• 한국식품과학회지
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• 제13권1호
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• pp.67-73
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• 1981

Streptomyces chibaensis로부터 분비하는 이눌라아제를 일연(一連)의 에탄올 침전, DEAE-cellulose 칼럽크라마토그래피 및 Sephadex-200 gel frltration 방법에 의(依)해서 120배 분리정체하였고 정제된 효소의 최적 pH는 6.5이고 pH $5.0{\sim}9.0$ 범위내에서는 비교적 안정성을 보였다. 효소는 $Mn^{++},\;Mg^{++}$ 및 $Ca^{++}$의 존재하에서는 약간 활성화되었고, $Hg^{++}\;Ag^{++}$의 존재하에서는 강한 비활성화를 보였다. 정제된 효소는 endo 형(型)으로 Km 값은 $4.54{\times}10^{-4}M$이었다.

• 한국식품과학회지
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• 제14권1호
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• pp.1-5
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• 1982

고려인삼(Panax ginseng C. A. Meyer)중의 인베르타아제(invertase)를 연구하기 위하여 조(粗)인삼 인베르타아제를 분리 조제한 후 DEAE-cellulose 관크로마트 그래피, Sephadex G-75를 통한 젤 여과 등의 방법에 의하여 정제하였다. 정제된 인베르타아제는 specific activity가 조(粗)인베르타아제에 비해 64.7배 증가되었으며 효소활성의 recovery는 약 19.5%였다. 정제된 인베르타아제는 polyacrylamide gel electrophoresis에 의해 균일성(homogeneous)을 나타내었고 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis에서는 2개의 subunits로 분리되었다. 두 subunits의 분자량은 각각 28,000과 20,000이었고 따라서 인삼 인베르타아제의 분자량은 48,000으로 계산되었다. 정제된 인베르타아제는 전형적인 단백질의 UV 흡수 스펙트럼을 나타내었다.

• KSBB Journal
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• 제9권5호
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• pp.499-505
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• 1994

Bacillus macerans cyclodextrin glucanotrans­f ferase(CGTase)를 전분흡착법과 DEAE--cellulose 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 효소의 분자량 은 67,000이였고 monomer였다. 정제된 효소는 전 분을${\alpha}$-, ${\beta}$-, ${\gamma}$-CD 로 전환시켰으며, CD생성비율은 각각 1 : 1.68: 0.32였다. ${\alpha}$-CD와 D-glucose의 coupling반응 초기에는 maltohexose가 주로 생성되었고, 그 후에 다른 oligosaccharide들이 생성되었다 .. a­C CD의 가수분해반응 초기에는 주로 maltotetrose가 생성되였고 그 이후에는 소량의 다른 이Igosa­C ccharide들이 생성되었다. 정제된 효소의 좋은 기질인 maltotriose 로부터 maltosyl 이나 D-glucopy ranosyl group이 전이될 수 있는데, 본 연구에서는 D정lucosyl transfer가 우세하였다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제17권3호
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• pp.205-210
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• 1988

돼지감자로부터 inulase를 분리한 다음 황산 암모늄침전, Sephadex G-100 겔 투과 및 DEAE-cellulose 크로마토그래피를 통하여 정제하여 최종적으로 회수율 42%의 6,470배 정제된 효소를 얻었다. 이 효소의 분자량은 57,000으로서 하나의 폴리펩티드로 구성되어 있었다. 이 효소의 최적 pH와 최적온도는pH5.0과 $33^{\circ}C$이었으며 몇 가지의 기질중 inulin에 대해서만 특이적으로 작용하였고 이에 대한 Km값은 20mM, Vmax는 943unit/mg-단백질이었다. 또한 이 효소는 metalloenzyme이 아니며 $Mg^{2+},Ca^{2+},\;Hg^{2+}$등의 금속 이온에 의해 그 작용이 완전히 저해되었다.

• 대한의생명과학회지
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• 제12권3호
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• pp.225-231
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• 2006

Fibrinolytic enzyme was purified from the fruiting bodies of Lepista nuda, using DEAE-Cellulose chromatography, Phenyl Sepharose chromatography, and Mono-S column chromatography. The substance has a molecular weight of 30006.62 Da as measured by MALD-TOF mass spectrometry. The N-terminal amino acid sequence of the enzyme was Tyr-Pro-Ser-Pro-Ser-His-Gln-Thr-Ala-Val-Asn-Ala-Ile-Ile-X. The activity of the enzyme was inhibited by PMSF, indicating that the enzyme is a serine protease. No inhibition was found with E-64, pepstatin, and EDTA. It has broad substrate specificity for synthetic peptides. The enzyme was stable up to $30^{\circ}C$. The enzyme hydrolyzes both Aa and y chains of human fibrinogen but did not show any reactivity for $B{\beta}$ chain of human fibrinogen.

• 대한의생명과학회지
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• 제8권4호
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• pp.245-250
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• 2002

Fibrinolytic enzyme has been purified from the edible mushroom, Tricholoma sejunctum using DEAE-cellulose chromatography, Phenyl-Sepharose chromatography and Mono-S column chromatography. The apparent molecular mass of purified enzyme was estimated to be 17100 Da by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and 19000 Da by gel filtration, Indicating that it was a monomer. The N-terminal amino acid sequence of the enzyme was Ala-Thr-Tyr-Lys-Ile-X-Ser-Ala-Thr-His-Gln-X-X-Leu-Val. It has a pH optimum at pH 9.5, suggested that purified enzyme was a alkaline protease. The activity of purified enzyme was inhibited by EDTA and 1,10-phenanthroline, indicating that purified enzyme is a metalloprotease. The activity of purified enzyme was increased by Zn$^{2+}$ and Co$^{2+}$, however, the enzyme activity was totally inhibited by Hg$^{2+}$.

• KSBB Journal
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• 제28권2호
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• pp.131-136
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• 2013

The hydrolysates prepared with various enzyme digestion of Capsosiphon fulvescens were used to measure the inhibitory effects against angiotensin I converting enzyme (ACE). The commercially available enzymes such as Celluclast, Viscozyme, Lysing enzyme, Flavourzyme, Alcalase and Pectinex were used to digest C. fulvescens and produce hydrolysates. The maximum ACE inhibitory activity was observed using Alcalase hydrolysis (72.9%). The optimal conditions of Alcalase extraction were pH 8.0 and extraction time for 12 hr. The hydrolysates were fractionated using preparative-LC and anion-exchange chromatography on DEAE-cellulose and the fraction B and B-2 were isolated. The ACE inhibitory activity of fraction B-2 by anion-exchange chromatography was 82.6%. The molecular weight of fraction B-2 estimated using size exclusion chromatography was about 1 kDa. The monosaccharide composition of the fraction B-2 was determined to be mannose (1.1%), glucuronic acid (1.3%), galactose (1.3%) and glucose (96.3%).

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권4호
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• pp.409-416
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• 1992

Bacillus cereus에 의한 pullulanase 생산의 최적 배양온도 및 배양시간은 각각 $15^{\circ}C$, 72시간이고, 기본배지에 casein, nutrient broth, egg albumin의 첨가는 효소의 생산을 크게 증가시켰다. 황산암모늄분획, CM-cellulose와 DEAE-cellulose column chromatography에 의하여 효소를 정제하였고 정제효소의 specific activity는 29.09U/mg protein, 수율은 17.1이었다. 정제효소는 polyacrylamide disc gel electrophoresis에 의하여 single band를 나타내었고, SDS-polyacrylamide disc gel electrophoresis에 의하여 추정된 분자량은 61,000, 등전점은 pH7.0, 최적온도는 $40^{\circ}C$, 최적 pH는 6.5, $35^{\circ}C$ 이하에서 안정하였고, pH 안정 범위는 6.5-11.0, $Ag^{+}$, $Hg^{2+}$, $Zn^{2+}$에 의하여 크게 저해되었고, $Ca^{2+}$은 효소의 내열성을 증가시켰다. 정제효소는 공시기질중 pullulan을 잘 분해시켰으며 pullulan에 대한 분해산물은 maltoriose이었다.

• 한국식품영양학회지
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• 제7권2호
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• pp.119-123
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• 1994

Aspergillus sp. BY-54 which produced a strong dextran hydrolyzing enzyme was isolated from soil. Using this strain, the optimal cultural conditions, enzyme purification and characterization were studied. The results are as follows : The optimal concentration of dextran as carbon source was l%. and the optimum temperature and the initial pH for enzyme production was 3$0^{\circ}C$, and 7.0, respectively. Dextranase was purified by DEAE-cellulose column chromatography with a linear gradient increase in NaCl. Km value of dextranase was 0.222%, and several glucans containing various types of glucosidic linkages such as DEAE-sephadex, CM-sephadex and sephadex G-100 were almost digested to a large extent with this dextranase. The enzyme was strongly inhibited by sodium fluoride, KMnO4 and p-CMB, while KCN caused 20% of activation.

• 한국식생활문화학회지
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• 제5권2호
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• pp.269-274
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• 1990

건시제조 중 invertase의 활성 변화를 조사하고 정제된 invertase의 효소적 특성에 관하여 실험한 바 그 결과는 다음과 같다. 건조가 진행됨에 따라 invertase의 활성은 증가하여 건조 10일째 최고 활성을 나타내었으며 그 이후는 감소하였다. 건시에서 invertase를 250 mM potassium phosphate(pH 7.4)로 추출하여 $(NH_4)_2SO_4$염석, DEAE-cellulose 및 sephadex G-200 column chromatography의 과정으로 정제한 결과 정제도는 조효소액보다 약 27배 증가되었으며 회수율은 약 11%였다. 최적 pH는 sucrose, raffinose에 대하여 각각 5.0과 6.0으로 나타났으며 최적온도는 $40^{\circ}C$였다. 열과 pH 안정성은 $50^{\circ}C$까지 그리고 pH 5 부근에서 안정하였다. Sucrose에 대한 $K_m$값은 2.5 mM이었으며, 정제된 invertase는 polyacrylamide gel 전기영동상에서 하나의 band를 나타내었다.