In the early development of parthenogenetic embryo, cytoplasm and nucleic acid fragmentation may be a cause of lower embryo development. The purpose of this study was to evaluate whether embryonic development and apoptosis factors can be reduced by controlling the in-vitro culture environment by the addition of hormones, pregnancy serum and uterine milk. Our study showed that the activity of Casp-3 increased within the cytoplasm when artificially used hormones to induce the incubation environment, and PCNA's manifestation was low. However, the addition of pregnant serum appeared to lower the Casp-3 activity compared to the other groups. In addition, MMP-9 activity was increased and early embryo development and cytoplasmic fidelity were also increased. Therefore, the results of the present study showed that the use of gestational serum in the development of parthenogenetic embryo inhibit apoptosis and increases cytoplasmic reorganization by natural environmental control in in vitro culture.
In order to define the morphological changes of the secreting cells of prothoracic gland during larva-pupal molt, ultrastructural observations were carried out using Bombyx mori L. as the experimental material. At first stage of present experiment, 4 day old 5th instar larva, the polyhedral secreting cells were centrally located in the prothoracic gland surrounded by the connective sheath. The secreting cells were attached to the neighboring cells by the prominent desmosomes, and the plasma membrane contacted with connective sheath were highly infolded. In cytoplasm, the most of the cell organelles, such as rod-like mitochondria, rough surfaced endoplasmic reticulum, ribosome were developed. As the stages advance from larva to pupa, general feature of the secreting cells were retained, but structural changes of the various cytoplasmic organelles-ribosome, rough surfaced endoplasmic reticulum, mitochondria, Golgi apparatus, lamellar body, and vesicle-were noted. In the perinuclear cytoplasm of the secreting cells at the stage of 6 day old 5th instar larva, it is peculiar that only a large amount of ribosomes were distributed and the other organelles were retreated from the juxtanuclear region. Just before and after spining cocoon, these features were more remarkable. Rough surfaced endoplasmic reticulum were gradually increased from the stage just before spining cocoon to the pharate pupa. Rod-like mitochondria with irregular cristae and the matrix showing low density were distributed throughout the cytoplasm in the secreting cells of the 4 day old 5th instar larva. Sometimes, longitudinally distended and curved mitochondria were observed. At the stage of pharate pupa, most of mitochondria were deformed. The rod-like mitochondria of the secreting cells of pupal prothoracic gland were narrower than those of 4 day old 5th instar larva, and the electron density of the mitochondrial matrix is increased in pupa. Golgi apparatus were a few in number in both stages, last instar larva and spining cocoon. In stages of the pharate pupa, the Golgi apparatus were frequently observed. Cytoplasmic vesicles were observed for the first time in the secreting cells of one day after spining cocoon, and the number and the size of cytoplasmic vesicles were distinctly increased inpharate pupa and just after pupation. In the secretory cells of the PG, it in concluded that the RER was closely related to syntheting the enzymes seem to produce the ecdysone.
The flight muscles in Pieris rapae have been examined to study ultrastructural changes in mitochondria with aging. All the mitochondira of flight muscle from the butterfly are recognized as type A which has the simple folded cristae and light matrix, and type B which possesses the complex multicristae and dense matrix. In just newly emerged butterflies both A and B type mitochondria are almost equally present. About ten days after emergence the type A mitochondria rapidly decrease, compared with the type B. In ten-day-old butterflies the type B mitochondria vary in ultrastructure with age. Ultrastructural changes of these aged mitochondria are supposed to occur, in part, by reorganization of inner membranes into myelin-like structures which represent the phase of degeneration of the B type with age. Age-dependent increase in size and number of concentric rings in myelin-like whorl are also found. Glycogen particles penetrated from the cytoplasmic matrix of the muscle cell into the mitochondrial matrix to be in the center of their concentric rings.
Chromatin texture, which partly reflects nuclear organization, is evolving as an important parameter indicating cell activation or transformation. In this study, chromatin pattern was evaluated by image analysis of the electron micrographs of follicular and papillary carcinoma cells of the thyroid gland and tested for discrimination of the two neoplasms. Digital grey images were converted from the electron micrographs, nuclear images, excluding nucleolus and intranuclear cytoplasmic inclusions, were obtained by segmentation; grey levels were standardized; and grey level histograms were generated. The histograms in follicular carcinoma showed Gaussian or near-Gaussian distribution and had a single peak, whereas those in papillary carcinoma had two peaks(bimodal), one at the black zone and the other at the white zone. In papillary carcinoma, the peak in the black zone represented an increased amount of heterochromatin particles and that at the white zone represented decreased electron density of euchromatin or nuclear matrix. These results indicate that the nuclei of follicular and papillary carcinoma cells differ in their chromatin pattern and the difference may be due to decondensed chromatin and/or matrix substances.
The topology of the enzyme has been investigated by biochemical studies including chemical labeling and cross linking. Thirteen subunits(polypeptides) of the cytochrome-c-oxidase have localistic characteristics of existing in the matrix side or cytoplasmic side in the mitochondria. In order to observe the distribution of the enzyme subunit on the mitochondria membrane, immunogold-labeling methods were employed. Antibody was obtained from the serum of immunized rabbit with enzyme subunit antigen which was obtained from cytochrome-c-oxidase of the beef heart muscle mitochondria. Beef heart muscle tissue as a tissue antigen was stained with immunized rabbit IgG and protein A gold complex. Electron microscopy has identified the existance of cytochrome-c-oxidase subunit $Mt_I,\;Mt_{II}\;and\;Mt_{III}$ on the membrane of cristae and outer chamber of mitochondria and the subunit $C_{IV}$ on the membrane of cristae and matrix of mitochondria. Particularly, the subunit $C_{IV}$ was also observed to exist in the sarcoplasm of muscle tissue.
This study was carried out to investigate the localization of lipids and lipase activity with lipid staining and cytochemical technique in endosperm cells of Panax ginseng C.A. Meyer seed. In endosperm cells of indehiscent seed, protein bodies facing the umbiliform layer are different in electron density during the various degraded processes. Gradually, protein matrix near the cell wall was lysed and electron lucent inclusions appeared on umbiliform layer. The protein body with high electron density and the spherosome with low electron density were observed in endosperm cells. As a result of lipid staining, electron density of spherosome is more intense than those of the protein matrix within the protein body in endosperm cells of indehiscent seed. Free spherical spherosomes within the umbiliform layer have a high electron density. The spherical spherosomes were more electron densed and were uniform in comparison with the cytoplasmic proteinaceous granules in endosperm cells of seed with red seed coat. The major component of spherosome was determined to be lipid. Lipase activity occurs in the spherosome and near the endosperm cell wall facing the umbiliform layer. Cytochemical reaction products of lipase were observed in the spherosome membrane and in the inner regions of spherosome. After protein bodies were digested, lipase activities were observed in free spherosomes and near the cell wall of endosperm cells. Umbiliform layer composing of fibrillized wall and digested materials of the endosperm cell showed a little lipase reaction products.
A 7-year-old Maltese was presented to a veterinary clinic for a history of anorexia, soft feces, and anemia. During abdominal sonography and computed tomography imaging, splenic mass was suspected. Laparotomy revealed the bloody ascites, and the enlarged spleen containing a large spherical mass. Microscopically, the splenic parenchyma was replaced by neoplastic cells with cytoplasmic vacuolation and abundant myxoid matrix. Cellular vacuolation and myxoid matrix were positive to Oil-Red-O and Alcian-blue stains. The neoplastic cells were positive to vimentin on immunohistochemistry. The case was diagnosed as myxoid liposarcoma. Based on a poor prognosis, the dog was euthanized three weeks after splenectomy.
The spermatogenetic process in the edible giant snail is similar to those in the other snails, except for the axoneme formation process. In this study, the axoneme formation process in the giant snail was mainly examined by means of electron microscopy. The tail portion of a spermatozoon is about $160{\mu}m$ long, and extends straight to the rear, surrounded by two large and long mitochondria in spiral forms. A number of glycogen particles $(40\sim70nm)$ are found in the swollen matrix of the mitochodria. The axoneme which composes the tail of a spermatozoon is surrounded by $7\sim10$ lamella-form fibrous sheaths of about $0.2{\mu}m$ in thickness. Most of the mature spermatozoa are found to be clustered into a group of $5\sim7$ ea in syncytial bridges formed by cytoplasmic processes. Sertoli cells contain glycogen particles, endoplasmic reticulum, a lot of mitochondria, and lipids in their cytoplasm. They protrude their filiform pseudopodia and phagocytize abnormal spermatids or spermaozoa.
Early infection process of Phytophthora capsici in pumpkin stems was similar in the compatible and incompatible interactions 24 h after inoculation. Intercellularly growing hyphae penetrated host parenchyma cells by growing hyphae penetrated host parenchyma cells by forming haustoria. An extrahaustorial matrix was found around the haustoria in both compatible and incompatible interactions. No wall appositions were observed at the infection sites in the parenchyma cells. In the compatible interaction, infecting hyphae grew well in the intercellular spaces between xylem vessels in stem tissues. Degraded host cell wall, plasmolysis of plasma membrane, and degenerated chloroplasts were pathological features of pumpkin stem tissues in both compatible and incompatible interactions. A characteristic host response in the resistant pumkin cultivar Danmatmaetdol was rapid cytoplasmic movement of host cells toward the oomycete haustoria.
Electron microscopic studies were made to investigate changes in the fine structure of the liver, kidney and gills of Carassius carassius L. following exposure to 1 and 2.5 ppm of $HgCl_2$. The following results were obtained: 1. In the mercury-treated liver cells, an increase in the number of lysosomes were noticed. These lysosomes appeared to be of two types; round ones containing some crystalline structures and others with phagocytosed glycogen granules and mitochondria. Also observed were mitochondrial swelling where the matrix appeared less electrondense, and segregation of the nucleoli in the nucleus. 2. In the kidney, mercury treatment resulted in thickening of the basement membrane of the glomerulus, and appearance of vacuoles and cytoplasmic bodies in the proximal convoluted tubule. The vacuoles seemed to be formed from mitochondria. Nuclear shrinkage was also noticed at 2.5 ppm of $HgCl_2$. 3. Many large and small lysosomes appeared in response to mercury in the epithelial cells of the gill lamella. Also the lamellar membrane became fuzzy in appearance. 4. It can be concluded from these results that mercury-induced changes in the fine structure are associated with activation of detoxication processes and impairment of energy metabolism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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