This study was designed to investigate the influence of the pH and enantiomer on the antioxidant activity of Maillard reaction mixture solution in model systems. The loss of glucose in MRPs did not show different characteristics for the different amino acid enantiomers; however, the concentration of glucose decreased as the pH levels increased. The enolization of sugars was observed in all MRP samples according to increase of pH levels. In addition, D-amino acids were detected in L-amino acid systems and L-amino acids could also be observed in D-amino acid systems. Formation of the isomer was the highest in the Glc/L-Lys system. The browning development increased as pH levels increased; however, browning development did not show different characteristics based on the use of L- versus D-isomers of the same amino acid. The L- and D-isomers show different absorption values in the UV-Vis spectra, but the absorption patterns display a similar shape. The antioxidant activities of MRPs derived from the Glc/Gly, Glc/L-Asn and Glc/D-Asn systems at pH 7.0 were greater compared to those of pH 4.0 and pH 10.0. The antioxidant activities of MRPs derived from the Glc/L-Lys and Glc/D-Lys systems decreased as the pH increased. In addition, the results show that the MRPs derived from the D-isomers have similar antioxidant activities as those from L-isomer. Therefore, the MRPs have the different antioxidant activities on the basis of the pH level, but not on the basis of different amino acid enantiomers.
The current study was carried out to investigate the impact of extraction conditions on the free amino acid level and type in beef longissimus muscle. The sample blocks were chiller aged for 1 d and 7 d at $4^{\circ}C$. There are three homogenization speeds (11,000, 19,000 and 24,000 rpm) for bigger and two speeds (11,000 and 13,000 rpm) for smaller homogenizer's dispersing tools were used for evaluation. Results showed that chiller ageing greatly (p<0.05) increased extractable free amino acids, except cystine. Homogenization with the bigger dispersing tool at 24,000 rpm resulted in the highest free amino acid levels for both 1 and 7 d samples. Significant differences (p<0.05) in the mean values of most amino acids due to the effect of speed and interactions between ageing times. However, the speed effect and interaction between ageing with homogenization speed were not significant (p>0.05) for most of the amino acids except valine and isoleucine when using the smaller dispensing tools. The current data indicated that a standardized method for free amino acid types and levels of aged beef samples. In addition, the results also suggested that utilization of a big dispensing tool at high homogenization speed is a better condition for releasing free amino acid contents in beef samples.
Ion-exchange polymeric stationary phases presenting amino acid and amino groups were prepared by the surface grafting of glycidyl methacrylate onto a silica gel surface and subsequent amination. Three kinds of amino acids-L-arginine (Arg), D-lysine (Lys), and D-histine (His)-were used in this study. An ion-exchange polymeric stationary phase presenting ethylene diamine (EDA) was also prepared by surface graft polymerization. Separation of the model proteins bovine serum albumin (BSA), chick egg albumin (CEA), and hemoglobin (Hb) was performed using the amino acid- and amine-derived columns. In separating the CEA/BSA mixture, the resolution time of BSA was longer than that of CEA when using the EDA column, whereas the resolution time of BSA was shorter than that of CEA when using the Arg, Lys, and His columns. In the separation of the Hb/BSA mixture, the resolution time of BSA was longer than that of Hb in the EDA column, whereas the resolution time of BSA was shorter than that of Hb in the amino acid columns (D-Lys, L-Arg, and D-His).
Trigonopsis variabilis is a strong producer of D-amino acid oxidase that can transform cephalosporin C(ceph C) to ${\alpha}$-keto-adipyl-7-aminocephalosporanic acid(AKA-7ACA). Polymerase chain reaction (PCR) was applied to isolate the D-AAO gene from T. variabilis. To clone the PCR fragment, four different methods were examined using enzymatic reactions of Taq DNA polymerase, Klenow, T4 DNA polymerase I, Alkaline phosphatase Calf Intestinal, and T4 kinase. Ligation of phosphorylated blunt-end PCR fragment and dephosphorylated blunt-end of pUC18 plasmid yielded the best cloning efficiency One of recombinant E. coli transformants showed D-AAO activity against ceph C in both cell extracts and permeabilized cells.
The antibacterial actions of two amino acid oxidases, a D-amino acid oxidase from hog kidney and a L-amino acid oxidase from the venom of Agkistrodon halys, were investigated, demonstrating that both enzymes were able to inhibit the growth of both Gram-positive and Gram-negative bacteria, and that hydrogen peroxide, a product of their enzymatic reactions, was the antibacterial factor. However, hydrogen peroxide generated in the enzymatic reactions was not sufficient to explain the degree to which bacterial growth was inhibited. A fluorescence labeling assay showed that both of these two enzymes could bind to the surfaces of bacteria. To the best of our knowledge, this is the first report regarding the antibacterial activity of the D-amino acid oxidases.
Studies were carried out with a repeated $4{\times}4$ Latin square design with eight cannulated pigs fed four experimental diets to investigate the effect of dietary fiber and starch sources on apparent ileal and fecal amino acid digestibility. Each period lasted 15 d, with diet acclimation from d 1 to 7, feces collection for 48 h on d 8 to 9 and ileal sample collection for 12 h on d 13 to 15. The four experimental diets consisted mainly of cooked rice with the addition of protein sources (CON), partial replacement of cooked rice with either potato starch (PS), sugar beet pulp (SBP) or wheat bran (WB). Chromic oxide was used as an indigestible marker. With the exception of histidine, lysine and tryptophan, no differences were observed in the apparent ileal digestibility of amino acids between diets. The inclusion of potato starch did not affect the ileal and fecal amino acid digestibility. In comparison with diet CON, a decreased (p<0.05) ileal digestibility of histidine was found in pigs fed diet SBP, while the ileal digestibilities of histidine, lysine and tryptophan were decreased (p<0.05) by the inclusion of wheat bran. Inclusion of fiber sources (sugar beet pulp and wheat bran) caused a reduction (p<0.05) in the fecal amino acid digestibility and the net disappearance of amino acids in the large intestine. Of the indispensable amino acids, there was a 'net synthesis' for methionine in the large intestine of pigs when diets were supplemented with dietary fiber. The decrease in fecal amino acid digestibility with the addition of dietary fiber indicates an increase in the synthesis of bacterial protein in the large intestine.
Zhang, Yongcheng;Li, Defa;Fan, Shijun;Piao, Xiangshu;Wang, Jitan;Han, In K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.15
no.11
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pp.1634-1638
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2002
Quantification of endogenous amino acid loss at the terminal ileum is an essential means for calculation of the true amino acid digestibility of a feedstuff. Since nitrogen appeared in the determined diet or not could shift the results very much, also, none of digestibility markers could be recovered with 100% rate at the terminal ileum, the objectives of the present study were: (1) to determine endogenous amino acid losses when fed either a casein diet or a protein-free diet and (2) to examine the reliability of chromic oxide or acid insoluble ash in the protein-free diet. Six ileal-cannulated pigs ($65{\pm}1.85 kg$ BW) with a simple T-cannula in the terminal ileum were used in a replicated $3{\times}3$ Latin square designed trial, after allowed a 14 d recuperation period. Each test period ran for 12 days comprised of a 10 d adjustment period and a 2 d collection period. The endogenous AA losses of His, Ile, Lys, Cys, Thr, Val, Trp, Asp, Glu, and Ser from pigs fed the casein diet were significantly higher than those of the protein-free diet (p<0.05). No significant difference was found in the amount of endogenous amino acid loss when determined with the different markers in the protein-free diet (p>0.05). These data suggest that endogenous amino acid loss could be underestimated when a protein-free diet is used. A direct effect of dietary peptides on the endogenous amino acid loss was found when the casein diet was fed. Our results also indicate that acid insoluble ash can be used as an inert marker as an alternative to chromic oxide when measuring endogenous amino acid loss.
Dong Hyun Kim;Byung Hee Chun;Jae-Jung Lee;Oh Cheol Kim;Jiye Hyun;Dong Min Han;Che Ok Jeon;Sang Hun Lee;Sang-Han Lee;Yong-Ho Choi;Seung-Beom Hong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.34
no.3
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pp.654-662
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2024
To investigate the effect of the predominant fungal species from Korean traditional meju and doenjang on soybean fermentation, the enzymatic activity and amino acid production of twenty-two fungal strains were assessed through solid- and liquid-state soybean fermentation. Enzymatic activity analyses of solid-state fermented soybeans revealed different enzyme activities involving protease, leucine aminopeptidase (LAP), carboxypeptidase (CaP), glutaminase, γ-glutamyl transferase (GGT), and amylase, depending on the fungal species. These enzymatic activities significantly affected the amino acid profile throughout liquid-state fermentation. Strains belonging to Mucoromycota, including Lichtheimia, Mucor, Rhizomucor, and Rhizopus, produced smaller amounts of total amino acids and umami-producing amino acids, such as glutamic acid and aspartic acid, than strains belonging to Aspergillus subgenus circumdati. The genera Penicillium and Scopulariopsis produced large amounts of total amino acids and glutamic acid, suggesting that these genera play an essential role in producing umami and kokumi tastes in fermented soybean products. Strains belonging to Aspergillus subgenus circumdati, including A. oryzae, showed the highest amino acid content, including glutamic acid, suggesting the potential benefits of A. oryzae as a starter for soybean fermentation. This study showed the potential of traditional meju strains as starters for soybean fermentation. However, further analysis of processes such as the production of G-peptide for kokumi taste and volatile compounds for flavor and safety is needed.
Strains of four Bacillus spp. were respectively inoculated into sterilized soybeans and the free amino acid profiles of the resulting cultures were analyzed to discern their metabolic traits. After 30 days of culture, B. licheniformis showed the highest production of serine, threonine, and glutamic acid; B. subtilis exhibited the highest production of alanine, asparagine, glycine, leucine, proline, tryptophan, and lysine. B. velezensis increased the γ-aminobutyric acid (GABA) concentration to >200% of that in the control samples. B. sonorensis produced a somewhat similar amino acid profile with B. licheniformis. Comparative genomic analysis of the four Bacillus strains and the genetic profiles of the produced free amino acids revealed that genes involved in glutamate and arginine metabolism were not common to the four strains. The genes gadA/B (encoding a glutamate decarboxylase), rocE (amino acid permease), and puuD (γ-glutamyl-γ-aminobutyrate hydrolase) determined GABA production, and their presence was species-specific. Taken together, B. licheniformis and B. velezensis were respectively shown to have high potential to increase concentrations of glutamic acid and GABA, while B. subtilis has the ability to increase essential amino acid concentrations in fermented soybean foods.
The objective of this study was to determine the effects of processing method and rapeseed variety on ruminal and intestinal protein digestibility of rapeseed meal in steers. Intestinal amino acid digestibility was assessed with an in situ ruminal incubation and precision-fed rooster bioassay. In this experiment one traditional rapeseed meal sample (sample A, prepress extraction) and three double low rapeseed meal samples (sample B, prepress extraction, sample C, screw press and sample D, low temperature press) were placed in polyester bags(8 cm${\times}$12 cm) and suspended in the ventral rumen of steers for 16 h. The residues of in situ incubations were intubated to roosters. Total excreta were collected for 48 h after incubation and then desiccated and amino acid concentrations were determined. Results showed that in ruminal incubation the degradation rate of amino acid and crude protein was higher for traditional rapeseed meal sample A than for double low rapeseed meal sample B, but was much lower than for double low sample C and D. In the group of double low rapeseed meal samples, sample D processed by low temperature press had the highest degradation rate of amino acids in the rumen. For all amino acids, the digestibility of the residual protein as measured by the precision-fed rooster bioassay tended to be lower for sample B than for sample A, which had the same processing method with sample B, and in the group of double low rapeseed meals, sample B had similar digestibility of amino acid in residual protein to sample D and higher than that of sample C. However, although the total amino acid availability involving the digestibility of amino acids in the rumen and rooster bioassay of double low rapeseed meal sample D (low temperature press) was higher than those of the other three samples by 7 to 9 percent, there were no significant differences. Results indicated that processing method markedly affected ruminal and post ruminal amino acid digestibility of rapeseed meal when the temperature exceeded 110$^{\circ}C$. Rapeseed meal that had a high content of fiber was not suitable for dry heat treatment at higher temperatures or the amino acids digestibility in rumen and total availability of amino acids could be reduced. Results also suggested the variety of rapeseed meal had no significant effect on the digestibility and availability of amino acids.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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