌즈에 의한 UVA차단 범위는 전안구를 덮는 RGP 렌즈, 소프트 콘택트렌즈, 안경의 크기를 계산하여 각각 50%, 70% 및 100%로 변화를 주었다. 결과: RNase A, catalase 및 SOD의 변성은 UV-A에 노출된 시간이 길어질수록 심하여졌다. 자외선차단 콘택트렌즈의 자외선 차단 효과는 일반 콘택트렌즈와 비교하여 보았을 때 모든 효소에서 차단 효과가 있음을 확인하였다. 콘택트렌즈로 차단된 범위가 줄어들수록 또한 UV-A에 노출된 시간이 길어질수록 자외선 차단 콘택트렌즈의 차단 효과는 감소됨을 알 수 있었다. 결론: 이상의 결과로 미루어 UV-A에 장시간 노출되었을 경우 자외선 차단 콘택트렌즈는 안구 내의 존재하는 효소를 보호하는 효과가 미흡할 것으로 생각되며, 따라서 햇볕 아래에서의 장시간 콘택트렌즈 착용은 충분한 고려를 하여야 할 것으로 제안할 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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