To produce of transgenic orchardgrass, the seed-derived calli of orchardgrass (Dactylis glomerata L.) co-cultivated with Agrobacterium turnefaciens EHAlOl harboring binary vector pIG121-Hm were selected with hygromycin and then transferred onto N6 regeneration medium containing 1 rngl l of NAA, 5 rngl l of kinetin, 250 rngl l of carbenicillin and 50 mg/ l of hygromycin. The efficiency of transformation was differed on cultivars, that is, 'Potomac' appeared 12% of transformation efficiency while 'Amba' did 5.5%. The addition of acetosyringone during co-cultivation was a key to successhl transformation of orchardgrass. Transgene fragments were identified by PCR analysis and the constitutive expression of GUS gene was confirmed by Northern blot analysis. (Key words : Acetosyringone, Agrobacterium tumefaciens, Orchardgrass (Dactylis glomerata L.), Transformation)
Sang Deog A. Kim;Mitsuaki Ohshima;Shigekata Yoshida
한국초지조사료학회지
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제13권3호
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pp.184-189
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1993
수확시기와 칼륨비료의 시용수준이 각각 다른 오차드그라스(Dactylis glomerata L.)를 대사시험용 케이지 안의 염소(산양)에게 급여하여 목초중 무기질함량이 염소의 무기물질 출납에 어떤 영향을 주는가를 알아보고자 본 실험을 실시하였다. 저칼륨급여구의 오차드그라스 건초중 칼륨과 마그네슘함량은 건물량 기준으로 각각 3.4%와0.26%이었고 중칼륨구의 함량은 4.9%와0.21%이었으며 고 칼륨구의 함량은 5.8%와0.21% 이었다. 고칼륨급여구에서 뇨중칼륨배설량은 저칼륨구보다 유의하게 많았고, 저칼륨구의 분중및 뇨중 마그네슘배설량은 중칼륨구 및 고 칼륨구보다 많았다. 뇨중마그네슘배설량은 혈장의 마그네슘농도 정상관의 경향이 있었으며, 고칼륨급여구의 염소(산양)는 다름 급여구에 비해 음수량과 배뇨량이 많은 경향이었다.
Ruminal degradation characteristics of dry matter (DM), neutral detergent fiber (NDF) and crude protein (CP) in fresh leaves of two Japanese native grasses (Zoysia japonica and Miscanthus sinensis) and one sown temperate grass (Dactylis glomerata) were investigated by an in sacco method in spring (mid-May), summer (mid-July) and autumn (mid-September). Japanese native grasses had higher NDF and lower CP concentrations than D. glomerata, and the CP concentration in native grasses decreased in autumn. Ruminal degradability of DM, NDF and CP was lower in native grasses than in D. glomerata (p<0.05) in all seasons. DM and NDF degradability decreased in summer for Z. japonica and D. glomerata, while it decreased in autumn for M. sinensis. CP degradability in Z. japonica was constant throughout the seasons, whereas that in M. sinensis greatly decreased in summer and autumn (p<0.05). It was concluded that Z. japonica could stably supply ruminally digestible nutrients for grazing animals in Japanese native pasture. However, the degradation characteristics of freshly chopped native grasses did not fit the exponential model of $D=a+b(1-e^{-ct})$ proposed by Ørskov and McDonald.
Four foreign pasture cultivars such as Lotus corniculatus cv. Maitland, Trifolium pratense cv. Deben, Lolium perenne cv. $S_{23}$ and .Dactylis glomerata cv. $S_{26}$ were tested with "Kwisan" series, a common upland soil in Southern part of Korea. The cultivars in single or mixture were grown in pot with two levels of light intensity, i.e. a full sun light condition and 50% interception. Dry matter yield of top and root and their seasonal changes, the number of tillers or branches per plant and finally competative effects of mixtures were evaluated by estimating the expected yield, relative yield totals and compensation index. The results are summarized as follows: 1. Maitland showed a significant decrease in dry matter yield in shade condition, but the number of branches of Maitland was higher than those of Deben. 2. Maitland showed higher dry matter yield than Deben during the mid-summer period, while $S_{23}$, showed higher dry matter yield than $S_{26}$ during early season. 3. Mixtures of $S_{23}$ and Maitland, and $S_{26}$ and Deben gave better response to grasses by increasing the number of tillers in shade condition. 4. Combinations of Lotus corniculatus cv. Maitland and Dactylis glomerata cv. $S_{26}$ and Trifolium pratense cv. Deben and Dactylis glomerata cv. $S_{26}$ gave higher relative yield totals and higher compensation index, which envisages that the pasture establishment rates can be enhanced when those mixtures were sown by the oversowing method in the upland soil where phosphate level is very low and infertile in general.n general.
오차드그래스의 종자배양에서 형성된 캘러스를 현탁배양하여 배양기간별 부정배 형성정도와 식물체 재분화율 등에 대한 몇 가지 실험을 수행하여 얻은 결과를 요약하면 다음과 같다. 종자유래의 캘러스를 현탁배양하였을 때, 세포 모양이 둥근것과 그들의 세포괴는 배양 50일 후에 최대치를 나타내었고 그 이후는 감소하였다. 현탁배양 기간에 따른 갤러스의 부정배 형성과 식물체 분화율은 배양 60일째 가장 높았으며, 그 이후는 감소하는 경향이었다. 현탁배양에서 배지 내에 첨가되는 casein hydrolysate (CH)의 적정농도는 $4\;g/{\ell}$인 것으로 나타났다.
본 연구는 제주도 개량목초지에서 1971~1978 연까지의 식생의 연차적민 변화과정을 조사한 결과로서 그 개요는 다음과 같다. 1. 식생은 1~3연초지에서는 Dactylis glomerata / Trifolium repens type, 4연초지에서 Imperata cylindrica / Trifolium repens type, 5~8연초지에서는 Imperata cylindrica / Zoysia japonica type으로 변화하였다. 2. 초장의 변화과정에서 혼파목초들은 1~3연초지까지는 길어지고 있으나(37.9~45.1cm) 그 이후부터 매년 짧아지고 있는 반면 잡초류의 초장은 1연초지 이후부터 현저히 길어지고 있는(30~44.2cm) 경향이었다. 3. 피도에 있어서 혼파목초들은 1 연초지에서 72.4%이던것이 해가 지남에 따라 극히 감소되어 8연초지에서는 0.2%로 나타나는 반면 잡초들은 1연초지 이후부터 현저히 증가되었다. 4. 연수의 경과에 따르는 식생구성률의 변화는 피도와 비슷한 경향이었다. 5. 초장 및 피도, 식생구성률에 있어서 해가 경과함에 따라 현저히 증가되는 식물은 Imperata cylindrica, Zoysia japonica, Miscanthus sinensis, Pteridium aquilinum, Crisium japonicum, Artemisia japonica 등이고 Cetella asiatica, Digitaria sanguinalis, Artemisia asiatica 등은 오히려 감소되었다. 6. 혼파목초지에 침범한 잡초유는 1연초지에서 24종이었으나 해가 경과함에 따라 종수가 증가되어 6연초지에서는 60종이었으며 그중 가축의 불식초류가 매년 증가되는 경향이었다.
오차드그라스(Dactylis glomerata L.)의 치사온도를 결정하기 위하여, 국내 육성품종인 "장벌 102호"(Jangbeol 102) 품종을 시험재료로 하여 종자를 petri dish에서 발아시켜 작은 화분에 10 개체씩 이식, 생장실에서 4주간 재배하였다. $45^{\circ}C$, $50^{\circ}C$ 및 $55^{\circ}C$에서 처리한 경우에는 60분간 처리했을 때에도 거의 식물체 손상이 없었다. $60^{\circ}C$에서 30분간 이상 처리했을 때에는 잎 끝이 마르고 약간 시들었으나 식물체의 손상은 약한 편이었으며, $65^{\circ}C$에서 처리한 결과에서도 $60^{\circ}C$에서 처리했을 때보다는 좀 더 시들었지만 역시 심한 정도는 아니었다. $70^{\circ}C$에서 30분간 처리했을 때에 오차드그라스는 잎의 중간 정도까지 말랐으며, 60분간 처리했을 때에는 지상부의 잎이 2/3 이상 마른 상태였다. $80^{\circ}C$에서 처리한 결과에서는 처리 후 1일 이내에 50분 이상 처리에서 거의 죽어가는 현상이 나타났다. 처리 후 7일에는 55분 이상의 처리에서만 모두 죽었으며, 50분 이하의 처리에서는 새로운 shoot가 재생됨을 확인하였다. 결론적으로 오차드그라스의 치사온도는 $80^{\circ}C$에서 55분 처리하는 것으로 결정되었다.
벼에서 분리한 저분자량 HSP 유전자 (OsHSP17.9)를 오차드그래스 (orchardgrass)에 도입하기 위하여 Agrobacterium을 이용한 형질전환을 실시하여 다음의 결과를 얻었다. 오차드그래스의 종자유래의 캘러스를 OsHSP17.9 유전자가 도입된 Agrobacterium EHA101과 공동배양한 다음, hygromycin 선발된 캘러스로부터 hygromycin 저항성 식물체를 얻었다. PCR 및 Southern blot 분석 결과, 벼의 저분자량 HSP 유전자가 재분화된 식물체에 안정적으로 도입되었음을 확인하였으며, 품종 간의 형질전환 효율은 '포토맥'의 경우 16.5%, '프론티어' 의 경우 8.0%를 나타내었다. 또한 Northern blot 분석 결과, 도입된 유전자가 형질전환체에서 정상적으로 발현된다는 것을 확인하였으며, 형질전환체의 계통 간에 발현량의 차이를 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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