Recent technical advances, such as chromatin immunoprecipitation combined with DNA microarrays (ChIp-chip) and chromatin immunoprecipitation-sequencing (ChIP-seq), have generated large quantities of high-throughput data. Considering that epigenomic datasets are arranged over chromosomes, their analysis must account for spatial or temporal characteristics. In that sense, simple clustering or classification methodologies are inadequate for the analysis of multi-track ChIP-chip or ChIP-seq data. Approaches that are based on hidden Markov models (HMMs) can integrate dependencies between directly adjacent measurements in the genome. Here, we review three HMM-based studies that have contributed to epigenetic research, from a computational perspective. We also give a brief tutorial on HMM modelling-targeted at bioinformaticians who are new to the field.
In this research, we developed new PDMS-glass based microbiochip consisted of the micromixer and microreactor for DNA ligation. The micromixer was composed of a straight channel integrated with nozzles and pillars, and the microreactor was composed of a serpentine channel. We coated the PDMS chip surface with the 0.25wt.% PVP solution to prevent the bubble generation which was caused by the hydrophobicity of the PDMS. The new micomixer was passive type and the mixing was enhanced by a convective diffusion using the nozzle and pillar. The 10.33mm long micromixer showed the good mixing efficiency of 87.7% at 500 l/min flow rate. We could perform the DNA ligation successfully in the microbiochip, and the ligation time was shortened from 4 hours in conventional laboratory method to 5 min in the microbiochip.
To enhance our understanding of toxicity mediated through the pathway by which TCDD stimulates gene expression, we have investigated genes whose expressions are changed after treatment with TCDD and/or MNNG in human Chang liver cell. First, we treated with MNNG and TCDD for two weeks to transform human Chang liver cell. We obtained cell looks like to be transformed and compared the differential gene expression by using cDNA chip (Macrogen) which carrys genes related with signal transduction pathways, oncogenes and tumor suppressor genes, etc. We found that TCDD up- or down-regulated 203 and 111 genes including oncogenes and tumor suppressor genes in human Chang liver cell two fold or more, respectively. Second, we compared the differential gene expression after treatment with TCDD only by using cDNA chip (Superarray) which carrys genes related with cell cycle regulations, and found that TCDD up regulated genes related with cell proliferation as well as cell growth inhibition in human Chang liver cell two fold or more, respectively. These results suggest that toxicity induced by TCDD may reflect sustained alterations in the expression of many genes and that the changes reflect both direct and indirect effects of TCDD.
The methylotrophic yeast Hansenula polymorpha has been extensively studied as a model organism for methanol metabolism and peroxisome biogenesis. Recently, this yeast has also attracted attention as a promising host organism for recombinant protein production. Here, we describe the fabrication and evaluation of a DNA chip spotted with 382 open reading frames (ORFs) of H. polymorpha. Each ORF was PCR-amplified using gene-specific primer sets, of which the forward primers had 5'-aminolink. The PCR products were printed in duplicate onto the aldehyde-coated slide glasses to link only the coding strands to the surface of the slide via covalent coupling between amine and aldehyde groups. With the partial genome DNA chip, we compared efficiency of direct and indirect cDNA target labeling methods, and found that the indirect method, using fluorescent-labeled dendrimers, generated a higher hybridization signal-to-noise ratio than the direct method, using cDNA targets labeled by incorporation of fluorescence-labeled nucIeotides during reverse transcription. In addition, to assess the quality of this DNA chip, we analyzed the expression profiles of H. polymorpha cells grown on different carbon sources, such as glucose and methanol, and also those of cells treated with the superoxidegenerating drug, menadione. The profiles obtained showed a high-level induction of a set of ORFs involved in methanol metabolism and oxidative stress response in the presence of methanol and menadione, respectively. The results demonstrate the sensitivity and reliability of our arrays to analyze global gene expression changes of H. polymorpha under defined environmental conditions.
본 연구는 진단용 DNA 칩의 자동판독 시스템을 제안하는 것을 목적으로 한다. 일반적인 자동판독 시스템의 사양을 정의하고 그 구현방법을 제안하였다. 응용 예로서 자궁경부암 진단용 DNA 칩을 대상으로 GenePix 스캐너 프로그램 환경에 적용하였다. 영상획득은 GenePix 의 라이브러리를 사용하여 HTML 언어로 구현하였고, 영상의 판단과 보고서 생성은 Microsoft Visual C++ 6.0를 사용하여 COM 형태로 구현하였다. 결과 보고서는 한글 2002 문서에 환자 정보와 결과 정보 등에 해당하는 곳에 미리 정의된 표지문자열들을 삽입하여 템플릿을 만들었다. 판독 시스템은 템플릿을 읽어들여 처리 결과의 내용으로 표지문자열들을 치환하여 보고서를 생성하였다. 제안한 시스템을 통해서 스캐닝을 통한 영상획득, 영상읠 판독, 결과 보고서 생성으로 구성된 전체 판독과정이 사용자의 개입 없이 자동으로 처리될 수 있었다. 본 시스템은 기존에 수작업을 자동화여 판독 시간을 단축하고 판독 기준을 정량화하여 진단용 DNA 칩이 대량검사 활용되는 공헌할 것으로 기대된다.
Jung-Kyu Lee;Hongyul An;Youngil Koh;Chang-Hoon Lee
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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제87권3호
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pp.309-318
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2024
Background: There is limited data regarding the clinical outcomes of clonal hematopoiesis of indeterminate potential (CHIP) in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD). This study aimed to evaluate the clinical significance of CHIP as a COPD biomarker. Methods: This retrospective study was conducted on patients with COPD who were enrolled prospectively in the Seoul National University Hospital Airway Registry from January 2013 to December 2019 and underwent pulmonary function and blood tests. We evaluated the CHIP score according to smoking status and severity of airflow obstruction. Results: We analyzed next-generation sequencing data to detect CHIP in 125 patients with COPD. Current smokers had a higher prevalence of CHIP in combination of DNMT3A, TET2, and PPM1D (DTP), DNA methyltransferase 3 alpha (DNMT3A), and protein phosphatase, Mg2+/Mn2+ dependent 1D (PPM1D) genes than in never- or ex-smokers. CHIP of DTP and DNMT3A genes was significantly associated with current smokers (adjusted odds ratio [aOR], 2.80; 95% confidence interval [CI], 1.01 to 7.79) (aOR, 4.03; 95% CI, 1.09 to 14.0). Patients with moderate-to-severe airflow obstruction had a higher prevalence of CHIP in most of the explored genes than those with mild obstruction, although the difference was not statistically significant. CHIP in ASXL transcriptional regulator 1 (ASXL1) genes was significantly associated with history of mild, severe, and total acute exacerbation. Conclusion: Given that CHIP in specific genes was significantly associated with current smoking status and acute exacerbation, CHIP can be considered as a candidate biomarker for COPD patients.
인간 유두종 바이러스(HPV)에 의한 감염은 자궁경부암의 원인이다. HPV DNA의 세포 검사에서의 변화는 향후 더 도전적으로 발전을 기대한다, HPV 유전자형의 감염에 대한 새로운 HPV의 DNA(22종) chip 검사는 최근 한국에서 많이 개발되었다. 이 연구의 목적은 서울 지역에서 HPV 감염의 빈도와 유전자형 분포를 알아보고자 하였다. 지난 2015년 한 해 동안 서울지역 종합병원 내원객을 대상으로 총 5,614 검체의 검사에서 HPV 유전자형은 1,596 (28.4%)에서 검출되었다, 이중 한 종류의 유전자형은 가진 검체(n=831) 중고위험 HPV는 679 (42.5%), 저위험 HPV는 152 (9.5%)로 나타났다. 이중 자주 발견 유전자형은 HPV-16 (16.5%), 58 (15.2%), 52(8.8%), 51 (7.1%), 56 (5.9%) 순이었다. 혼합 유전자형(n=219) 중 2종(n=176, 11.0%), 3종(n=37, 5.9%), 4종(n=2, 0.1%)이 나타났다 이에 본 연구는 종합 병원 방문자의 HPV 감염을 조사하였다. 이러한 연구 결과는 HPV 전국적으로 분포 및 백신의 도입을 안내하는 데 이용될 수 있을 것으로 사료되며 진료에 중요한 정보를 제공하며 역학적 추가 연구가 요구된다.
한국생물정보시스템생물학회 2000년도 International Symposium on Bioinformatics
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pp.41-44
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2000
With the advent of DNA microarray and "chip" technologies, gene expression in an organism can be monitored on a genomic scale, allowing the transcription levels of many genes to be measured simultaneously. Functional interpretation of massive expression data and linking such data to DNA sequences have become the new challenges to bioinformatics. I will us yeast cell cycle expression data analysis as an example to demonstrate how special database and computational methods may be used for extracting functional information, I will also briefly describe a novel clustering algorithm which has been applied to the cell cycle data.
본 논문은 microarray를 분석하기위한 표준화에 대한 여러 방법들을 소개하고 비교해보았다. Microarray 연구는 Human Genome Project에서 파생된 여러 생명공학 기술 중 가장 널리 사용되는 기술로 기존에는 하지 못했던 총체적인 유전자의 발현상황을 탐색할 수 있다는 장점을 지니고 있으나, 자료들에 일정한 패턴이 나타나거나 잡음이 첨가되어 정보의 추출이 용의하지 않다는 단점을 지니고 있다. 특히 자료에 일정한 패턴이 있는 경우에 올바르지 못한 결론을 이끌어낼 수도 있기에 이 패턴을 제거하는 표준화작업은 microarray 분석에 있어서 매우 중요한 처리과정이다. 본 논문에서는 표준화방법들을 소개하고 각각 가지고 있는 장단점을 실제 국내에서 얻어진 자료를 통해 비교하였고, 그 결과 LOWESS 적합을 통한 표준화방법이 타 방법에 비해 유용한 점이 많음을 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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