• 한국응용과학기술학회지
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• 제36권3호
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• pp.966-974
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• 2019

Arthrospira platensis has been reported to contain a variety of substances such as phycocyanin, ${\beta}$-carotene, vitamin E and other carotenoids. In this study, zebrafish were treated with indoor cultivation spirulina ethanol extracts(ICAE) to determine toxicity(coagulation rate, hatching rate, heart rate). We used the DCFH-DA staining method to detect the effect of reactive oxygen species(ROS) generation on lipopolysaccharide(LPS)-induced zebrafish embryos ROS various concentrations(0.01, 0.05, 0.1, 0.5mg/ml) of ICAE. Cell toxicity was measured by WST-1 assay on RAW 264.7 macrophage cell line. Also, measured the inhibitory effect of nitric oxide(NO) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) production in RAW264.7 macrophages induced by LPS at various concentrations of ICAE. The results of embryo coagulation rate, hatching rate, heart rate of zebrafish at various(0.01, 0.05, 0.1mg/ml) of ICAE was no toxicity. The ICAE treated group had an inhibitory effect on NO and $PGE_2$ production compared and decreased with concentration. The results of this study ethanol extract of Arthrospira platensis has an anti-inflammatory effect and suggest that is worthy of use cosmetics for skin protection.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제48권2호
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• pp.151-155
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• 2010

Allergen extracts from dust mites and cockroaches commonly found in Korean homes were used to evaluate their enzymatic activity as they are believed to influence allergenicity. Allergen extracts were prepared from 3 dust mite species (Dermatophagoides farinae, D. pteronyssinus, and Tyrophagus putrescentiae) and 3 cockroach species (Blattella germanica, Periplaneta americana, and P. fuliginosa) maintained in the Korea National Arthropods of Medical Importance Resource Bank. Proteins were extracted in PBS after homogenization using liquid nitrogen. The activities of various enzymes were investigated using the API Zym system. No significant difference in phosphatase, lipase, or glycosidase activity was observed among the 6 allergen extracts, but much difference was observed in protease activity. Protease activity was assessed in more detail by gelatin zymography and the EnzChek assay. Extract from T. putrescentiae showed the highest protease activity, followed by those of the cockroach extracts. Extracts from D. farinae and D. pteronyssinus showed only weak protease activity. Gelatinolytic activity was detected mainly in a 30-kDa protein in D. farinae, a 28-kDa protein in D. pteronyssinus, a > 26-kDa protein in T. putrescentiae, a > 20-kDa protein in B. germanica, and a > 23-kDa protein in P. americana and P. fuliginosa. The information on various enzymatic activities obtained in this study may be useful for future studies. In particular, the strong protease activity found in cockroach extracts could contribute to sensitization to cockroach allergens, which is known to be associated with the development of asthma.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제32권2호
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• pp.97-104
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• 2008

Plasminogen activators (PAs) are serine protease that cleave plasminogen to form the active protease plasmin. PA/plasmin system playa role in mammalian fertilization and motility and acrosome reaction of sperm. The present study was undertaken to identify PAs in porcine gametes and investigate a possible role of plasminogen in in vitro fertilization in the pig. When boar spermatozoa were preincubated in a fertilization medium (mTBM) for 0, 2, 4 or 6 h, the activity of tPA-PAI ($110{\sim}117\;kDa$), tPA ($62{\sim}70\;kDa$), and uPA ($34{\sim}38\;kDa$) was observed in the sperm incubation medium and sperm sample. PA activities in the sperm incubation medium significantly (p<0.05) increased according to increasing incubation times, while PA activities in sperm significantly (p<0.05) decreased at the same times. In addition, the rate of acrosome reaction in spermatozoa increased by increasing culture times. When oocytes were separated from porcine cumulus-oocytes complexes at 0, 22 or 44 h of maturation culture, no PA activities were observed in cumulus free-oocyte just after aspiration from follicles. However, the activity of tPA-PAI ($108{\sim}113\;kDa$) and tPA ($75{\sim}83\;kDa$) was observed at 22 h of in vitro culture and significantly (p<0.05) increased as the duration of the culture increased. On the other hand, when porcine oocytes were activated by sperm penetration or calcium ionophore, plasminogen significantly (p<0.05) increased ZP dissolution time (sec) in activated oocytes by sperm penetration. These results suggest that supplementation of plasminogen to fertilization medium may playa positive role in the improvement of in vitro fertilization ability in the pig.

• 한국잡초학회지
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• 제17권1호
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• pp.44-51
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• 1997

제초제(除草除) glyphosate는 EPSP-synthase 생합성(生合成) 자체는 억제(抑制)하지 못하며 단지 효소활성(酵素活成)만을 억제한다. 이러한 억제는 뿌리 빛 줄기 정단부에서 현저했다. EPSP-synthase의 전체구(前體區) 단백질(蛋百質)은 54 kDa의 분자량(分子量)을 갖으며, 엽록체(葉綠體)내 성숙(成熟) 단백질(蛋百質)은 45kDa 정도의 분자량(分子量)을 나타낸다. Glyphosate 처리 직후(直後) 인위적 암처리(暗處理)는 EPSP-synthase의 엽록체(葉綠體)내 삽입을 완전히 억제하지 못한다. 이러한 결과는 Glyphosate에 의한 EPSP-synthase 엽록체(葉綠體)내 삽입 기작은 전적으로 광(光)의존적인 것은 아니며 오히려 광의존적 제초활성을 나타내는 glyphosate의 엽록체내 유입후 아직까지 알려지지 않은 조절기작에 의해 간접적으로 억제되는 것으로 보였다.

• The Plant Pathology Journal
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• 제20권2호
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• pp.158-163
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• 2004

Chlorella is a eukaryotic microalgae which shares metabolic pathways with higher plants. These charac-teristics make chlorella a potential candidate for eukaryotic overexpression systems. Recently, a foreign flounder growth hormone gene was stably introduced and expressed in transformed Chlorella ellipsoidea by using a modified plant transformation vector that contains cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S pro-moter and the phleomycin resistant Sh ble gene as a selection marker. In this study, this same vector was modified by incorporating a promoter and a 3' UTR region of the 33kDa peptide gene from a chlorella virus that was isolated in our laboratory. The 33kDa gene promoter was used to replace the 35S promoter and the 3' UTR was introduced to separate the target gene and downstream Sh ble gene. Three different chlorella transformation vectors containing human erythropoietin (EPO) gene were constructed. The mp335EPO vector consists of a promoter from the 33kDa peptide gene, whereas the mp3353EPO vector contains the same promoter from the 33kDa peptide gene and its 3' UTR. The mp35S33pEPO vector contains the 35S promoter and the 3' UTR from the 33 kDa peptide gene. There was no significant difference in the expression levels of EPO protein in chlorella cells transformed with either of three of the transformation vectors. These data indicate that the promoters from the chlorella virus are comparable to the most common CaMV 35S promoter. Furthermore, these data suggest that other promoters from this virus can be used in future construction of chlorella transformation system for higher expression of target proteins.

• Journal of Chest Surgery
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• 제36권12호
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• pp.921-927
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• 2003

동맥전환술은 대혈관전위증의 가장 효과적인 수술 방법이 되어왔다. 그러나 동맥전환술 후 신생대동맥근부가 과도하게 확장되는 현상이 보고되었으며, 이에 따른 신생대동맥판막의 기능과 대동맥의 성장에 미치는 영향에 대해서는 잘 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 신생대동맥판막과 대동맥의 수술 후 크기의 변화와 신생대동맥판막의 기능 및 기능에 영향을 미치는 요인을 조사하였다. 대상 및 방법: 대동맥전환술을 받고 추적관찰기간 중 심도자술을 시행 받은 48명의 환자들이 연구 대상이 되었으며, 동맥전환술은 나이 중앙값 생후 18일(1∼211일)에 시행받았다. 수술 전 심도자술은 26명의 환자에서 시행되었고, 수술 후 15.8$\pm$9.6개월에 모든 환자에서 심도자술을 시행하였다. 수술 후의 하행대동맥에 대한 신생대동맥륜, 대동맥근부과 대동맥문합부위의 직경 비율을 수술 전의 폐동맥륜, 근위부 및 동관경계부위의 크기와 비교하였다. 수술 전과 수술 시의 변수에 대한 신생대동맥판막폐쇄부전의 위험인자를 분석하였다. 결과: 추적관찰 중 2명의 환자에서 중등도 이상의(grade$\geq$II/IV) 대동맥판막폐쇄부전이 있었으며 이 중 1명은 대동맥판막치환술이 필요하였다. 1명의 환자에서 대동맥문합부 협착으로 재수술이 필요하였다. 수술 후 neoaortic annulus/DA 비는 1.33$\pm$0.28에서 1.52$\pm$0.33로 증가하였고(p=0.01), neoaortic root/DA 비도 2.02$\pm$0.40에서 2.56$\pm$0.38로 증가하였다(p<0.0001). 그러나 aortic anastomosis/DA 비는 통계적으로 유의한 차이는 없었다(p=0.06). 신생대동맥판폐쇄부전의 발생과 neoaortic annulus/DA 비, neoaortic root/DA 비율에는 통계적으로 유의한 상관관계는 없었다. 신생아기 이후의 교정(나이>30일)(p=0.02), 수술 전 폐동맥판막협착(p=0.01)과 이엽성폐동맥판막(p=0.03)이 단일변수 분석에서 대동맥판막폐쇄부전의 위험인자이었다. 결론: 동맥전환술 후 대동맥문합부는 하행대동맥의 성장에 비례하는 정상 성장을 보이나 신생대동맥판막륜과 대동맥근부는 이상 확장을 보였다. 신생대동맥판막륜과 대동맥근부의 크기는 대동맥폐쇄부전과 직접적으로 연관되어 있지 않았으며, 임상적으로 의미 있는 대동맥판막폐쇄부전은 동맥전환술 후 드물게 발생했다. 신생아기 이후의 동맥전환술, 수술 전 폐동맥협착, 이엽성 폐동맥판막이 신생대동맥판막 폐쇄부전의 위험인자였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제31권2호
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• pp.149-156
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• 1993

유구낭미충 항원에 대한 단세포군항체를 제조하여 그 특성을 분석하고, 이를 효소면역억제측정법 (ELISA-inhibition test)에 응용함으로써 통상적인 효소면역측정법(ELISA)의 특이도를 더욱 높이고자 하였다. 유구낭미충의 두절항원으로 면역한 BALB/c 마우스의 비장세포와 형질세포종세포를 융합하여 림프잡종세포를 만들고, 이 중에서 유구낭미충 항원에 대한 특이 단세포군 항체를 생성하는 4개의 림프잡종세포군을 선택하였다. EITB상 Cya-1 단세포군항체는 25.5 kDa, Cya-7은 28 kDa, Cya-28은 87.5 kDa, Cya-31은 12.5 kDa 항원대에 각각 반응하는 것을 알 수 있었다. 간접면역 형광항체법으로 Cya-1는 칼슘소체에, Cya-7은 실질조직에, Cya- 28과 Cya-31은 충체 표피에 주된 반응을 나타내고 있었다. 유구낭미충 항원을 사용한 효소면 역측정법으로는 유구낭미충 감염자 28명의 혈청 중 23명 (82. l%)이 양성 반응을 보였으며 폐흡충 감염자 31명 중 6명(19.4%), 스파르가눔 감염자 9명 중 1명(11. l%)이 교차 반응을 보였다 반면, 특이 단세포군항체 Cya-7를 이용한 효소면역 억제측정법으로는 유구낭미충 감염자는 28명 중 19명 (67.9%)이 양성반응을 보였고, 다른 기생충 감염자 혈청과의 교차 반응은 관찰되지 않았다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제31권2호
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• pp.141-148
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• 1993

폐흡충증의 진단을 위하여 근자에 효소면역측정 법(ELISA)이 널리 쓰이고 있다. 이 논문에서는 폐흡충 항원에 대한 단클론항체를 제조하고 이를 효소면역억제측정 법 (ELISA-Inhlbltlon test)에 응용하여 효소면역측정 법의 특이도를 더욱 높이고자 하였다. 폐흠충 성충의 수용성 항원으로 면역한 BALB/c 마우스의 비장세포와 형질세포종세포를 융합하여 림프잡종세포를 만들고 이 중에서 폐흡충 항원에 대한 특이 단클론항체를 생성하는 하나의 림프잡종세포를 선택하였다. 이는 Pwa-14라고 이름지워졌는데, EITB상 28 kDa, 42.5 kDa, 89 kDa, 120.5 kDa 항원대에 반응하였으며, 간접 면역항체법으로 반응하는 항원의 위치가 난황선임을 확인하였다. 폐흡충 항원을 사용한 통상적인 효소면역측정법에 폐흡충 감염자 22명의 혈청은 모두 양성 반응을 보였으며, 간흡충 감염자 40명 중 5명(12.5%), 유구낭충 감염자 26명 중 3명(7.7%)은 양성을 나타내 교차 반응을 보였다. 이 때, 스파르가눔 감염자 10명 및 정상 대조군에서는 양성 반응을 보이는 혈청이 없었다. 특이 단세포군항체를 이용한 효소면역 억제측정법으로 측정한 결과, 폐흡충 감염자는 모두 양성반응을 보였으나, 유구낭충, 스파르가눔 감염자의 혈청은 교차 반응을 보이지 않았다. 이상의 결과로 보아 폐흡 충의 면역 진단 시, 폐흠충 특이 단클론항체를 이용한 효소면역 억제측정 법은 통상적인 효소면역측 정법에 비하여 더 높은 특이도를 보임을 알 수 있었다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제61권4호
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• pp.405-410
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• 2018

Pseudomonas tolaasii 6264 균주는 버섯 조직에서 분리하였고, 갈반병을 일으키는 주요 병원균 중 하나로 확인되었다. 이 균주는 펩티드 독소인 tolaasin과 유사 펩티드를 분비한다. P. tolaasii 6264는 지난 20여년간 갈반병 연구를 위한 대표균주로 사용되었으며, 이 균주는 갈반형성능, 용혈활성, 흰색침강선형성능을 확인한 후 사용하였다. 본 연구에서는, 저장 기간에 따라 P. tolaasii 6264 균주의 특성을 비교분석하였다. 2012년 이후 저장된 P. tolaasii 6264 균주를 매년 배양하여 이들 균주의 병원성을 분석하였다. 16S rRNA 염기서열을 비교하였을 때, 모든 균주들은 두 그룹으로 나뉘어졌다. 용혈활성, 갈반형성능, 흰색침강선형성능을 포함한 균주의 병원 특성도 조사하였다. P. tolaasii 6264-15-2와 P. tolaasii 6264-17 균주는 세 가지 활성을 모두 가졌으나, 그 외 균주들은 갈반형성능만 보였으며 다른 병원 특성들은 잃었다. 각 균주 배양액으로부터 tolaasin 펩티드를 순수분리하였으며, 질량분석기를 이용하여 분석하였다. P. tolaasii 6264-15-2와 P. tolaasii 6264-17 균주는 Tol I (1987 Da), Tol II (1943 Da)을 비롯한 유사체(1973 Da, 2005 Da)를 분비하였으며, 다른 균주의 배양액에서는 이 펩티드들의 일부가 발견되지 않았다. 이러한 결과는 P. tolaasii의 병원성이 저장기간동안 변할 수 있음을 보여준다.

• 대한수의학회지
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• 제37권2호
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• pp.425-438
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• 1997

To assess the testicular toxicity induced by DA-125, a new anthracycline anticancer agent, the test substance was intraveneously administered to male beagle dogs at dose levels of 0, 0.0023, 0.0375, 0.15, and 0.6 mg/kg/day, 6 days a week for 26 weeks. At 0.6 mg/kg/day, 1 out of 3 dogs had died on day 42 of treatment and the other dogs were sacrificed on days 46 and 122 of treatment due to the increasingly severe clinical condition. Clinical signs considered to be related to treatment were included anorexia, vomiting, salivation, decreased activity, mucous and/or dark faeces, diarrhea, and swelling, abscess and/or ulceration of injection sites. Suppression in body weight gain, reduction in food intake, decreases in testicular weight and size, and hemorrhage of epididymis were also observed in male dogs. Microscopically, severe degenerative changes such as atrophy of seminiferous tubules, loss of germ cells, degeneration of germ cells, vacuolization of Sertoli cells, and hyperplasia of Leydig cells were observed in all dogs. Azoospermia in epididymal tubules, atrophy of epithelia in the cauda epididymis, and prostate atrophy were also found. At 0.15 mg/kg/day, anorexia, vomiting, salivation, diarrhea, and swelling of injection sites were observed. In addition, suppression in body weight gain and decreases in testicular weight and size were found in male dogs. Atrophy of seminiferous tubules, decrease of germ cells, degeneration, exfoliation and retention of germ cells, vacuolization of Sertoli cells, and hyperplasia of Leydig cells were observed by histopathological examination. Azoospermia in epididymal tubules and prostate atrophy were also found. At 0.0375 mg/kg/day, there were no clinical signs considered to be indicative of a reaction to treatment, but testicular size was significantly reduced. Microscopically, decreases in the number of spermatogonia and epidydimal speramtozoa were found. There were no evidences of general or testicular toxicity at 0.0023 mg/kg/day. These results indicate that DA-125 produces significant and persistent damage to the spermatogenic compartments of the testes in male beagle dogs.