• Title/Summary/Keyword: Cytochrome $c_3$

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간 대사효소의 유전자 발현조절에 관한연구

  • 신윤용
    • 한국응용약물학회:학술대회논문집
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    • 한국응용약물학회 1994년도 춘계학술대회 and 제3회 신약개발 연구발표회
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    • pp.192-192
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    • 1994
  • 본 논문에서는 cytochrome P450 LA1 유전자의 5'-upsteam 조절부위의 클로닝을 실시하였다. pUC19 vector에 연결시킨 3.4 Kb 크기의 Pstl DNA조각을 Sst1, Nco1 제한 효소로 자른 뒤, Exonuclease III 를 처리하여 약 200bp 씩의 차이를 갖는 여러 크기의 plasmid들을 얻었다. 이 plasmid 의 핵산서열을 알아보기 위해 dideoxy nucletide를 이용한 sequencing방법으로 그 핵산서열의 결정 실험을 시도하였다. 또한, 다환상 방향족 탄화수소 화합물에 반응성을 갖는 C57BL/6N 생쥐와 반응성을 갖지않는 DBA/2N 생쥐에 있어 phase II 대사 효소인UDP-glucuronosyltransferase 효소활성에 대한 3-methylcholanthrene의 영향을 알아보기 위해 C57BL/6N 생쥐와 DBA/2N 생쥐에 각각 다른 농도의 3-methylcholanthrene을 처리하거나 각기 다른 시간에 3-methylcholanthrene를 처리하였다. 그 결과 UDP-glucuronosyl-transferase의 mRNA가 3-methylcholanthrene양의 증가에 따라, 처치시간이 길어짐에 따라 증가되어지며 그 mRNA위 크기는 약 2.2Kb 정도임을 알았다. 이로부터 UDP-ghucuronosyltransferase 또한 cytochrome P45O와 함께 다환상 방향족 탄화수소 화합물 조절인자를 통한 조절을 받을 것이며 phase I phase II 약물 대사 효소가 조절상 밀접한 관련을 가짐을 예측할 수 있었다.

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뱀장어(Anguilla japonica)에서 Cytochrome P450 1 gene 클로닝 및 benzo[a]pyrene 노출에 따른 발현 분석 (Cytochrome P450 1 gene in Eel, Anguilla japonica: cloning and expression patterns after exposure to benzo[a]pyrene)

  • 조현호;김주안;이승현;정준기
    • 한국어병학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.153-161
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    • 2020
  • Cytochrome P450(CYP) gene is involved in the biotransformation of drugs and environmental pollutants. In this study, we analyzed the nucleotide sequence of the Anguilla japonica CYP1(AjCYP1) family gene and examined the relative expression of AjCYP1A, AjCYP1B and AjCYP1C1 in response to the exposure to environmental pollutants. After exposure to B[a]P 20mg/kg bw, the expression of AjCYP1 family gene increased over time. Among four tissues examined (liver, spleen, gill and kidney), AjCYP1 family gene was expressed significantly in the kidney. Compared with the control group, AjCYP1A was expressed about 5-fold at 48 hr, AjCYP1B about 6-fold at 24 hr, and AjCYP1C1 about 4-fold at 24 hr. However, after exposure to B[a]P 200mg/kg bw, AjCYP1A did not change in all tissues. On the other hand, AjCYP1B was expressed at about 4-fold at 24 hr in the spleen and 4-fold at 48 hr in the gill. Finally AjCYP1C1 was expressed 3.7-fold and 4.3-fold in the spleen and kidneys at 48 hr, respectively. Taken together, our results suggest that the expression of AjCYP1 gene in eel tissues might be used as a useful tool to assess the exposure to environmental pollutants in aquaculture system.

유기주석화합물이 해산 어류의 간장 MFO 효소계에 미치는 영향 (Effects of Tributyltin in vitro on Hepatic Monooxygenase System in Marine Fishes)

  • 전중균;이미희;이지선;심원준;이수형;허형택
    • 환경생물
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    • 제21권1호
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    • pp.18-25
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    • 2003
  • 본 연구는 내분비교란물질로 알려진 TBTC가 해양생물에게 미치는 영향을 조사하는 연구의 일환으로, 이 화합물에 노출시킨 어류의 간장 MFO 효소계의 반응을 in vitro로 조사하였다. 대상 어류는 개복치(Mola mola), 숭어(Mugil cephalus), 강도다리(Ptatichthys stellatus), 청어(Clupeu pallasii), 붕장어(Astroconger myriaster), 조피볼락 (Sebastes schlegeli), 참돔(Pugrus major), 넙치(Paralichthys olivaceus)이며, 이들의 간장 미크로좀을 2mM의 TBTC와 in vitro (3$0^{\circ}C$, 20분)로 배양하고 cytoch-rome P45O (CYP), cytochrome b5, NAD(P)H -cytochro-me c 환원효소를 비롯한 탈알킬화 효소들(EROD, PROD, MROD, ECOD)의 변화를 조사하였다. TBTC는 환원효소의 측정 시에는 DMSO에, 그리고 그 밖의 효소 측정시에는 메탄올에 녹여 2% 농도로. 첨가하였다. 어류의 간장 CYP 함량은 TBTC와 배양 후 대부분(6 어류/8어류)에서 10% 이하로 크게 저해되었으나, cyto-chrome b5함량은 변함이 없었다. 하지만 NAD(P)H 의존성 환원효소의 반응은 어류에 따라 달랐고, CYP 외에 두 환원효소도 모두 영향을 받아 저해되는 타입 1(개복치, 조피볼락, 청어, 강도다리, 참돔), CYP 외에 NADH 의존성 환원효소만 저해되는 타입 2(붕장어, 숭어)및 CYP 저해되지만 두 환원효소는 영향을 받지 않거나 오히려 유도되는 타입 3 (넙치)으로 구분되었다. 그리고 대부분(7/8)의 어류에서는 NADH 의존성 환원효소가 NADPH 의존성 환원효소에 비해 더욱 저해되는 경향을 보였다. TBTC는 어류의 탈알킬화 효소에도 영향을 미쳤고, 어류별 EROD활성의 저해는 개복치, 참돔, 붕장어, 조피볼락(잔존율 1~7%)>숭어, 청어 (14~30%)>넙치, 강도다리(56~65%)의 순이었으며, ECOD 활성의 저해도 개복치, 참돔, 붕장어 (36~38%)>조피볼락(63%))숭어, 청어, 넙치, 강도다리(90%)의 순으로 비슷한 경향이었다. 한편, 넙치와 강도다리에서는 PROD가 MROD보다 더욱 심하게 저해되었다. 이처럼 어류 간장의 약물대사 효소계는 TBTC에 의한 저해 정도가 어류에 따라 심한 차이를 보였다.

댑싸리하고초(夏枯草) 약침액(藥鍼液)의 암예방 활성 (Chemopreventive activity of Prunella Herba Vulgaris L. Aqua-acupuncture Solution)

  • 박신화;임종국
    • Korean Journal of Acupuncture
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    • 제18권1호
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    • pp.11-20
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    • 2001
  • 댑싸리하고초 약침액을 이용하여 phase II detoxification 효소인 quinone reductase (QR 및 GST) 유도, GSH 생성량, phase I 효소 cytochrome P4501A1 활성억제, 발암물질 B[a]P-DNA adduct 형성의 저해효과 등을 측정하였다. QR 생성 유도를 Hepa1c1c7로 실험한 결과, 댑싸리하고초 약침액및 열수추출액 모두에서 유도 되었으며, 농도가 높아질수록 유도율이 더 높게 나타났으며, GSH와 GST의 유도율도 약침액에서 나타났다. 댑싸리하고초 약침액 $5{\times}$에서 45.2%의 cytochrome P4501A1 효소활성 저해효과를 측정할 수 있었다. 또한 B[a]P-DNA binding 저해효과를 실험한 결과, 약침액 $3{\times}$ 농도에서 45.0%의 저해효과가 있었다. 이상의 결과에 의하면 댑싸리하고초 약침액은 암억제 물질로서의 기능을 충분히 발휘할 것으로 사료된다.

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Cytochrome $C_{550}$ is Related to Initiation of Sporulation in Bacillus subtilis

  • Shin Inji;Ryu Han-Bong;Yim Hyung-Soon;Kang Sa-Ouk
    • Journal of Microbiology
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    • 제43권3호
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    • pp.244-250
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    • 2005
  • The effect of cytochrome $c_{550}$ encoded by cccA in Bacillus subtilis during the event of sporulation was investigated. The sporulation of cccA-overexpressing mutant was significantly accelerated, while disruptant strain showed delayed sporulation in spite of the same growth rate. Activity of sporulation stage-0-specific enzyme, extracellular $\alpha-amylase$ of mutant strains was similar to that of the control strain, but cccA-overexpressing mutant exhibited higher activity of stage-II-specific alkaline phosphatase and stage-III-specific glucose dehydrogenase when compared to deletion mutant and control strain. Northern blot analysis also revealed that cccA-overexpressing mutant showed high level of spo0A transcripts, while the disruptant rarely expressed spo0A. These results suggested that although cytochrome $c_{550}$ is dispensable for growth and sporulation, expression of cccA may play an important role for initiation of sporulation through regulation of spo0A expression.

Genetic diversity of the Asian shore crab, Hemigrapsus sanguineus, in Korea and Japan inferred from mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I gene

  • Yoon, Moon-Geun;Hong, Sung-Eic;Nam, Yoon-Kwon;Kim, Dong-Soo
    • Animal cells and systems
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    • 제15권3호
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    • pp.243-249
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    • 2011
  • The genetic diversity and population history of the Asian shore crab, Hemigrapsus sanguineus, were investigated with a nucleotide sequence analysis of 536 base pairs (bp) of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I gene (COI) in 111 samples collected from four populations in Korea and one in Japan. In total, 28 haplotypes were defined by 27 variable nucleotide sites in the COI region examined. The observed haplotypes had a shallow haplotype genealogy and no geographical associations. Most of the populations had high haplotype diversity (0.656-0.788) and low nucleotide diversity (0.00165-0.00244), and significant negative values for Fu's $F_S$, suggesting rapid and recent population growth from an ancestral population and sudden population expansion. The pairwise fixation indices ($F_{ST}$) estimated with the exact test and the migration rates indicate that substantial gene flow occurs among these populations as a result of sea currents, except between the Yellow Sea coast of Korea (BUA) and the Pacific Ocean coast of Japan (JPA). These two populations (BUA and JPA) showed significant genetic differentiation and low migration rate.

(-) Epigallocatechin gallate restores ethanol-induced alterations in hepatic detoxification system and prevents apoptosis

  • Anuradha, Carani V;Kaviarasan, Subramanian
    • Advances in Traditional Medicine
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    • 제7권3호
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    • pp.311-320
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    • 2007
  • The present study was designed to estimate the protective effect of (-) epigallocatechin gallate (EGCG) on ethanol-induced liver injury in rats. Chronic ethanol administration (6 g/kg/day ${\times}$ 60 days) caused liver damage that was manifested by the elevation of markers of liver dysfunction - aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, alkaline phosphatase, lactate dehydrogenase, bilirubin and ${\gamma}$-glutamyl transferase in plasma and reduction in liver glycogen. The activities of alcohol metabolizing enzymes such as alcohol dehydrogenase and aldehyde dehydrogenase were found to be altered in alcohol-treated group. Ethanol administration resulted in the induction of cytochrome p450 and cytochrome-$b_{5}$ activities and reduction of cytochrome-c reductase and glutathione-S-transferase, a phase II drug metabolizing enzyme. Further, ethanol reduced the viability of isolated hepatocytes (ex vivo) as assessed by trypan blue exclusion test and induced hepatocyte apoptosis as assessed by propidium iodide staining. Treatment of alcoholic rats with EGCG restored the levels of markers of liver injury and mitigated the alterations in alcohol metabolizing and drug metabolizing enzymes and cyt-c-reductase. Increased hepatocyte viability and reduced apoptotic nuclei were observed in alcohol + EGCG-treated rats. These findings suggest that EGCG acts as a hepatoprotective agent against alcoholic liver injury.

A Study for Regulation of Ethanol-inducible $P_{450}$(CYP2E1) on $CCI_4$-induced Hepatic Damage

  • Park, Sun-Mi;Park, Eun-Jeon;Ko, Geon-Il;Kim, Jae-Baek;Sohn, Dong-Hwan
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제18권3호
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    • pp.179-182
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    • 1995
  • Previous study showed that $CCl_4$ administration evoked a rapid decrease in cytochrome $P_{450}$ 2E1 protein soon after the exposure due to posttranslational inhibition(Biochem. Biophys. Res. Commun. 179:449-454, 1991). In this report, aniline hydroxylase and the amounts of immunoreactive $P_{450}$ 2E1 were rapidly decreased during day 1 to 2 and recovered during day 3 to 4 after a single dose of $CCl_4$. The activity of pentoxyresorufin-O-dealkylase was also suppressed at day 1 and began to repair from day 2. However, the decrease in immunoreactive $P_{450}$ 2C content was not observed. The decreases in $P_{450}$ 2E1 enzyme activity and immunoreactive protein by acute $CCl_4$ treatment were accompanied by a decline in $P_{450}$ 2E1 mRNA level. The data thus suggested a pretranslational reduction of $P_{450}$ 2E1 during day 1 to 2 after acute $CCl_4$ treatment.

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저온 환경이 Canola 원형질막의 Fatty Acid 구성에 미치는 영향 (Effect of Low Temperature upon the Fatty Acid Composition Plasma Membrane of Canola)

  • 권성환;;전희;김재철
    • 생물환경조절학회지
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    • 제4권2호
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    • pp.136-143
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    • 1995
  • Canola(Brassica napus) 엽에서 추출한 미세막으로부터 PEG-dextran 2상분획법을 이용하여 세포막과 세포내막을 분리하였다. U$_2$ 상에 있는 원형질막의 $K^{+}$-ATPase의 특이활성도가 미세막에 비하여 $25^{\circ}C$에서 자란 canola는 6.6배, 1$0^{\circ}C$에서 4.6배 각각 증가되었다. 원형질막(U$_2$)은 미세막이나 세포내막(L$_2$) 보다 cytochrome-c-oxidase 활성이 적게 나타난 반면, 세포내막에서는 $K^{+}$-ATPase의 특이활성도가 가장 적게 나타났다. 1$0^{\circ}C$에서 생장한 canola의 18:3/18:2 률은 $25^{\circ}C$보다 29.2% 더 높게 나타났다. 원형질막의 2중결합지수는 1$0^{\circ}C$에서 생장한 canola가 $25^{\circ}C$에서 생장한 것보다 8.9% 더 증가되었으며 세포내막에서도 같은 경향으로써 1$0^{\circ}C$에서 19.7% 더 증가되는 현상을 보였다. 또한 엽록소 함량은 1$0^{\circ}C$에서 생장한 것이 $25^{\circ}C$에 비하여 17.3% 낮았다. Canola가 저온에서 생장시 주로 $C_{18}$ 지방산들이 변화되어, 세포막 내에 불포화 지방산이 많았으며, 그 중에서도 리롤렌산(18:3)이 크게 변화되는 현상을 보였다. 이러한 변화는 생리적으로 canola의 세포막이 저온에 살아가기 위한 하나의 수단으로 추정된다.

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