To assess genetic diversity amoug 21 strains from sixleen Frrsn~i~nn species , we used RAPD(rando1n amplified pol.ymorphic DNA) analysis based on PCR(po1ymerase chain reaction). Eleven primers showing Ule polymorphism were chosen from the 40 random pnmers-tcstcd. A total of 263 polymorphic bands were generated by the primers and the size of amplified DNA fragments ranged from 0.1 lo 3.0 kb. Sirnilku-it), coefficients between strains were calcnlatcd, and UPGMA cluster analysis was used to generate a dendrogram showing relationships among them. The results from RAPD-PCR analysis were grouped into four main groups at the si~nilarity level of 0.627.
Direct PCR from intact fungal cells is not readily suitable to all fungi mainly because of difficulties in rupturing the cell walls. Microwave irradiation has been proven to be useful in fungal DNA extraction protocol. Here we describe a fast template preparation method for PCR amplification from Aspefillus nidulans conidiospores using microwave irradiation. We optimized the duration far microwave irradiation, and the amount of template DNA for PCR. Amplification from samples prepared in this manner was so efficient that we could get PCR products with size enough to identify transformants. We believe that this is a time-saving procedure for screening true transformants of A. nidulans.
Purpose: We tried to evaluate the long term efficacy and positive predictive factors of interferon-alpha treatment in children with chronic hepatitis B. Methods: The study population included 113 children who received interferon therapy between May 1982 and July 2002 (20 years) for chronic hepatitis B in Department of Pediatrics, Yonsei University College of Medicine. Male to female ratio was 2.3 : 1 and the mean age at diagnosis was $11.1{\pm}4.1$ years old. Response to treatment was defined as normalization of alanine aminotransferase (ALT), disappearance of HBeAg and HBV-DNA Eighty two children responded while 32 did not. Interferon-alpha was given intramuscularly for 6 months at a dosage of $3{\times}10^6$ unit, 3 times weekly. In relapsed cases, lamivudine or interferon retreatment was done. Results: Seroconversion rate was 77.0% in terms of HBeAg, 74.3% in terms of HBV-DNA, and 80.5% in terms of ALT normalization after treatment. Seroconversion rate of both HBeAg and HBV-DNA was 72.6%. Analyzed by life table method, the effect of the treatment had been maintained over 10 years after cessation of therapy. Pre-treatment ALT level was the only significant positive predictive factor of response. Eleven cases (13.4%) relapsed, and 2 out of 3 showed response when treated with lamivudine and 1 out of 3 with interferon retreatment. Conclusion: Interferon-alpha showed significant efficacy in the treatment of chronic hepatitis B in our study. Further studies about the effect of interferon therapy on complications of hepatitis such as hepatocarcinoma, cirrhosis are warranted.
Purpose : Perinatal hepatitis B viral infection is decreasing; however, 10% of babies to HBeAg positive mothers still become chronic carriers despite perinatal prophylaxis. Although, the cause of prophylaxis failure is still unclear, an importance of maternal HBV-DNA level at the delivery time has been suggested. This study was established to certify if it would be a useful predictable factor for the outcome of perinatal prophylaxis. Methods : Twenty-nine HBeAg positive mothers whose babies had known outcomes of prophylaxis were selected. To determine the amount of maternal HBV-DNA, a quantitative PCR was performed with the WHO International Standard for HBV DNA NAT assays. Results : The mean logarithm HBV-DNA level of mothers with failed outcomes was significantly higher than that of mothers with succeessful outcomes (7.99 vs. 6.72, P=0.015). The predictable maternal HBV-DNA cut-off level to prophylaxis outcome was $2.83{\times}10^7copies/mL$ (100 pg/mL). None out of the case 16 (0%) who had below this level, and 5 out of 13 (38.5%) who had above this level of maternal HBV-DNA failed in perinatal prophylaxis. Conclusion : Mothers with higher levels of HBV-DNA at delivery time would be prone to a worse outcome of prophylaxis using the conventional approach. Perinatal prophylaxis failure rate can be reduced, if we try to introduce more potent prophylactic treatment into the cases with this risk factor.
This study was carried out with the purpose of looking into the transcriptionally regulated genes related to the anther development, characterizing them, and applying their promoters to induce male-sterile plants and restore their fertility. Fifteen anther-specific clones were isolated from the anther cDNA library of Chinese cabbage through the differential screening and sequenced partially at both ends. These partial sequence data showed that cDNA clones BAN52, 84, 101, and 229 are very similar to polygalacturonase, ascorbate oxidase, $H^+-translocating$ ATPase, and pectin esterase genes respectively. However, the other clones have not been matched to any of gene sequences in data bank. In northern dot blot analysis, the transcripts of cDNA clone BAN5, 10, 33, 52, 57, 102, 103, 215, 229 appeared in the flower bud of 2.1 mm in length and their amounts were gradually increased along with the anther development. Transcription of cDNA clone BAN32, 54, 62, 84, 101 began in flower bud of 3.9 mm, which is the late stage in anther development. However, the transcription of BAN87 was very small, but its transcript was detected in all anther developmental stages.
The five different foodborne pathogenic bacterial genera of Escherichi, Salmonella, Shigella, Vibrio and Listeria are important sources of foodpoison. However, the method was not developed to simultaneously differentiate these five bacteria at molecular level. The optimized concentrations of the four major PCR cocktail components of $MgCl_2$, dNTPs, primers and template DNA were determined when ERIC (enterobacterial repetitive intergenic consensus)-PCR reactions were carried out to differentiate the five differnet foodborne pathogenic bacteria. The optimized concentration of $MgCl_2$ was determined to be 2 mM in order to obtain a consistent fingerprinitng pattern. The similar fingerprinting pattern was obtained when ERIC primers and dNTPs were added up to the concentrations of 2 ${\mu}M$ and 200 ${\mu}M$, respectively. As for template DNA, the numbers of PCR fragments were not affected, but their intensities were increased as the concentrations of the DNA were increased.
Lee Eun-Kyung;Lee Seung-Ryeol;Kim Dong-Soon;Chung Duck-Jin
Journal of the Institute of Electronics Engineers of Korea SC
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v.43
no.5
s.311
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pp.44-59
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2006
This paper describes the efficient implementation of DNA sequence generate system with genetic algorithm for reducing computation time of NACST. The proposed processor is based on genetic algerian with fitness functions which would suit the point of reference for generated sequences. In order to implement efficient hardware structure, we used the pipelined structure. In addition our design was applied the parallelism to achieve even better simulation time than the sequence generator system which is designed on software. In this paper, our hardware is implemented on the FPGA board with xc2v6000 devices. Through experiment, the proposed hardware achieves 467 times speed-up over software on a PC and sequence generate performance of hardware is same with software.
The effects of several parameters on PCR amplification in using RAPD were studied. The results of this study suggest that approximately 15 ng of genomic DNA in $20\;{\mu}l$ of reaction mixture results in discrete and reproducible PCR products. In addition, the results indicate that concentration or amounts of reaction components studied are highly inter-dependent in their effects, and RNA can interfere severely with PCR amplification. Suitable concentrations or amounts of reaction components were found to be 30 ng of 10-mer primer, $200\;{\mu}M$ of dNTP, 0.001% gelatin 1.5 mM $MgCl_2$, 10 mM Tris-Cl (pH 8.8), 50 mM KCl, 0.1% Triton X-100, 2 units of Taq DNA polymerase, and 15 ng of RNase-treated genomic DNA in $25\;{\mu}l$ of reaction mixture.
Effects of anthranilic acid on normal mammary gland growth were examined in SHN/Mei female virgin mice. Anthranilic acid was given to the experimental groups as drinking water at the concentrations of 0.01, 0.02 or 0.04% for 21 days beginning 2-3 months of age. The control group received tap water only. RNA content and RNA/DNA ratio in mammary glands were significantly higher in mice given 0.04% anthranilic acid than in the control, while not mammary DNA content. The results indicate that chronic ingestion of anthranilic acid can induce an enhancement of proliferation and differentiation of mammary cells.
Beijing White Chickens laying larger eggs and smaller eggs were respectively used as parental individuals for mating to produce the F1 progeny and then the F1 progeny individuals mated to produce 125 individuals of the F2 progeny. Three bands associated with the egg weight performance were identified from DNA fingerprints of the 125 individuals generated with a bovine minisatellite probe BM6.5B. The simple linear correlation analysis showed that the coefficients of correlation between frequencies of the three bands (DB1, DB2 and DB3) and egg weights were -0.6, -0.6 and 0.9, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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