Lee, Da Young;Cho, Jae Ho;Lim, Woon Ki;Shin, Hae Ja
Journal of Life Science
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v.24
no.1
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pp.54-60
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2014
Aromatic hydrocarbons are toxic environmental pollutants that are detrimental to the ecosystem and human health. Among them, chlorotoluene and nitrotoluene are toxic to hydrobios and irritate the skin, eyes, and respiratory organs of humans. We herein report the development of recombinant microbial biosensors for cheap and rapid monitoring of chlorotoluene and nitrotoluene compounds. Plasmids were constructed by inserting the xylR regulatory gene for BTEX (benzene, toluene, ethylbenzene, and xylene) degradation into upstream of Po' (the DmpR activator promoter Po with the deletion of its own upstream activating sequences) or Pu (the cognate promoter of XylR)::lacZ (the ${\beta}$-galactosidase gene) and transformed into Escherichia coli $DH5{\alpha}$. In the presence of inducers, the biosensor cells immobilized in agarose developed a red color in 1-2 h due to the hydrolysis of chlorophenol red ${\beta}$-D-galactopyranoside (CPRG), a substrate of ${\beta}$-galactosidase that was expressed by the inducers. Among BTEX, high responses were specifically observed with o-, m-, p-chlorotoluene ($0.1{\mu}M-100 mM$) and o-, m-, p-nitrotoluene (0.1 mM-100 mM). Po' demonstrated higher responses than those with Pu. The biosensors immobilized in agarose showed good stability after 21 days' storage at $4^{\circ}C$, and responses in untreated wastewater spiked with chlorotoluene and nitrotoluene, suggesting they can be used to detect compounds in wastewater.
Lysyl oxidase (LOX), extracellular matrix enzyme, is catalyzing lysine-derived crosslinks in collagen and elastin. Recently, several LOX-like proteins (LOXL, LOXL2, LOXL3 and LOXL4) have been identified in human but their specific functions are still largely unknown. The purpose of this study was to evaluate the function of the LOX family genes during odontoblastic differentiation of human dental pulp (HDP) cells induced with odontogenic supplement (OS). The messenger RNA (mRNA) expression of LOX family genes and differentiation markers was assessed by reverse transcriptase polymerase chain reaction analysis (RT-PCR). The formation of mineralization nodules was evaluated by alrizarin red S staining. Amine oxidase activity of HDP cells was measured by peroxidase-coupled fluormetric assay. The expressions of differentiation markers, such as alkaline phosphatase (ALP), osteopontin (OPN), osteocalcin (OCN), dentin matrix protein1 (DMP1), dentin sialophosphoprotein (DSPP) in HDP cells were increased after treatment with OS media. The LOX and LOXL mRNA expression were gradually increased in OS media, whereas LOX enzyme activities were markedly detected on day 7. The mRNA expression and LOX enzyme activity of collagen type I was very similar to the pattern of LOX gene. In this study, the expression of LOX and its isoforms, and activity of LOX were highly regulated during odontoblastic differentiation. Thus, these results suggest that LOX plays a key role in odontoblastic differentiation of HDP cells.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.42
no.4
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pp.312-318
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2015
The aim of this study was to investigate the possibility of the supernumerary teeth for the stem cell source in dentistry. The Real Time Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (Real Time qRT-PCR) method was used to evaluate the differentiation toward the odontoblast of the supernumerary dental pulp stem cells (sDPSCs). Supernumerary dental pulp stem cells were obtained from 3 children (2 males and 1 female, age 7 to 9) diagnosed that the eruption of permanent teeth was disturbed by supernumerary teeth. The common genes for odontoblasts are alkaline phosphatase (ALP), osteocalcin (OC), osteonectin (ON), dentin matrix acidic phosphoprotein 1 (DMP-1), dentin sialophosphoprotein (DSPP). The sDPSCs were treated for 0 days, 8 days and 14 days with additives and then Real Time qRT-PCR was performed in intervals of 0 days, 8 days and 14 days. The alizarin-red solution staining was performed to visualize the stained color for the degree of calcification at 7 days, 14 days, 21 days and 28 days after treating additives to the sDPSCs. From the result of the Real Time qRT-PCR, the manifestation exhibit maximum value at 8 days after additive treatment and shifted to a decrease trend at 14 days. Alizarin-red solution staining exhibit light results at 7 days after staining and generalized dark result at 14 days. Consequently, in studies with sDPSCs, appropriate treatment time of additives for Real Time qRT-PCR is 8 days. Also, a suitable period of Alizarin-red solution staining is 14 days.
Although it has been reported that lysyl oxidase (LOX) is involved in odontoblastic differentiation, the role of LOX on odontoblastic differentiation by hydrogen peroxide ($H_2O_2$) have not been clarified. In the present study, we investigated whether $H_2O_2$, reactive oxygen species (ROS), is modulated the messenger RNA (mRNA) expression and activity of LOX during odontoblastic differentiation of human dental pulp (HDP) cells. The mRNA expression was quantified by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis, and LOX enzyme activity was measured by high sensitive fluorescent assay. Expression of the odontoblastic differentiation marker genes were assessed in the presence and absence of specific small interfering RNAs (siRNAs) of the LOX and LOXL. The $H_2O_2$-induced mRNA expression of LOX family was significant reduction of LOX, LOXL, and LOXL3 mRNA levels in HDP cells. LOX enzyme activity was increased at $H_2O_2$ 0.3 mM for 24 hours. The mRNA expression of alkaline phosphatase (ALP), osteopontin (OPN), and osteocalcin (OCN) was inhibited by LOX- and LOXL-specific siRNAs whereas the mRNA expression of dentin matrix protein1 (DMP1), and dentin sialophosphoprotein (DSPP) was inhibited by LOX-specific siRNA. In LOX enzyme activity, siRNA-induced knockdown of both LOX and LOXL inhibited the total amine oxidase activity in HDP cells, as in the case of mRNA expression. In conclusion, the essential role of $H_2O_2$ on odontoblastic differentiation suggests that its regulation by LOX may have pharmacologic importance in HDP cells.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.41
no.10
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pp.1460-1466
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2012
The purpose of this study was to evaluate plasticizer pollution levels in mudflat solar salt, salt water and sea water of the nationwide saltpan. Also, it was analyzed the relationship between DEHP in solar salt and PVC mat following private period. DEP (ranging from 0.00 to 1.55 ppb), DIBP (0.00~2.38), DBP (0.00~4.90), DEHA (0.00~2.32), and BBP (0.00~1.45) in solar salt were shown a extremely low concentrations, and DEHP was present a concentrations ranging from 0.00 to 268.5 ppb in solar salt. Further, DMP, DPrP, DNPP, DNHP, and DCHP were not detected in all solar salt. Phthalate in sea water and salt water was present a infinitesimal amount levels. DEHP levels in sea water and salt water were not shown a high risk levels ranging from 0.00 to 3.4 ppb, and from 0.00 to 21.4 ppb, respectively. As expected in PVC mat of nationwide saltpan, the correlation between DEHP in solar salt and PVC mat private period showed a low positive correlation coefficient ($r^2$=0.0362).
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.46
no.2
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pp.219-225
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2019
The purpose of this study was to investigate the odontoblast gene expression related to the subculture speed of supernumerary dental pulp stem cells (sDPSCs). The stem cell is undifferentiated cells which has the ability to differentiate into various cells. Specific stimulation or environment induces cell differentiation, and these differentiation leads to bone or muscle formation. 20 sDPSCs were obtained from 20 children under aseptic condition. During the culture through the 10th passage, the third passage cells which showed short subculture period and 10th passage cells which showed long subculture period were earned. Each cell was divided into differentiated group and non-differentiated group. Quantitative real-time polychain reaction (q-RT-PCR) was performed for each group. The genes related to odontoblast differentiation, Alkaline Phosphatase (ALP), Osteocalcin (OCN), Osteonectin (ONT), Dentin sialophosphoprotein (DSPP) and Dentin matrix acidic phosphoprotein 1 (DMP-1), were measured. Differentiated cells showed more gene expression levels. Undifferentiated cells showed higher gene expression level in 10th passages but differentiated cells showed higher gene expression level in 3rd passages. Cells that showed faster subculture period showed relatively lower gene expression level except for OCN and DSPP.
Three solvent systems, chlorobenzene (ink 1), chlorobenzene/o-dichlorobenzene (ink 2) and chlorobenzene/tetrahydronaphthalene (ink 3), were compared as printable inks for the fabrication of polymer light-emitting diodes (PLEDs) using poly[2-methoxy-5-(2-ethylhexyl-oxyl)-1,4-phenylenevinylene (MEH-PPV) as an emissive material and an inkjet printer (Fujifilm Dimatix DMP-2831). Ink 1 clogged the printer's nozzle and gave non-uniform film. Inks 2 and 3 were used to fabricate PLEDs with ITO/PEDOT:PSS/MEH-PPV/LiF/Al configurations. The best performance (turn-on voltage, 3.5 V; luminance efficiency, 0.17 cd/A; luminance, 1,800 cd/m) was obtained when ink 3 was used to form the emissive layer (thickness, 49 nm), attributable to the better morphology and suitable thickness of the MEH-PPV layer.
The objective of this study was to develop a polymeric drug delivery system for camptothecin (CPT), capable of improving its therapeutic index and reducing its side effects. A monomeric conjugate, 3,6-endo-methylene-1,2,3,6-tetrahydrophthalimidoethanoylcamptothecin in (ETECPT) between CPT and 3,6-endo-methylene-1,2,3,6-tetrahydrophthalimidoethanoic acid was synthesized. Its homo-and copolymer with acrylic acid (AA) were prepared by photopolymerization using 2,2-dimethoxy-2-phenylacetophenone (DMP) as a photoinitiator. The monomer and its polymers were characterized by IR, $^1$H- and $^{13}$ C-NMR spectra. The ETECPT content in poly(ETECPT-co-AA) obtained by elemental analysis was 82 wt%. The number-average molecular weights of the polymers determined by gel permeation chromatography were as follows: M$_{n}$ = 11,400 for poly(ETECPT), M$_{n}$ = 17,900 for poly(ETECPT-co-AA). The $IC_{50}$/ values of ETECPT and its polymers against cancer cells were much larger than that of CPT. Our results from the in vivo antitumor activity indicated that all polymers show high antitumor activity than CPT at a dose of 100 mg/kg./kg.
Objectives : The purpose of this study is to observe the effects of $Sa-Am$ lung sedating acupuncture (LS) on wrist pulse changes in healthy participants. Method : Forty healthy subjects participated in this study, and were divided into an acupuncture group and controlled group. Using a three-dimensional pulse imaging system (DMP-3000), wrist pulse was measured before, immediately after, 30 minutes after and 60 minutes after acupuncture in the acupuncture group, with the rest in controlled group. Sixteen parameters between the acupuncture group and the controlled group were analyzed at Cun, Guan and Chi in each time. Result : After LS acupuncture, wrist pulse sixteen parameters were changed significantly according to the time at each measuring region. 1. Heart rate significantly decreased in immediately after, 30 minutes after and 60 minutes after, Pulse period significantly increased in 30 minutes after and 60 minutes after. 2. T4 didn't significantly changed, T-T4 significantly increased in immediately after, 30 minutes after and 60 minutes after. T4/T, T4/(T-T4), T1/T, T5/T significantly decreased in immediately after, 30 minutes after and 60 minutes after. (T-T4)/T significantly decreased in immediately after, 30 minutes after and 60 minutes after. T5 significantly increased in 30 minutes after and 60 minutes after. 3. Modulus of elasticity significantly decreased in left Cun 60 minutes after, significantly increased in left Chi 30 minutes after. 4. Variance of Amplitude significantly increased in right Guan 60 minutes after. 5. Area of pulse significantly increased in left Cun 60 minutes after, left Chi 30 minutes after and right Cun 60 minutes after. Systolic pulse area significantly decreased left Chi 30 minutes after, right Cun immediately after, 30 minutes after and 60 minutes after, right Guan in immediately after. 6. Energy/min significantly decreased in left Chi 60 minutes after and right Cun immediately after. EIx significantly decreased in right Cun immediately after. 7. In both sides Cun, Guan, Chi wrist pulse, a lot of significant changes in right Cun and left Chi appeared, and then followed by the left Cun, right Guan. Conclusion : This study analyzed that the correlation between LS acupuncture and radial pulse(cun, guan, chi) is considered to be meaningful, hereafter clinical studies on this are needed.
This study was carried out to estimate the possibility on the removal of phenols and anilines, which were contained in pulp or dye waste water, and the reusability of plant materials, shepherd's purse and turnip. Most of phenols catalyzed with shepherd's purse were removed more than 90% in the presence of $H_2O_2$, and the removal was ranged from 53.1% for 2,6-DMP to more than 99% for 2,4,6-TCP when turnip was used as catalysts. The removal of anilines catalyzed with shepherd's purse was ranged from 42.2% for 2-CA to 78.7% for 3,4-DCA in the presence of $H_2O_2$, and in case of turnip, from 31.5% for 2-CA to 90.0 % for 2,4-DCA. The reuse of plant materials was proved to be possible for not only the batch method but also the continuous method. No decreasing removal was observed during 30 cycles in waster water contaminated with 100ppm of 2,4-DCP. However, it was observed that the removal was decreased with increasing the number of cycles in higher concentration of 2,4-DCP(800ppm). Therefore, it could be suggested that the number of reusable cycles depends on the initial concentration of substrates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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