In order to investigate the indigenous prokaryotic species diversity of the Nakdong River system in Korea, fresh water samples from Hapcheonho Lake and Jinyangho Lake were analyzed for bacterial taxonomic diversity. The isolated bacterial strains were identified based on 16S rRNA gene sequences, and those exhibiting at least 98.7% sequence similarity with known bacterial species, but never reported in Korea, were selected as unrecorded species. Eleven unrecorded bacterial species were discovered in this study. The isolates were identified as Aquabacterium citratiphilum, Clostridium ghonii, Curvibacter delicates, Deinococcus depolymerans, Eubacterium moniliforme, Flavobacterium nitrogenifigens, Kineosporia mesophila, Luteibacter jiangsuensis, Microbacterium terricola, Rhizobium larrymoorei, and Sediminicoccus rosea belonging to the phyla Actinobacteria, Bacteroidetes, Firmicutes, Proteobacteria and Deinococcus-Thermus. The selected isolates were further characterized for cellular and colonial morphologies, growth conditions, physiological properties, and enzymatic activities. Descriptive information of these previously unrecorded species is also provided.
Deinococcus radiodurans is extremely resistant to various genotoxic conditions and chemicals. In this study, we characterized the effect of a sublethal concentration (100 ${\mu}M$) of cadmium (Cd) on D. radiodurans using a whole-genome DNA microarray. Time-course global gene expression profiling showed that 1,505 genes out of 3,116 total ORFs were differentially expressed more than 2-fold in response to Cd treatment for at least one timepoint. The majority of the upregulated genes are related to iron uptake, cysteine biosynthesis, protein disulfide stress, and various types of DNA repair systems. The enhanced upregulation of genes involved in cysteine biosynthesis and disulfide stress indicate that Cd has a high affinity for sulfur compounds. Provocation of iron deficiency and growth resumption of Cd-treated cells by iron supplementation also indicates that CdS forms in iron-sulfur-containing proteins such as the [Fe-S] cluster. Induction of base excision, mismatch, and recombinational repair systems indicates that various types of DNA damage, especially base excision, were enhanced by Cd. Exposure to sublethal Cd stress reduces the growth rate, and many of the downregulated genes are related to cell growth, including biosynthesis of cell membrane, translation, and transcription. The differential expression of 52 regulatory genes suggests a dynamic operation of complex regulatory networks by Cd-induced stress. These results demonstrate the effect of Cd exposure on D. radiodurans and how the related genes are expressed by this stress.
Lee, Hun Sang;Kim, Tae-Su;Parajuli, Prakash;Pandey, Ramesh Prasad;Sohng, Jae Kyung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권9호
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pp.1447-1456
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2018
The amylosucrase encoding gene from Deinococcus geothermalis DSM 11300 (DgAS) was codon-optimized and expressed in Escherichia coli. The enzyme was employed for biosynthesis of three different dihydroxybenzene glucosides using sucrose as the source of glucose moiety. The reaction parameters, including temperature, pH, and donor (sucrose) and acceptor substrate concentrations, were optimized to increase the production yield. This study demonstrates the highest ever reported molar yield of hydroquinone glucosides 325.6 mM (88.6 g/l), resorcinol glucosides 130.2 mM (35.4 g/l) and catechol glucosides 284.4 mM (77.4 g/l) when 400 mM hydroquinone, 200 mM resorcinol and 300 mM catechol, respectively, were used as an acceptor substrate. Furthermore, the use of commercially available amyloglucosidase at the end of the transglycosylation reaction minimized the gluco-oligosaccharides, thereby enhancing the target productivity of mono-glucosides. Moreover, the immobilized DgAS on Amicogen LKZ118 beads led to a 278.4 mM (75.8 g/l), 108.8 mM (29.6 g/l) and 211.2 mM (57.5 g/l) final concentration of mono-glycosylated product of hydroquinone, catechol and resorcinol at 35 cycles, respectively, when the same substrate concentration was used as mentioned above. The percent yield of the total glycosides of hydroquinone and catechol varied from 85% to 90% during 35 cycles of reactions in an immobilized system, however, in case of resorcinol the yield was in between 65% to 70%. The immobilized DgAS enhanced the efficiency of the glycosylation reaction and is therefore considered effective for industrial application.
Kim, Myung Kyum;Jang, Seon-A;Namkoong, Seung;Lee, Jin Woo;Park, Yuna;Kim, Sung Hyeok;Lee, Sung Ryul;Sohn, Eun-Hwa
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권4호
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pp.583-590
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2020
Deinococcus actinosclerus BM2T (GenBank: KT448814) is a radio-resistant bacterium that is newly isolated from the soil of a rocky hillside in Seoul. As an extremophile, D. actinosclerus BM2T may possess anti-inflammatory properties that may be beneficial to human health. In this study, we evaluated the anti-inflammatory effects of BM2U, an aqueous extract of D. actinosclerus BM2T, on lipopolysaccharide (LPS)-mediated inflammatory responses in RAW264.7 macrophage cells. BM2U showed antioxidant capacity, as determined by the DPPH radical scavenging (IC50 = 349.3 ㎍/ml) and ORAC (IC50 = 50.24 ㎍/ml) assays. At 20 ㎍/ml, BM2U induced a significant increase in heme oxygenase-1 (HO-1) expression (p < 0.05). BM2U treatment (0.2-20 ㎍/ml) significantly suppressed LPS-induced increase in the mRNA expression of proinflammatory cytokines tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin (IL)-1β, and IL-6 (p < 0.05). BM2U treatment also suppressed the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2), which are involved in the production of inflammatory mediators. BM2U treatment also inhibited the activation of nuclear factor-κB (NF-κB) and mitogen-activated protein kinases (MAPKs): JNK, ERK, and p-38 (p < 0.05). Collectively, BM2U exhibited anti-inflammatory potential that can be exploited in attenuating inflammatory responses.
The expression of Deinococcus radiodurans dr1558 and pprM genes was examined for enhanced lysine production in recombinant Corynebacterium glutamicum. These genes are known to confer high tolerance to pH and osmotic shock in Escherichia coli. D. radiodurans dr1558 and pprM genes were expressed in C. glutamicum by using 6 synthetic promoters of different strengths, to evaluate the effect of expression efficiency on lysine production. Recombinant C. glutamicum expressing DR1558 under the L26 and I64 promoters showed higher lysine production than that expressing DR1558 under other promoters. Similarly, recombinant C. glutamicum expressing PprM under same promoters (L26 and I64) showed a higher increase in lysine production compared to that expressing PprM under other promoters. In the absence of $CaCO_3$ in the medium, the expression of DR1558 or PprM also increased lysine concentration in C. glutamicum depending on the promoter used. Together, these results suggest that genes involved in radiation tolerance in D. radiodurans can be used to enhance production of amino acids and their derivatives.
방사성 폐기물에 대한 우려가 증대됨에 따라 생물정화 기술에 대한 관심이 고조되고 있다. 병원과 원자력발전 등에서 발생되는 많은 양의 방사성 폐기물이 환경에 직접 노출됨에 따라, 이를 정화하기 위한 다양한 물리화학적 기술이 보고되고 있다. 하지만, 이러한 방법은 고비용 및 고위험성 과정이 수반되기 때문에 미생물을 이용한 친환경적 생물정화 기술이 요구되고 있다. 최근, 고방사선 노출 등과 같은 극한환경에서 서식할 수 있는 방사선저항성 미생물에 대한 연구가 많이 보고되고 있으며, 이를 이용한 방사성 폐기물 정화에 대한 연구적 관심이 높아지고 있다. 데이노코쿠스 라디오두란스는 대표적인 방사선저항성 미생물로써 높은 방사선에 저항성을 갖는 특성으로 인해 방사성 폐기물 등의 유해물질 정화에 이용될 수 있다. 본 총설에서는 데이노코쿠스 라디오두란스의 방사선내성과 관련한 일반적 기작에 대해 소개하고, 방사성 폐기물의 생물정화 활용 가능성에 대해 논의한다.
Wang, Jinhui;Tian, Ye;Zhou, Zhengfu;Zhang, Liwen;Zhang, Wei;Lin, Min;Chen, Ming
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권12호
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pp.2106-2115
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2016
To identify the global effects of (p)ppGpp in the gram-positive bacterium Deinococcus radiodurans, which exhibits remarkable resistance to radiation and other stresses, RelA/SpoT homolog (RSHs) mutants were constructed by direct deletion mutagenesis. The results showed that RelA has both synthesis and hydrolysis domains of (p)ppGpp, whereas RelQ only synthesizes (p)ppGpp in D. radiodurans. The growth assay for mutants and complementation analysis revealed that deletion of relA and relQ sensitized the cells to $H_2O_2$, heat shock, and amino acid limitation. Comparative proteomic analysis revealed that the bifunctional RelA is involved in DNA repair, molecular chaperone functions, transcription, the tricarboxylic acid cycle, and metabolism, suggesting that relA maintains the cellular (p)ppGpp levels and plays a crucial role in oxidative resistance in D. radiodurans. The D. radiodurans relA and relQ genes are responsible for (p)ppGpp synthesis/hydrolysis and (p)ppGpp hydrolysis, respectively. (p)ppGpp integrates a general stress response with a targeted re-programming of gene regulation to allow bacteria to respond appropriately towards heat shock, oxidative stress, and starvation. This is the first identification of RelA and RelQ involvement in response to oxidative, heat shock, and starvation stresses in D. radiodurans, which further elucidates the remarkable resistance of this bacterium to stresses.
Kim, Myo-Deok;Jung, Dong-Hyun;Seo, Dong-Ho;Jung, Jong-Hyun;Seo, Ean-Jeong;Baek, Nam-In;Yoo, Sang-Ho;Park, Cheon-Seok
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권11호
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pp.1845-1854
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2016
The transglycosylation activity of amylosucrase (ASase) has received significant attention owing to its use of an inexpensive donor, sucrose, and broad acceptor specificity, including glycone and aglycone compounds. The transglycosylation reaction of recombinant ASase from Deinococcus radiopugnans (DRpAS) was investigated using various phenolic compounds, and quercetin-3-O-rutinoside (rutin) was found to be the most suitable acceptor molecule used by DRpAS. Two amino acid residues in DRpAS variants (DRpAS Q299K and DRpAS Q299R), assumed to be involved in acceptor binding, were constructed by site-directed mutagenesis. Intriguingly, DRpAS Q299K and DRpAS Q299R produced 10-fold and 4-fold higher levels of rutin transglycosylation product than did the wild-type (WT) DRpAS, respectively. According to in silico molecular docking analysis, the lysine residue at position 299 in the mutants enables rutin to more easily position inside the active pocket of the mutant enzyme than in that of the WT, due to conformational changes in loop 4.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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