KIEE International Transactions on Electrophysics and Applications
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v.11C
no.2
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pp.23-27
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2001
Microarray-based DNA chips provide an architecture for multi-analyte sensing. In this paper, we report a new approach for DNA chip microarray fabrication. Multifunctional DNA chip microarrays were made by immobilizing many kinds if DNAs on transducers (particles). DNA chip microarrays were prepared by randomly distributing a mixture of the particles on a chip pattern containing thousands of micro meter-scale sites. The particles occupied different sites from array to array. Each particle cam be distinguished by a tag that is established on the particle. The particles were arranged on the chip pattern by the random fluidic self-assembly (RFSA) method, using hydrophobic interaction.
To investigate the molecular events of controlling intramuscular fat (or marbling), which is an important factor in the evaluation of beef quality, we performed cDNA microarray analyses using the longissimus dorsi muscle and back fat tissues. For this study, we constructed normalized cDNA libraries: fat tissues in native Korean cattle (displaying 1,211 specific genes), and muscle tissues in native Korean cattle (displaying 1,346 specific genes). A bovine cDNA chip was constructed with 1,680 specific genes, consisting of 760 genes from muscle tissues and 920 genes from fat tissues. The microarray analysis in this experiment showed a number of differentially expressed genes, which compared the longissimus dorsi muscle (Cy5) with back fat tissue (Cy3). Among many specific differentially expressed genes, 12-lipoxygenase (oxidizing esterified fatty acids) and prostaglandin D synthase (differentiation of fibroblasts to adipocytes) are the key candidate enzymes that should be involved in controlling the accumulation of intramuscular fat. In this study, differentially and commonly expressed genes in the muscle and fat tissues of native Korean cattle were found in large numbers, using the hybridization assay. The expression levels of the selected genes were confirmed by semi-quantitative RT-PCR, and the results were similar to those of the cDNA microarray.
Park, Keon-Uk;Hwang, Mi-Sun;Suh, Seong-Il;Suh, Min-Ho;Kwon, Taeg-Kyu;Park, Jong-Wook;Cho, Jae-We;Choi, Eun-Ju;Baek, Won-Ki
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.35
no.4
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pp.299-308
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2000
Recently developed cDNA microarray or DNA chip technology allows expression monitoring of expression of hundreds and thousands of genes simultaneously and provides a format for identifying genes as well as changes in their activity. In order to search for changes in gene expression after X irradiation in HL60 cells, cDNA microarray technique was done. In this study, expression of 588 human genes (including oncogenes, tumor suppressor genes, cell cycle regulator genes, intracellular signal transduction modulator genes, apoptosis related genes, transcription factor genes, growth factors and receptor genes, cytokine genes, etc) were analyzed. For cDNA microarray analysis mRNAs were extracted from control and 8 Gy-irradiated HL60 cells. As a result the changes in expression of several genes were observed. This alteration of gene expression was confirmed by reverse transcription-polymerase chain reaction. The expression of heat shock 60 KD protein, c-jun, erythroid differentiation factor, CPP32, myeloid cell nuclear differentiation antigen, MAP kinase-activated protein kinase, interleukin-8, monocyte chemotactic peptide 1 and RANTES genes was increased, but the expression of p55CDC gene was decreased after X irradiation.
In this presentation, we will discuss several recent achievements developed in my laboratory for microarray-based diagnosis of human genetic mutations including HNF-1 and BRCA1 mutations. To determine the presence of the genetic mutations in a human sample, we prepared allele-specific oligonucleotide chips from selected mutation sites and generated target probes using a tow-step method for Cy-3 DNA $samples^{1)}$ or in vitro transcription of promoter-tagged PCR products for Cy-3 RNA $samples^{2)}$. Hybridization of the target probes to the chips successfully identified all of the genotypes for the tested sites. For more reliable diagnosis, we also employed single base extension (SBE) reaction and zip-code microarray technique for our strategy. Particularly we developed an efficient PNA zip-code microarray for the detection of $HNF-1{\alpha}$$mutations^{3)}$. Using multiplex SBE reactions and zip-code strategy, we were able to correctly diagnose several mutation sites in exon 2 of $HNF-1{\alpha}$ with a wild-type and mutant including a MODY3 patient. These works represent successful applications of DNA microarray technology for the diagnosis of human genetic mutations.
Park, Yu-Rang;Lee, Hye-Won;Cho, Sung-Bum;Kim, Ju-Han
Proceedings of the Korean Society for Bioinformatics Conference
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2005.09a
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pp.29-34
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2005
DNA microarray becomes a major tool for the investigation of global gene expression in all aspects of cancer and biomedical research. DNA microarray experiment generates enormous amounts of data and they are meaningful only in the context of a detailed description of microarrays, biomaterials, and conditions under which they were generated. MicroArray Gene Expression Data (MGED) society has established microarray standard for structured management of these diverse and large amount data. MGED MAGE-OM (MicroArray Gene Expression Object Model) is an object oriented data model, which attempts to define standard objects for gene expression. To assess the relevance of DNA microarray analysis of cancer research it is required to combine clinical and genomics data. MAGE-OM, however, does not have an appropriate structure to describe clinical information of cancer. For systematic integration of gene expression and clinical data, we create a new model, Cancer Genomics Object Model.
Jo, Gwang-Myeong;Jang, Jae-U;Kim, Seong-Jun;Park, Yeong-Hun
한국생물공학회:학술대회논문집
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2001.11a
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pp.739-740
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2001
DNA microarray with a set of 37 Corynebacterium glutamicum genes encoding enzymes for primary metabolism of glycolysis, TCA cycle and lysine biosynthesis, anaplerosis etc was constructed on slide glass in triplicate. With this DNA microarray, metabolic characteristics of the lysine-producing strain was analyzed during different phase of the cultivation. The major differences in using glucose as a carbon source instead of sucrose was found in the anaplerolytic enzymes, which control the interconversion of C3 and C4 metabolites. Also, the expression profile of these major enzymes was found to be quite distinct among different phases of growth.
Doxorubicin is a highly-valuable anthracycline-family polyketide drug with a very potent anticancer activity, typically produced by a Gram-positive soil bacterium called Streptomyces peucetius. Thanks to the recent development of Streptomyces genomics-based technologies, the random mutagenesis approach for Streptomyces strain improvement has been switched toward the genomics-based technologies including the application of DNA microarray systems. In order to identify and characterize the genomics-driven potential target genes critical for doxorubincin overproduction, three different types of doxorubicin overproducing strains, a dnrI(doxorubicin-specific positive regulatory gene)-overexpressor, a doxA (gene involved in the conversion from daunorubicin to doxorubicin)-overexpressor, and a recursively-mutated industrial strain, were generated and examined their genomic transcription profiles using Streptomyces DNA microarray systems. The DNA microarray results revealed several potential target genes in S. peucetius genome, whose expressions were significantly either up- or down-regulated comparing with the wild-type strain. A systematic understanding of doxorubicin overproduction at the genomic level presented in this research should lead us a rational design of molecular genetic strain improvement strategy.
Two color or cDNA microarrays are extensively used to study relative expression levels of thousands of genes simultaneously. 0かy two tissue samples can be hybridized on a single microarray slide. Thus, a microarray slide necessarily forms an incomplete block design with block size two when more than two tissue samples are under study. We also need to control for variability in gene expression values due to the two dyes. Thus, red and green dyes form the second blocking factor in addition to slides. General design problem for these microarray experiments is discussed in this paper. Designs for factorial cDNA microarrays are also discussed.
Proceedings of the Korean Statistical Society Conference
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2003.10a
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pp.331-334
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2003
마이크로 어레이(microarray)실험에서 표준화(normalization)는 유전자의 발현수준에 영향을 미치는 여러 기술적인 변인을 제거하는 과정이다. cDNA microarray normalization에 있어 여러 방법이 제안되었지만, 이중 print-tip 효과가 존재할 때 사용되는 방법으로 print-tip lowess normalization이 대표적으로 사용된다. normalization에 사용되는 lowess 함수는 데이터의 특성에 따라 window width를 정해야만 연구의 목적에 맞는 결과를 도출할 수 있다. 본 논문에서는 각각의 tip에서 최적의 window width를 계산하는 절차를 논의하였다. 또한 이의 결과와 기존의 같은 window width를 사용하는 print-tip lowess normalization 결과와 비교 평가하여 normalization의 기본 원칙에 대한 타당성을 확인하였다.
Communications for Statistical Applications and Methods
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v.11
no.1
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pp.59-77
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2004
Since the introduction of DNA microarray, a revolutionary high through-put biological technology, a lot of papers have been published to deal with the analyses of the gene expression data from the microarray. In this paper we review most papers relevant to the cDNA microarray data, classify them in statistical methods' point of view, and present some statistical methods deserving consideration and future study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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