Effects of heavy metal ions on the gene expression of cytochrome P4501A (CYP1A) were examined in cultured eel hepatocytes. When the expression of CYP1A mRNA was measured by RT-PCR after incubation of eel hepatocytes with benzo[$\alpha$]pyrene (B[$\alpha$]P) at concentrations of 10-8~10-5 M, the CYP1A expression increased with B[$\alpha$]P treatment in a dose dependent manner, showing significant increase at concentrations more than 10-7 M. When the eel hepatocyte was treated with cadmium (10-6 and 10-5 M), the expression of CYP1A was inhibited and especially at higher concentration (10-5 M). The inhibition of CYP1A expression by cadmium was also observed in cells treated with B[$\alpha$]P. In another study, effects of heavy metal ions on the expression of CYP1A were examined in cultured hepatocytes isolated from eel which was treated previously with B[$\alpha$]P in vivo. Hepatocytes isolated from the liver of eel taken at 48 hours after injection of B[$\alpha$]P (10 mg/kg) were cultured for 2 days with cadmium, copper, lead or zinc (10-6 and 10-5 M). The expression of CYP1A was found to be suppressed by the metal ions compared with the control in which CYP1A was induced with previous treatment of B[$\alpha$]P in vivo. The present results may provide an important basic information for studying the effects of heavy metal ions on CYP1A expression in other species of fish and studying toxicological mechanisms of heavy metal ions in aquatic livings.
Shah, Idrees Ayoub;Mehta, Promila;Lone, Mohd Maqbool;Dar, Nazir Ahmad
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.16
no.13
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pp.5337-5341
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2015
Background: Individual susceptibility to cancer has been attributed to polymorphisms in xenobiotic metabolizing genes. To evaluate the association of the Leu432Val polymorphism of cytochrome P4501B1 (CYP1B1) with esophageal squamous cell carcinoma (ESCC), we conducted a case control study in Kashmir, India, an area with a relatively high incidence of ESCC. Materials and Methods: We recruited 404 histopathologically confirmed ESCC cases, and an equal number of controls, individually matched for sex, age and district of residence to respective cases. Information was obtained on various dietary, lifestyle and environmental factors in face to face interviews, using a structured questionnaire, from each subject. Genotypes were analysed by polymerase chain reaction, restriction fragment length polymorphism and sequencing of randomly selected samples. Conditional logistic regression models were used to calculate odds ratios (ORs) and 95% confidence intervals (95% CIs). Results: Among the three possible variants, we did not find any Leu432Leu genotype of CYP1B1 in the study population and the genotypic distribution of Val432Val and Leu432Val carriers was nearly equal in both cases (89.6% and 10.4%) and controls (88.9% and 11.1%) respectively. We did not find any risk associated with this polymorphism in the current study (OR = 0.64; 95% CI: 0.55 - 1.64). Conclusions: The study indicates that (Leu432Val) polymorphism of CYP1B1, is not associated with ESCC risk. However, replicative studies with larger sample size are needed to substantiate the findings.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2022.10a
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pp.229-229
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2022
Rapeseed is a crop that is waterlogging sensitive, and it is necessary to breed waterlogging tolerance varieties. Our study presents the comparative transcriptome changes in two rapeseed lines, i.e., waterlogging-tolerant (tJ8634-B-30,) and - sensitive ('EMS26') lines under control and waterlogging stress treatments at the flowering stage. RNA-sequencing analysis revealed 13,279 differentially expressed genes (DEGs) for 'J8634-B-30' and 8,682 DEGs for 'EMS26' under waterlogging stress condition compared to control. Among DEGs of 'J8634-B-30', 6,818 were up-regulated and 6,461 were down-regulated. On the other hand, among the DEGs of 'EMS26', the number of down-regulated genes (5,240) were higher than that of up-regulated genes (3,442). Gene ontology enrichment analysis showed that DEGs related to glucan metabolic, cell wall, and oxidoreductase activity were significantly changed in 'J8634-B-30'. Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG)-based analysis in 'J8634-B-30' identified up-regulated DEGs being involved in MAPK signaling pathways. In addition, the DEGs belonging to mechanisms responding to waterlogging stress, i.e., plant hormones, carbon metabolism, Reactive oxygen species (ROS), Nitric oxide (NO) etc. were compared in rapeseed lines. Several DEGs including ethylene-responsive transcription factor (ERF), constitutive triple response (CTR) (in ethylene signaling pathway), monodehydroascorbate Reductase (MDAR), NADPH oxidase (in ROS pathway), cytochrome c oxidase assembly protein (COX) (in NO pathway) up-regulated in 'J8634-B-30'. These outcomes provided the valuable information for further exploring the genetic mechanism of waterlogging tolerance in rapeseed.
Human embryonic stem (ES) cells retain the capacity for self-renewal, are pluripotent and differentiate into the three embryonic germ layer cells. The regulatory transcription factors Oct4, Nanog and Sox2 play an important role in maintaining the pluripotency of human ES cells. The aim of this research was to identify unknown genes upregulated in human ES cells along with Oct4, Nanog, and Sox2. This study characterizes an unknown gene, named chromosome 1 open reading frame 31 (C1orf31) mapping to chromosome 1q42.2. The product of C1orf31 is the hypothetical protein LOC388753 having a cytochrome c oxidase subunit VIb (COX6b) motif. In order to compare expression levels of C1orf31 in human ES cells, human embryoid body cells, vascular angiogenic progenitor cells (VAPCs), cord-blood endothelial progenitor cells (CB-EPCs) and somatic cell lines, we performed RT-PCR analysis. Interestingly, C1orf31 was highly expressed in human ES cells, cancer cell lines and SV40-immortalized cells. It has a similar expression pattern to the Oct4 gene in human ES cells and cancer cells. Also, the expression level of C1orf31 was shown to be upregulated in the S phase and early G2 phase of synchronized HeLa cells, leading us to purpose that it may be involved in the S/G2 transition process. For these reasons, we assume that C1orf31 may play a role in on differentiation of human ES cells and carcinogenesis.
Kim, Keun-Yong;Ko, Myeong-Hun;Cho, Sung Jang;Kim, Woo-Jin;Son, Min Ho;Bang, In-Chul
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.18
no.1
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pp.99-107
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2015
A natural hybrid of a probable intergeneric mating between the striped shiner Pungtungia herzi and the stone morocco Pseudorasbora parva (Cypriniformes: Cyprinidae) was captured in the Geumho River, a tributary of the Nakdong River basin in Korea. Morphological characters and DNA sequences were analyzed to verify its hybrid state and identify the parentage of its parent species. The hybrid exhibited a phenotypic intermediacy between the two parent species in the number of vertebrae and the mouth shape. Out of 1,488 base pair (bp) positions of the nuclear recombination activating gene 1 gene (rag1), which has a biparental mode of inheritance, 41-bp substitutions were detected between the two parent species, whereas an electropherogram of the hybrid displayed polymorphic double peaks at all of the base positions, along with one additional one, strongly indicating its hybrid state. Meanwhile, sequence comparison of the mitochondrial cytochrome b gene (mt-cyb) (1,140 bp), which has a maternal mode of inheritance, showed only 5-22-bp differences (97.6-99.5% identities) between the hybrid and Pu. herzi, but as many as 158-168-bp differences (85.2-86.1% identities) between the hybrid and Ps. parva, clearly indicating Pu. herzi as the maternal species. Thus, combined analyses of independent data sets (i.e., morphology and nuclear and mitochondrial DNA sequences) offered convincing evidence for the hybrid state of a naturally occurring hybrid resulting from intergeneric mating between a female Pu. herzi and a male Ps. parva.
We developed a polymerase chain reaction (PCR)-based molecular method for sexing and identification using sexual dimorphism between the Zinc Finger-X and -Y (ZFX-ZFY) gene and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) for mitochondrial DNA (mtDNA) cytochrome B (CYTB) gene in meat pieces and commercial sausages from animals of different origins. Sexual dimorphism based on the presence or absence of SINE-like sequence between ZFX and ZFY genes showed distinguishable band patterns between male and female DNA samples and were easily detected by PCR analyses. Male DNA had two PCR products appearing as distinct two bands (ZFX and ZFY), and female DNA had a single band (ZFX). Molecular identification was carried out using PCR-RFLP of CYTB gene, and showed clear species classification results. The results yielded identical information on the sexes and the species of the meat samples collected from providers without any records. The analyses for DNA isolated from commercial sausage showed that pig was the major source but several sausages originated from chicken and Atlantic cod. Applying this PCR-based molecular method was useful and yielded clear sex information and identified the species of various tissue samples originating from livestock.
Jiyeong Shin;Rameswor Maharjan;Hwijong Yi;Minkyu Jeong;Juil Kim
Korean journal of applied entomology
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v.62
no.2
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pp.83-87
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2023
Nysius plebeius is a major lygaeid pest of various cereal crops and ornamental plants in East Asian countries, including Korea. The complete mitochondrial genome of N. plebeius was characterized and found to comprise a total of 17,367 bp, which included 13 protein-coding genes, NADH dehydrogenase components (complex I, ND), cytochrome oxidase subunits (complex VI, COX), cytochrome oxidase b (CYPB), two ATP synthases, two ribosomal RNA genes, and 22 transfer RNAs. The GC content of 23%. It showed high sequence similarity to other Lygaeidae species, such as N. cymoides (94.5%), N. fuscovittatus (91.7%), and an unknown Nysius species (94.1%). This new N. plebeius mitochondrial genome can be widely used for evolutionary studies of Lygaeidae and to improve pest management practices.
Shim, Soojin;Im, Young Bin;Jung, Myunghwan;Park, Woo Bin;Yoo, Han Sang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.28
no.10
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pp.1736-1748
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2018
Brucella abortus can survive and replicate within host macrophages, and great efforts have been made to demonstrate the genes involved in pathogenicity, such as internalization, in Brucella research. Here, intracellular responses were compared between THP-1 macrophage cells stimulated with B. abortus wild-type and four mutants (C1, C10, C27, and C32) using microarray to demonstrate the role of genes related to intracellular survival and replication. These mutants were generated by deleting genes encoding BAB_RS13225 (4-hydrobenzoate 3-monooxygenase, PHBH), BAB_RS00455 (heme exporter protein cytochrome C, CcmC), BAB_RS03675 (exopolyphosphatase, PPX), and BAB_RS13225 (peptidase M24). The results showed that mutants C1 and C10 induced significant suppression of survival levels and cytokine expression relative to wild-type in the THP-1 macrophage cells. These findings suggest that the BAB_RS13225 and BAB_RS00455 genes play important roles in survival within human macrophages. Conversely, mutants C27 and C32 induced significantly higher survival level than wild-type in the cells inhibiting cellular signal transduction. It is assumed that the BAB_RS03675 and BAB_RS13225 genes play a role in cellular resistance to B. abortus. Therefore, the disrupted genes are involved in B. abortus intracellular growth, and especially in its survival, and they could be effective targets for understanding the intracellular bacterium, B. abortus.
Monthly variation of species composition and abundance of fish eggs were examined to know the spawning time and location of the fishes inhabiting the coastal region of Jejudo Island. Samplings had been performed at the four locations (Jeju port, Seongsanpo, Seogwipo port and Chagwido) with a bongo net which was towed monthly at the sea surface from August 2006 to July 2007. The fish eggs were identified based on phylogenetic analyses with the DNA sequences generated through PCR-amplification and sequencing of the mitochondrial cytochrome b gene. Among a total of 43 taxa classified during the study period, 34 were identified to species, 4 to families, and the remaining 5 were unidentified. Of them, 23 taxa were occurred at Jeju port, 21 at Seongsanpo, 19 at Seogwipo port and 18 at Chagwido, whereas 15 taxa were found in September 2006, 12 in June 2007, 6 to 8 in August 2006 and January~May 2007, 5 in each October and November 2006, 3 in each December 2006 and July 2007. Among 34 species of fish eggs, Engraulis japonicus and Callanthias japonicus most frequently appeared at 16 times out of 48 observations in total. When those eggs were collected, the surface seawater temperature ranged $14.0{\sim}28.6^{\circ}C$ for E. japonicus and $14.9{\sim}20.5^{\circ}C$ for C. japonicus. The success rates of PCR-amplification and species identification in this study were 68.3% and 79.1%, respectively.
Park, Jun Eun;Choi, Kang Duk;Kim, Sung Hwan;Hahm, Dae-Hyun;Seo, Jong Jin
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.48
no.7
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pp.779-788
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2005
Purpose : Echinacea, a traditional plant medicine has been used as immune-stimulant. Recent studies have revealed that extract of Echinacea has immunostimulatory effects on human blood mononuclear cells. This study was designed for the purpose of screening the genes associated with immunologic effects of Echinacea on monocytes and dendritic cells using a cDNA microarray chip. Methods : $CD14^+$ monocyte cells were cultured for one day with Echinacea extract(final concentration : $50{\mu}g/mL$) in experiment 1, but were cultured without Echinacea in experiment 2. The gene expression of these cultured monocytes was analyzed using the cDNA microarray chip. Dendritic cells produced from $CD14^+$ monocyte were cultured for five days with GM-CSF and IL-4, and then cultured for one day with Echinacea in experiment 3, but were done without Echinacea in experiment 4. Results : In experiments 1 and 2, there were 17 significantly expressed genes with average expression ratios above 2.5, including interferon gamma-inducible protein 30(IFI 30), CDC(cell-division-cylcle)-like kinase 2(CLK 2), syndecan binding protein(syntenin), superoxide dismutase 2, etc. In experiments 3 and 4, there were 24 gene, with significantly expressed genes were 24 genes, which were insulin-like growth factor 2(somatomedin A), methyl-CpG binding domain protein 3, IFI 30, small inducible cytokine subfamily A, member 22, etc. The genes encoding CD44, IFI 30, mannose receptor C type 1(MRC 1), chemokine receptor 7(CCR 7), CLK 2, syntenin and cytochrome C oxidase subunit VIII were significantly expressed in both monocytes and dendritic cells cultured with Echinacea. Conclusion : This study employed a cDNA microarray chip to elicit the immune-associated gene profile; the expression was enhanced by Echinacea in CD14+ monocytes and dendritic cells. Thus we laid the basis for the quantitative and functional analysis of genes induced by Echinacea in monocytes and monocyte-derived dendritic cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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