Malau-Aduli, A.E.O.;Nishimura-Abe, A.;Niibayas, T.;Yasuda, Y.;Kojima, T.;Abe, S.;Oshima, K;Hasegawa, K.;Komatsu, M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권11호
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pp.1484-1490
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2004
Mitochondrial DNA haplotypes from the displacement-loop (D-loop) region (436 bp) were genotyped and sequenced in Japanese Black beef cattle raised in the same herd. Correlation coefficients between mitochondrial DNA haplotypes, maternal lineage, birth weight, preweaning average daily gain, weaning weight, post weaning average daily gain and yearling weight were computed. The objective was to study the relationship between maternal and postnatal growth traits and to investigate if postnatal growth of calves to yearling age could be accurately predicted from mitochondrial DNA haplotypes. Results of the phylogenetic analysis revealed 17 maternal lineages and four mitochondrial DNA haplotypes. There were strong, positive and highly significant (p<0.001) correlations among maternal traits ranging from 0.52 to 0.98. Similarly, among postnatal growth traits, most of the correlations were also strong, positive and highly significant (p<0.001); the highest correlation of 0.94 was between preweaning average daily gain and weaning weight. However, correlations between mitochondrial DNA haplotypes and postnatal growth traits were very low, mostly negative and non-significant (p>0.05) ranging from -0.05 to 0.1. Prediction of postnatal growth from mitochondrial DNA yielded very low $R^{2}$ values ranging from 0.002 to 0.019. It was concluded that mitochondrial DNA polymorphism has no significant association with postnatal growth from birth to yearling age, and by implication, nuclear rather than cytoplasmic DNA, accounts for most of the genetic variation observed in postnatal growth of Japanese Black cattle. Therefore, mitochondrial DNA genotyping at an early age has no bearing on the accurate prediction of the future growth performance of calves.
Kawabe, K.;Worawut, R.;Taura, S.;Shimogiri, T.;Nishida, T.;Okamoto, S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제27권1호
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pp.19-23
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2014
Here, we studied the genetic diversity of native fowls in Laos by analyzing a mitochondrial DNA (mtDNA) sequence polymorphism. A 546-bp fragment of the mtDNA D-loop region was sequenced in 129 chickens from the areas of Vientiane, Luang Prabang and Pakse. In total, 29 haplotypes were identified and formed five clades. Haplotype diversity and nucleotide diversity of the native fowls in Laos were $0.85536{\pm}0.0172$ and $0.010158{\pm}0.005555$, respectively. Although the Laotian native fowls were distributed across five clades, most of them were clustered in two main clades (A and B), which were originated in China. The other haplotypes were contained in clades D, F, and I, which originated from continental southeast Asia. These results suggest that multiple maternal lineages were involved in the origin of domestic chicken in Laos. Moreover, there appear to be at least two maternal lineages, one from China and the other from the southeast Asian continent.
Park, So Young;Jeong, Mi Suk;Han, Chang Woo;Yu, Hak Sun;Jang, Se Bok
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권4호
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pp.637-647
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2016
Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) is a critical eukaryotic replication accessory factor that supports DNA binding in DNA processing, such as DNA replication, repair, and recombination. PCNA consists of three toroidal-shaped monomers that encircle double-stranded DNA. The diverse functions of PCNA may be regulated by its interactions with partner proteins. Many of the PCNA partner proteins generally have a conserved PCNA-interacting peptide (PIP) motif, located at the N- or C- terminal region. The PIP motif forms a 310 helix that enters into the hydrophobic groove produced by an interdomain-connecting loop, a central loop, and a C-terminal tail in the PCNA. Post-translational modification of PCNA also plays a critical role in regulation of its function and binding partner proteins. Structural and biochemical studies of PCNA-protein will be useful in designing therapeutic agents, as well as estimating the outcome of anticancer drug development. This review summarizes the characterization of eukaryotic PCNA in relation to the protein structures, functions, and modifications, and interaction with proteins.
In order to use nervous necrosis virus (NNV) virus-like particles (VLPs) as a delivery tool for heterologous antigens or plasmids, we attempted to produce red-spotted grouper nervous necrosis virus (RGNNV) VLPs displaying a partial region of viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) glycoprotein at the surface and VLPs that are harboring DNA vaccine plasmids within the VLP. A peptide encoding 105 amino acids of VHSV glycoprotein was genetically inserted in the loop region of NNV capsid gene, and VLPs expressing the partial part of VHSV glycoprotein were successfully produced. However, in the transmission electron microscope analysis, the shape and size of the partial VHSV glycoprotein-expressing NNV VLPs were irregular and variable, respectively, indicating that the normal assembly of capsid proteins was inhibited by the relatively long foreign peptide (105 aa) on the loop region. To encapsulate by simultaneous transformation with both NNV capsid gene expressing plasmids and DNA vaccine plasmids (having an eGFP expressing cassette under the CMV promoter), NNV VLPs containing plasmids were produced. The encapsulation of plasmids in the NNV VLPs was demonstrated by PCR and cells exposed to the VLPs encapsulating DNA vaccine plasmids showed fluorescence. These results suggest that the encapsulation of plasmids in NNV VLPs can be done with a simple one-step process, excluding the process of disassembly-reassembly of VLPs, and NNV VLPs can be used as a delivery tool for DNA vaccine vectors.
Seventeen haplotypes were detected from the complete mitochondrial DNA control region sequences analyzed from eighty individuals of two Tibetan domestic sheep breeds. The nucleotide composition of all the sequences was 33.0% A, 29.7%T, 22.9%C and 14.4%G; G+C was 37.3%. The length of the sequences ranged from 1,107 bp to 1,259 bp. The difference between them was primarily due to 3-5 copy numbers of a 75 bp tandem repeat sequence. The NJ phylogenetic tree (the number of replications of bootstrap test is 1,000) presented three major domestic sheep lineages, which suggested that modern Tibetan sheep breeds are derived from three maternal sources.
우리나라는 세계 녹용 생산량의 80% 이상을 소비한다. 하지만, 중국산, 뉴질랜드산 녹용과 수입이 금지된 북미산 녹용이 원용이라고 불리는 고가의 러시아산 녹용으로 둔갑 판매, 유통되는 문제가 다수 보고되고 있다. 따라서 본 연구에서는 녹용의 원산지 동정 기술을 개발하고자 러시아, 중국, 뉴질랜드 및 북미산 녹용으로부터 미토콘드리아 D-loop 영역에 대한 원산지 특이적인 분자 마커를 탐색할 목적으로 수행되었다. 결과적으로 중국산 녹용으로부터 약 60~70 bp의 결실 부위를 확인하고 이들 부위를 특이적으로 확인할 수 있는 PCR법을 통해서 중국산 녹용의 정확한 감별 가능성을 확인하였다. 따라서 본 연구는 미토콘드리아 DNA 유래의 유전자들에 대한 염기서열 분석과 이를 이용한 PCR 동정법이 녹용의 원산지 감별에 적용될 수 있음을 보여주는 사례라 생각된다.
기존의 Cx 배열을 참고로 종내${cdot}$종간을 통하여 잘 보존되어져 있는 영역에서 primer를 설계하고, 은어의 난소를 재료로 하여 PCR을 실시하였다. 증폭된 cDNA 단편을 이용하여, 5'RACE 및 3'RACE법에 의해 미지의 영역을 cloning하여 난소에서 발현하는 Cx cDNA의 전염기배열을 결정하였다. 기존의 Cx 배열과 상동성을 비교한 결과, 대서양산 민어의 Cx32.7과 $63.8{\%}$, bovine의 Cx44와 $61.6{\%}$ 및 대서양산 민어의 Cx32.2와는 $56.7{\%}$의 상동성이 나타났다. 본 cDNA는 35,028 Da의 분자량을 code하는 open reading frame (ORF)으로 구성되어 있어, 은어 Cx35로 명명되었다. 또한 아미노산 배열의 친수성${\cdot}$소수성 영역의 분포예측 결과, 4곳의 소수성 영역과 4곳의 친수성 영역을 교차하는 전형적인 Cx의 구조와 일치하였으며, Cx family의 공통${\cdot}$필수적인 배열인 제1세포외 domain의 consensus 배열 및 제2세포외 domain의 consensus 배열도 존재하였다.
국내에 서식하는 수달의 경우 멸종 위기 I 급 종으로 지정되어 국가적인 차원에서 관리하고 있는 보호종이다. 수달의 유전자원 보호 및 체계적인 관리를 위한 기초자료로 활용하기 위해 경남지역에 서식하는 수달의 계통유전학적 유연관계를 mtDNA D-loop 지역의 염기서열분석과 MS marker 분석을 통하여 실시하였다. 그 결과 mtDNA D-loop 지역의 676 bp 부분만 보았을 때 5개의 SNP가 확인되었으며, 6개의 haplotype이 추정되었다. 진주 인근 지역과 거제도 인근 지역에서 수집한 시료는 지역 내 유전적 거리가 지역 간의 유전적 거리보다는 가까운 것을 확인 할 수 있었고, 진주와 거제도 지역 간의 유전적 거리는 확연히 구분이 되었다. MrBays의 Bayesian Markov chain Monte Carlo 분석법을 이용하여 추정한 phylogeny 분석결과 뚜렷한 2개 그룹(진주와 거제/창녕 그룹)으로 분류 되었다. Parsimonious median-joining network [5] 분석의 결과 또한 2개의 뚜렷한 그룹으로 분류되어 phylogeny 분석결과와 일치하는 결과를 보였다. MS marker를 이용하여 추정한 유전적 거리지수를 활용하여 추정한 consensus tree의 결과 또한 크게 2개의 그룹으로 분류 되며, 첫 번째 그룹에는 거제도지역 시료, 진주인근지역 시료 일부 그리고 창녕 우포늪에서 채취한 시료가 하나의 그룹으로 나뉘어 졌으며, 두 번째 그룹에는 진주인근 지역에서 채취한 시료만이 포함되어 하나의 그룹을 형성하여, mtDNA를 이용하여 분석한 것과 일부 다른 결과를 보였다. 이러한 결과의 차이는 모계를 추정하는 mtDNA와 상염색체 상의 MS marker의 특성에 기인한 것으로 보이나, 경상남도에 서식하는 수달을 크게 진주와 거제지역의 수달로 구분하는 것에는 유사한 결과를 보여 서식지 별 유전적 고정현상이 있음을 확인할 수 있었다. 하지만 좀 더 정확한 검증을 위해서는 수달의 full mtDNA 분석 및 국내에서 서식하는 수달에 적합한 MS marker발굴을 통한 대립유전자형을 분석하는 추가 연구가 필요하며, 전국 단위의 수달 시료를 확보하여 유전적 유연관계 분석을 실시한다면 한국 내 수달의 보전 및 보호에 도움이 될 것으로 사료되어 진다.
LAMP (Loop-mediated Isothermal Amplification)법은 PCR를 기반으로 등온에서 autocycling 가닥 변위 DNA 합성에 의존하며, Bst polymerase를 사용하여 진단하는 방법이다. 이것은 대상 DNA의 여섯 개의 배열을 인식하는 4개의 특정 primer의 도움을 받아 단시간 안에 병원체를 식별하는 높은 특이성을 지니고 있다. 본 연구에서는 LAMP로 수생에서 위험한 병원체인 Vibrio alginolyticus의 특별한 LAMP primer를 제작하였으며, 신속한 진단을 위해 MgSO4, dNTP, Betaine, Bst polymerase의 최적 반응 조건의 특이성 및 기존의 PCR보다 10배 정도의 민감하다는 것을 확인하였다. 또한, 디자인 되어진 LAMP primer가 다른 Vibrio 종들 중 오직 V. alginolyticus에서만 반응한 것을 확인 할 수 있었다. 본 논문에서는 병원체 세균인 V. alginolyticus의 빠르고 민감한 효과적인 진단으로 양식 질병들을 조기에 발견할 수 있도록 개발하였다.
mtDNA D-loop 970 bp의 염기서열을 이용하여 제주견과 우리나라의 토종견인 진도견, 풍산견, 삽살견과의 관계와 외국 품종들과의 유연관계를 분석하였다. 또한 초가변영역인 598 bp의 D-loop 부위가 보고된 염기서열들은 추가로 GenBank에서 수집하여 전체 30개의 품종으로부터 214종의 단상형들을 이용하여 AMOVA 분석을 하였다. 염기서열 분석결과 제주견에서 5종류, 진도견 4종류, 삽사리 4종류, 풍산견 5종류, 이스트라이카와 웨스트라이카(Canis familiaris) 각 2종류, 회색늑대(Canis lupus) 2종류, 코요테(Canis latrans) 2종류의 단상형을 얻었다. 한국, 일본, 중국, 유럽의 견품종 사이에 지역의 차이로부터 오는 변이성(1.4%)은 동일 지역에 서로 다른 품종들 사이의 변이(16.2%) 보다도 매우 적은 변이를 보이고 있었다. 개의 조상으로 여기는 늑대와 오늘날 개의 집단과의 염기서열 분산성분 분석에서 개(1.63%)와 늑대(3.64%)의 집단내 변이보다는 개와 늑대 사이의 진단간 변이(4.51%)가 높게 나타난 것으로 나타났으며, 이 값을 근거로 하면 개와 늑대사이에 유전적 분기시기는 약 1~2백 만년 전인 것으로 추정되었다. 염기서열의 변이성과 유연관계분석에서 제주견, 진도견, 풍산견, 삽살견 모두 독특한 계통분기를 형성하지 못했다. 즉 이러한 결과는 국내 토종견들 사이와 또는 유입된 외래품종들 사이에 오랜 세월 동안 서로 상당한 교류가 있었을 것으로 생각되었다. 제주견에서는 삽살이, 진도견, 풍산견의 염기서열과 가까운 유연관계를 보이는 단상형들이 산포되어 있는 것으로 확인되어 제주견 집단이 우리나라 재래종들과의 모계조상에 있어서 구분은 어려운 것으로 확인되었다. 제주견이 집단으로 고정정도를 가늠하는 Fixation index인 Fst값은 진도견, 풍산견, 삽살견 가운데 가장 낮게 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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