The present study was carried out to examine the fertilizability of the mouse oocytes pre-ex-posed to dbcAMP which is a well-known inhibitor of the oocyte maturation. The oocytes once cultured in the dbcMP-containing medium for a certain length of, time were cultivated in the dbcMp-free medium to induced the maturation, then mixed with sperms, and observed following culture for 24 hours. The fertilization rate of cocytes was judged by the index of the number of 2-cell embryo developed 24hr following insemination. The fertilization rate of the oocyte previously incubated with dbcAMP (100 g/ml) for 2, 4, 8 16 hours was 32.3, 14.5, 4.7 and 8.8%, respectively, while that of the control was 53.3% indicating that the fertilizability was decreased as a function of time exposed to dbcAMP. The pretreatment of dbcMP, however, didn't affect the process of sperm penetration to egg. In addition, there is no prominent changes in the morphological architecture of fertielized eggs which has been exposed to dbcAMP as revealed by electron microscopic observation. Consequendy, it can be concluded that the mouse cocytes once inhibited their maturation by dbcMP may retain, in some extent, the fertilizability, although most of the fertilized egg may not proceed to further development because of the failure of pronucleus formation.
Purpose: DBC2 (Deleted in Breast Cancer 2) has been indicated to be a tumor suppressor gene in many cancers including lung adenocarcinoma recently. In this study, we aimed to explore the expression status of DBC2 in different subtypes of lung adenocarcinoma (from pre-invasive to invasive lesions), and to determine if downregulation becomes more marked with pathological progression. Methods: We collected 172 tissue samples from different subtypes of lung adenocarcinoma and investigated the frequency of DBC2 loss by immunohistochemistry. Results: Our results indicated that DBC2 downregulation is a relatively frequent event in lung adenocarcinoma. Moreover, as the adenocarcinoma subtype turns to be more invasive, more downregulation occurred. Conclusion: We conclude that loss of DBC2 expression is an early and progressive event in the pathogenesis of lung adenocarcinoma. Positive DBC2 immunohistochemistry may become an indicator for early stage disease and better prognosis of lung adenocarcinomas.
Deleted in breast cancer-1 (DBC1) contributes to the regulation of cell survival and apoptosis. Recent studies demonstrated that DBC is phosphorylated at Thr454 by ATM/ATR kinases in response to DNA damage, which is a critical event for p53 activation and apoptosis. However, how DBC1 phosphorylation is regulated has not been studied. Here we show that protein phosphatase 4 (PP4) dephosphorylates DBC1, regulating its role in DNA damage response. PP4R2, a regulatory subunit of PP4, mediates the interaction between DBC1 and PP4C, a catalytic subunit. PP4C efficiently dephosphorylates pThr454 on DBC1 in vitro, and the depletion of PP4C/PP4R2 in cells alters the kinetics of DBC1 phosphorylation and p53 activation, and increases apoptosis in response to DNA damage, which are compatible with the expression of the phosphomimetic DBC-1 mutant (T454E). These suggest that the PP4-mediated dephosphorylation of DBC1 is necessary for efficient damage responses in cells.
In order to investigate the synergistic effect of dbcAMP and progesterone which are known as the agents to inhibit maturation of mammalian oocytes in vitro, the present studies were done and the results were obtained as follow: 1) if 10 $\\mug$/ml of dbcAMP or 2 $\\mug$/ml of progesterone was given into the medium, each of the agents at the concentration above did not give any inhibitory effect on the maturation of the mouse oocytes in vitro; 2) however, when the two agents at the concentration shown above were given together into the medium, the mouse oocytes were arrested at GV stage; and 3) the oocytes, precultured in the medium containing two agnts at the same concentration as above for four hours, resumed their maturation division upon transfer to the plain medium for the extended culture. Thus, it was found that dbcAMP and progesterone were capable to suppress the maturation of mouse oocytes at the suboptimal concentration when they were given together, and such inhibitory effect was reversible.
Journal of the Microelectronics and Packaging Society
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v.5
no.1
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pp.39-44
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1998
절연체기판으로서는 아루미나 세라믹 기판을 사용하고 전극으로서는 copper를 사용 하여 DBC공정으로 접합하여 제조하였다. 접합재료는 전처리과정을 거친다음 불활성기체 분 위기 하에서 1065~1083$^{\circ}C$의 온도로 1~60분 동안 유지시켜 접합하였다. 본 실험에서 접합 된 세라믹기판과 Cu의 계면의 SEM 관찰 결과 안정된 접합면이 생성되었으며 접합강도는 약 116MPa로 양호한 값을 얻었다. 또한 Al2O3/Copper 접합계면을 ESCA를 통하여 분석한 결과 CuAlO2의 화합물의 생성을 확인하였다. 이 DBC공정은 제조공정의 단순화를 실현시켜 대량생산에 적합함으로 전자부품 모듈생산에 유용하게 적용될 수있을것이다.
The uranium(VI) complexes with new unsaturated macrocyclic ligands of cryptand types and the neodymium(III) complexes with cryptand 222 and DBC ligands have been investigated polarographically in dimethylsulfoxide solvent. The reduction states, electron numbers involved in the reduction process, effects of the added acid on the polarograms of complexes, and the mechanisms of the reduction electrode reactions have been examined. The stability constants and mole-ratio of new complexes were also obtained by polarographic method. The reaction of ligands was controlled by the diffusion in the reduction with four electrons at a step, whereas the redox reaction with six electrons at three steps in $UO_2\;^{2+}$ complexes with macrocyclic ligands and the redox reaction with one electron at a step in $Nd^{3+}$ complexes with cryptand 222 and DBC have been observed. The imine ligands formed stable complexes with uranium(VI) above pH 7.0, and the neodymium(III) complexes with cryptand 222 and DBC ligands were stable above pH 4.0.
Donation-based crowdfunding(DBC) is conducted from voluntary participation by project operators. It requires a different operational strategy than general crowdfunding. However, there is a limited amount of research on the operational strategy of DBC. This study explores the value co-creation(VCC) strategy of DBC and analyzes the operation of DonorsChoose.org. The research questions encompass the following: First, we identify the VCC activities of DBC. Second, we uncover activities of the platform operators that facilitate the participation of project operators in VCC activities. Third, we explore how VCC activities affect project operational performance and platform performance in DBC. By adopting a single case study method on DonorsChoose.org, this study provides meaningful insight and detailed understanding into the VCC in DBC. First, VCC processes of DBC are identified(Co-ideation, Co-design, Co-funding, Co-operation, and Co-evaluation). Also, interactions between platform operators and project operators were defined at each stage. Second, this study confirmed that standardization and simplification of platform operators, support for pre- and post-activity, and high-quality information delivery activities were critical. Third, we confirm that these VCC activities improve VCC operational performance and platform performance. The theoretical significance of this study is that the concept of VCC, previously concentrated on participants with economic drivers(consumers and investors), has been applied to the context of DBC, a form of participation by participants with non-economic drivers(supporters and donors). In addition, this study practically contributes to the practice of VCC strategy among various platform operating strategies in DBC.
自記放射法을 이용하여 dbcAMP와 theophylline이 未成熟卵子의 RNA合成에 미치는 영향을 관찰하였다. 培養中인 未成熟卵子의 RNA合成은 dbcAMP와 theophylline에 의하여 抑制를 받았다. dbcAMP나 theophylline은 培養液(modified Krebs-Ringer bicarbonate solution)內에 100 $\\mu$g/ml 정도 들어 있으며 핵막(germinal vesicle)의 붕괴 되지 못하고 그대로 存在하며 그동안의 RNA合成은 극히 억제된 채로 남아 있다. 그러나 培養을 시작하여 2$\\sim$3時間後, 즉 핵막붕괴가 끝난 다음에 이들 억제물질을 배양액에 添加하면 正常卵子와 같이 성숙분열이나 RNA合成이 억제 됨이 없이 진행된다. 24時間동안 dbcAMP나 theophylline으로 성숙이 억제 되었던 卵子도 이들 억제물질을 제거하면 즉시 成熟分裂이 진행되며 RNA合成도 正常的으로 일어난다. 이런 結果로 미루어 dbcAMP등의 RNA合成 抑制機作에 한 가지 가능성을 추측할 수 있다. 즉 dbcAMP나 theophylline의 처리에 의해 細胞質內 cAMP의 농도가 높아지고 이 cAMP는 핵막붕괴나 染色質의 응집에 관여하는 단백질 合成을 誘導할 mRNA合成을 억제하며 이 때문에 卵子는 핵을 보유한채 그대로 남아 있는 것이다.
The research of fused oocytes was conducted to investigate the in vitro mejotic maturation of immature oocytes (GV oocytes) fused with oocytes in germinal vesicle breakdown (GVBD oocytes) in the presence of dbcAMP which is known as one of the strong inhibitors to GVBD. The immature oocytes fused together as well as those fused with GVBD oocytes proceeded to GVBD in 3 hr culture in plain medium. But in the medium containing dbcAMP (100$\mu$g/ml), the immature oocytes fused together did not show any GVBD and thus the fusion itself could not affect the inhibitory activity of dbcAMP. However, all of the immature oocytes fused with GVBD oocytes underwent GVBD in 3 hr culture despite of the presence of dbcAMP. When the culture was extended to 20 hr, nearly all of the immature oocytes fused together were still arrested at the GV stage in the presence of dbcAMP. But most of the fused oocytes which had shown GVBD during 3 hr culture developed to metaphase II stage extruding one or two polar bodies regardless of the presence of dbcAMP. In this experiment, it was found that two sets of the metaphase chromosomes were somewhat concomitant with a pair of the polar bodies in the fused egg. Upon the results of the present studies, it is assumed that there may be a maturation promoting factor(s) in the cytoplasm of the GVBD occytes, and this factor(s) possibly nullifies the function of dbcAMP.
To investigate the immunomodulatory roles of cyclic AMP (CAMP) on macrophage- and T lymphocyte-mediated immune responses, CAMP elevating agents were employed and carefully re-examined under the activation conditions of the cells. Various inhibitors tested dose-dependently blocked tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ production with IC$_{50}$ values ranged from 0.04 to 300 ${\mu}$M. Of the inhibitors, cAMP-elevating agents showed lower cytotoxicity assessed by lactate dehydrogenase (LDH) release, suggesting less toxic and more selective. In particular co-treatment of dbcAMP with a protein kinase C inhibitor staurosporine displayed the synergistic inhibition of TNF-${\alpha}$ production. The modulatory effect of dbcAMP on TNF-${\alpha}$ and nitric oxide (NO) was significantly affected by treatment time of dbcAMP. Thus, post-treatment of dbcAMP (three hours before LPS) abrogated dbcAMP's inhibitory activity and rather enhanced TNF-${\alpha}$ level up to 60%. In contrast, additional NO production was shown at the co-treatment of dbcAMP with LPS. Unlike simultaneous treatment of phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and interferon (IFN)-${\gamma}$co-treatment, the combination of dbcAMP with other NO-inducing stimuli did not show drastic overproduction of NO. cAMP elevating agents also diminished splenocyte proliferation stimulated by concanavalin (Con) A, phytohemaglutinin A (PHA) and lipopolysaccharide (LPS). In addition, dbcAMP but not rolipram strongly suppressed CD8$^+$ T cells (CTLL-2). Finally, cAMP elevating agents were differentially involved in regulating CD98-mediated cell-cell adhesion. Thus, dbcAMP and rolipram significantly enhanced the cell-cell adhesion, whereas forskolin blocked. Therefore, our results suggest that CAMP elevating agents participate in various immune responses mediated by macrophages and T cells with a different fashion depending on cellular environments and activation signals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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