• 제목/요약/키워드: DNA method

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품질 정보와 퍼지 추론 기법을 이용한 DNA 염기 서열 배치 알고리즘 (A DNA Sequence Alignment Algorithm Using Quality Information and a Fuzzy Inference Method)

  • 김광백
    • 지능정보연구
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    • 제13권2호
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    • pp.55-68
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    • 2007
  • 분자 생물학(computational molecular biology) 분야에서 DNA 염기 서열 배치 알고리즘은 다양한 방법으로 개선되어 왔다. 본 논문에서는 기존의 DNA 염기의 품질 정보(quality information)를 이용한 DNA 염기 서열 배치 방법을 개선하기 위하여 퍼지 논리 시스템(fuzzy logic system)과 DNA 염기 서열 단편의 특징을 적용한 품질 정보와 퍼지 추론 기법을 이용한 DNA 염기 서열 배치 알고리즘을 제안한다. 기존의 알고리즘은 Needleman-Wunsch가 제안한 전역 배치 알고리즘에 각 DNA 염기의 품질 정보를 적용하여 DNA 염기 서열 배치 점수를 계산하였다. 그러나 전체 DNA 염기의 품질 정보를 이용하여 계산하기 때문에 DNA 염기 말단 부분의 품질이 낮은 경우에는 DNA 염기 서열 배치 점수를 계산하는 과정에서 오차가 발생한다. 본 논문에서는 기존의 품질 정보를 이용한 알고리즘을 개선하여 DNA 염기 서열의 말단 부위의 품질이 낮은 경우에도 정확히 서열을 배치할 수 있도록 한다. 또한 DNA 염기 서열 단편의 길이와 낮은 품질의 DNA 염기 빈도를 퍼지 논리 시스템에 적용하여 DNA 염기 서열 배치 점수를 계산하는데 적용되는 매핑 점수 인자(parameter)를 동적으로 조정한다. 제안된 알고리즘의 성능 평가를 위해 NCBI(National Center for Biotechnology Information)의 실체 유전체 데이터를 받아 성능을 분석한 결과, 제안된 알고리즘이 기존의 품질 정보만을 이용한 알고리즘 보다 DNA 염기 서열 배치에 있어서 효율적임을 확인하였다.

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DNA 코딩 기반 카오스 시스템의 퍼지 모델링 (DNA coding-Based Fuzzy System Modeling for Chaotic Systems)

  • 김장현;주영훈;박진배
    • 대한전기학회:학술대회논문집
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    • 대한전기학회 1999년도 추계학술대회 논문집 학회본부 B
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    • pp.524-526
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    • 1999
  • In the construction of successful fuzzy models and/or controllers for nonlinear systems, the identification of a good fuzzy inference system is an important yet difficult problem, which is traditionally accomplished by a time-consuming trial-and-error process. In this paper, we propose a systematic identification procedure for complex multi-input single-output nonlinear systems with DNA coding method. A DNA coding method is optimization algorithm based on biological DNA as conventional genetic algorithms(GAs) are. The strings in the DNA coding method are variable-length strings, while standard GAs work with a fixed-length coding scheme. the DNA coding method is well suited to learning because it allows a flexible representation of a fuzzy inference system. We also propose a new coding method fur applying the DNA coding method to the identification of fuzzy models. This coding scheme can effectively represent the zero-order Takagi-Sugeno(TS) fuzzy model. To acquire optimal TS fuzzy model with higher accuracy and economical size, we use the DNA coding method to optimize the parameters and the number of fuzzy inference system. In order to demonstrate the superiority and efficiency of the proposed scheme, we finally show its application to a Duffing-forced oscillation system.

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DNA Microarray Probe Preparation by Gel Isolation Nested PCR

  • Wang, Hong-Min;Ma, Wen-li;Huang, Hai;Xiao, Wei-Wei;Wang, Yan;Zheng, Wen-Ling
    • BMB Reports
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    • 제37권3호
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    • pp.356-361
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    • 2004
  • To develop a simplified method that can rapidly prepare DNA microarray probes in a massive scale, a lambda phage genomic DNA-fragments library was constructed for the microarray-probes collection. Four methods of DNA band recovery from the first PCR products were tested and compared. The DNA microarray probes were collected by a novel method of nested PCR that was mediated by gel isolation of the first PCR products. This method was named GIN-PCR. The probes that were prepared by this GIN-PCR technique were used as subjects to fabricate a DNA microarray. The results showed that a wooden toothpick was superior to the other 3 methods, since this technique can steadily transfer the DNA bands as the template of the second PCR after the first PCR. A group of probes were successfully collected and DNA microarrays were constructed using these probes. Hybridization results demonstrated that this technique of DNA recovery and probe preparation was rapid, efficient, and effective. We developed a cost-effective and less labor-intensive method for DNA microarray probe preparation by nested PCR that is mediated by wooden toothpick transfer of the DNA bands in the gel after electrophoresis.

Methods for the Extraction of DNA from Water Samples for Polymerase Chain Reaction

  • Jung, Jae-Sung;Lee, Young-Jong
    • Journal of Microbiology
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    • 제35권4호
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    • pp.354-359
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    • 1997
  • Methods for the extraction of DNA from water sample were approximated. Four different procedures of DNA extraction were carried out with pellets obtained from centrifugation of 4 liter water samples. The recovery efficiency and purity of DNA extracted by each method from different sources were compared. DNA yield varied with extraction methods, Method I, which involves enzymatic and freeze-thaw lysis steps and phenol and phenol-chloroform purification of extracted nucleic acid, showed a significantly higher yield and purity than the other methods. The use of glass beads in the DNA extraction methods improved the purity of DNA suitable for PCR. Bovine serum albumin in the PCR reaction mixture was useful in reducing inhibitory effects of contaminants. The efficiency of an extraction method was determined by the detection of the aer of Aeromonas hydrophila with PCR. The lower limit of detection of A. hydrophila from seeded tap water was 2 CFU/ml in PCR when method I was used for DNA preparation.

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견과류로부터 효율적인 DNA 추출 방법 비교 (Comparison of methods of DNA extraction from tree nuts)

  • 서승만;박샛별;김미주;김해영
    • 한국식품과학회지
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    • 제50권4호
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    • pp.357-361
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    • 2018
  • 본 연구에서는 견과류로부터 식품 분석에 사용될 DNA를 4가지 방법으로 추출하고 그 효율을 비교하였다. 동일한 양의 시료를 사용하여 추출된 DNA의 양은 CTAB법이 가장 우수한 것으로 확인되었지만, 추출 시간이 수배이상 오래 걸리고 유기용매를 사용한다는 한계점이 있다. 다른 방법들과 DNA 추출 양의 차이가 큰 잣, 캐슈너트, 피스타치오 너트, 땅콩의 시료는 CTAB법이 가장 효율적인 방법으로 판단되며, 호두, 헤이즐넛, 아몬드의 시료는 변형 CTAB법과 실리카 막법이 CTAB법을 대체할 수 있을 것으로 판단된다. 추출된 DNA를 식물 내재유전자 및 각 견과류에 특이적인 유전자를 사용하여 PCR을 진행하였으며, 모든 추출 방법에서 DNA가 정상적으로 증폭되는 것을 확인하였다.

유전자재조합 감자의 검정을 위한 DNA분리 및 PCR검출의 최적조건 탐색 (Optimized Condition of Genomic DNA Extraction and PCR Methods for GMO Detection in Potato)

  • 신원선;김명희
    • 한국식품과학회지
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    • 제35권4호
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    • pp.591-597
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    • 2003
  • 국내에서 시판되는 감자와 수입 감자스낵류로부터 상용 DNA 추출 kit 및 CTAB-phenol/chloroform 추출법등을 이용하여 시료특성에 따른 genomic DNA를 추출방법을 선정하고 PCR 정성검사를 실시하였다. 생감자의 경우 STE 용액으로 과량의 전분을 제거한 다음 DNA를 추출한 경우 순도 높은 DNA를 추출할 수 있었으며 상용 추출 kit를 이용한 경우 lysis buffer와 함께 ${\alpha}-/{\beta}$-amylase를 각각 또는 혼합으로 처리하거나 추출된 DNA 용액에 마지막 단계에서 효소를 처리한 시료군에서 고순도의 DNA를 추출할 수 있었으며, 효소 처리군에서는 ${\alpha}-/{\beta}$-amylase를 혼합으로 처리한 경우에 DNA 추출수율이 높았다. 냉동가공감자의 경우 silica-coated bead법을 이용하여 효소를 처리한 경우와 CTAB-페놀 클로로포름 처리군에서 DNA가 추출되었다. 또한, 각 방법으로 추출한 DNA에 대하여 감자의 내인성 유전자인 Pss 프라이머를 사용하여 PCR을 한 결과 모든 시료에서 추출된 DNA에 대하여 내부표준유전자 증폭산물이 검출되었다. 고도의 가공처리를 거친 수입 감자스낵(fabricated potato chips)과 냉동가공 감자(frozen fried potato) 등은 계면활성제인 CTAB(cetyl trimethyl ammonium bromide)과 페놀-클로로포름 혼합액을 이용하여 추출하고 이를 template로 하여 PCR 증폭을 실시하였다. 그 결과, Fig. 8에 제시한 바대로 감자의 내인성 유전자인 Pss 특이적 산물인 216bp의 산물이 냉동감자가공품과 감자칩에서 검출되었으며 재조합유전자인 New leaf plus 유래의 증폭산물(234bp)와 New lear Y유래의 증폭산물(225bp)는 검출되지 않았다. 본 실험의 결과 시료의 가공특성과 적용한 추출 kit 및 방법에 따라 genomic DNA 순도 및 추출수율이 크게 차이가 났으며 이것이 결국 PCR 결과에 의음성 혹은 의양성 등에 영향을 미치게 될 것으로 판단된다. 또한, 동일한 DNA추출방법에 의해서도 DNA가 추출되지 않은 경우가 있어서 동일한 시료에서 2회 반복 추출하는 것이 의음성결과를 피할 수 있는 방법으로 판단된다.

측방유동방식 신속 DNA 교잡 분석법의 개발 (Development of a Method for Rapid Analysis of DNA Hybridization)

  • 정동석;최의열
    • 미생물학회지
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    • 제39권2호
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    • pp.114-117
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    • 2003
  • 유전자의 기능을 분석하는 과정에서 특정한 염기 서열의 존재여부를 확인하는 분석법은 필수적이다. 현재 사용되고 있는 Southern및 Northern blotting방법은 시간이 오래 걸리며, 온도 등과 같은 외부 조건을 엄격하게 조절하여야 한다. 본 연구에서는 측방유동방식을 이용한 크로마토그라피법을 응용하여 새로운 간편용 DNA분석법을 개발하였다. 이 측방유동형 DNA 분석 스트립은 시료가 적용되는 샘플패드, 이동하여 분리되고 교잡반응이 일어나는 전개용 막, 그리고 시료가 계속하여 이동하기 위한 흡수패드로 구성되어 있다. 모델 시스템으로 HIV와 HCV에 대한 포획 및 표적 DNA를 합성하고 스트립을 제조하였다. 시료를 샘플패드에 적하한 후 교잡반응체의 생성여부와 상대적인 양은 GSI형광 스캐너로 분석하였다. 교잡반응이 매우 빠르게 진행되고 세척과정이 없음에도 불구하고 비특이적인 교차 반응이 거의 관찰되지 않았다. 기존의 DNA 교잡방법과 비교하여 볼 때 이 새로운 방법으로 DNA/DNA 교잡 실험을 보다 더 쉽고, 간편하고, 그리고 빠르게 할 수가 있을 것으로 예상된다.

소량의 Bifidobacterium 배양액에서 genomic DNA 추출을 위한 신속/간단한 방법 (A Micromethod for Rapid and Simple Isolation of Genomic DNA from Small Scale Culture of Bifidobacterium)

  • 제갈수;박희경;송지은;허태련;소재성
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제23권6호
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    • pp.781-783
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    • 1995
  • A method is described for the rapid and simple isolation of genomic DNA from 3 ml culture of Bifidobacterium. The method is expected to be used in gene manipulation of Bifidobacterium spp. The isolated DNA using this method is shown to be an excellent substrate for restriction endonuclease digestion and ligation with T4 DNA ligase.

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홍조류인 한국산 김종에서의 염색체 DNA 분리방법 (Rapid and Efficient Purification of Nucleic Acids from the Macroalga Porphyra(Rhodophyta))

  • 류태형;최학선;최경희;이춘환
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제27권6호
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    • pp.1166-1172
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    • 1998
  • A method for the isolation and purification of DNA from a red algae, Porphyra was innovated. The innovation of the method consists mainly of three steps that include sodium acetate treatment, chloroform extraction, and 0.2 volume isopropanol precipitation step. The sodium acetate treatment was designed to remove polysaccharide contamination, and the isopropanol step to remove proteins and salts contaminents. Genomic DNA,s of several species(for example, P. tenera, P. yezoensis, P. seriata, and P. pseudolinearis) was successfully isolated by the innovated method. The amount of DNA purified from one g of sample material with the innovated method was 53 g in average. The resulting DNA was characterized to include high molecular weight and showed no nuclease activity. The DNA was pure enough to be digested directly by various restriction enzymes without any difficulties. Porphyra DNA was pure enough and adequate for amplification reaction through the polymerase chain reaction (small nuclear rDNA PCR amplification).

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Lactobacillus spp 로부터 Genomic DNA추출을 위한 신속/간단한 방법 (A Rapid Small Scale Method for Extraction of Genomic DNA from Lactobacillus spp.)

  • 이석용
    • KSBB Journal
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    • 제15권4호
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    • pp.411-413
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    • 2000
  • 본 연구에서는 Lactobacillus crispatus KLB46의 genomic DNA를 빠르고, 간단하게 소량 (3 mL)의 배양액에서부터 추출하는 방법을 확립하였다. 이 방법을 이용하여 L. crispatus KLB46로부터 total genomic DNA를 분리한후 peR과 제한효 소처리를 하여 전기영동으로 확인하였다. 질의 정상세균총을 이루고 병원성균의 증식을 억제하는 그램양성균인 L. crispatus KLB46의 genomic DNA의 신속한 추출방법은 이 균주의 유 전공학연구에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

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