목 적 : 소아의 골수이형성 증후군은 드문 질환군으로 예후가 매우 불량하며 화학요법으로는 완치가 어렵다. 유일한 완치요법으로서 조혈모세포이식이 시행되고 있으나 소아의 경우 증례가 적어 이에 대한 체계적 결과 분석이 빈약한 실정이다. 저자들은 골수이형성증후군에서 조혈모세포이식을 시행한 증례들의 단기간의 결과와 이식합병증들을 분석하고자 하였다. 방 법 : 1995년 11월부터 2001년 1월까지 가톨릭대학교 성모병원 소아과에서 골수이형성 증후군으로 조혈모세포이식을 시행 받은 10명의 환아를 대상으로 하였다. 대상질환은 CMMoL 5례, RAEB 3례, RAEBt 2례이었고, 이식형태는 HLA-일치 형제간 골수이식 4례, 비혈연간 골수이식이 4례, 제대혈 조혈모세포이식이 1례, 가족간 HLA-부분일치 조혈모세포이식이 1례이었다. 전처치로는 BuCy 5례, TBI+BuCy 2례, BuCy+ATG, TBI+Cy 및 TBI+Melphalan이 각각 1례에서 사용되었다. 결 과 : 1) 10명 모두 생착(100%)되었으며 현재 8명(80%)이 무병생존(3-65개월, 정중 추적기간 11개월) 중이다. 2) 이식전처치로 인한 합병증으로 VOD가 3례에서 관찰되었으나 사망한 예는 없었다. 3) II-III도의 급성 이식편대 숙주병은 5례(50%)에서 발생하였으며 II가 4례, III가 1례이었다. 급성 이식 편대 숙주병과 관련된 사망은 없었다. 4) 전체 환아 10례 중 3례에서 이식 후 재발되었으나 1례는 화학요법 후 조혈모세포구제술에 의하여 현재 무병생존 중이며 2례는 사망하였다. 결 론: 소아 골수이형성 증후군에서 조혈모세포이식은 질환을 완치시킬 수 있는 우수한 결과를 보여주고 있으나 아직 증례가 적고 추적기간이 짧아 향후 더 많은 연구가 필요하다.
The complete genome sequence of a Gram-positive bacterium .Bacillus subtilis has recently been reported and it is now clear that more than 50% of its ORFs have no known function (1). To study the global gene expression in B. subtilis at single gene resolution, we have tested the glass DNA microarrays in a step-wise fashion. As a preliminary experiment, we have created arrays of PCR products for 14 ORF whose transcription patterns have been well established through transcriptional mapping analysis. We measured changes in mRNA transcript levels between early exponential and stationary phase by hybridizing fluorescently labeled cDNA (with Cy3-UTP and Cy5-UTP) onto the array. We then compared the microarray data to confirm that the transcription patterns of these genes are well consistent with the known Northern analysis data. Since the preliminary test has been successful, we scaled up the experiments to ${\sim}$94% of the 4,100 annotated ORFs for the complete genome sequence of B. subtilis. Using this whole genomic microarray, we searched genes that are catabolite-repressive and those that are under the control of ${\sigma}^{Y}$, one of the functionally unknown ECF sigma factors. From these results, we here report that we have established DNA microarray techniques that are applicable for the whole genome of B. subtilis.
두툽상어의 간조직 cDNA library의 EST를 통해 중금속의 세포내 농도 조절과 환경으로부터 흡수한 유해 중금속의 해독작용 등의 기능을 수행하는 MT 유전자를 cloning하였다. 염기서열 분석 결과 두툽상어의 MT 유전자는 204bp의 coding 영역과 182bp의 3'UTR 영역으로 구성되어 있었으며, 종결코돈 이후 162bp의 polyadenylatin 신호서열과 이로부터 15bp 이후의 poly(A)서열 등이 확인되었다. 염기서열로부터 유추한 68개의 아미노산 서열에는 다른 척추동물에서와 같이 Cys 잔기가 전체의 29.4%(20/68)로 풍부하였으며, 아미노산 서열수준에서 포유류와는 43~54%, 어류들과는 41~45%의 상동성을 나타냈었다. 특히 20개의 Cys은 어류와 18개가 다른 척추동물과는 19개가 잘 보존되어 있었다. 두툽상어 MT는 특이하게 모든 척추동물에서 잘 보존된 $\beta$-domain 끝 쪽의 9번째 Cys앞에 5개의 아미노산을 더 갖고 있었으며, 경골어류 MT의 특징인 4번째 위치의 gap이 없고, 18번째 Cys의 위치가 어류와 달리 다른 척추동물들과 같았다. 또한 C 말단의 아미노산 잔기가 다른 생물체와는 모두 다른 Ser을 갖는 특징을 나타내었다. 이와 같은 두툽상어 MT유전자의 특징들은 연골어류의 분자적 진화과정을 알 수 있는 분자 표지유전자로 이용할 수 있을 것이다.
Due to the limited bioavailability of $[D-Ala^6]$LHRH from nonparenteral transmucosal sites of administration, enhancement of mucosal permeability by coadministration of several protease inhibitors and/or penetration enhancers were studied in rabbit mucosa. As a reliable bioassay method for $[D-Ala^6]$LHRH, ovulation-inducing effect were measured after vaginal administration in the rat. The permeation of $[D-Ala^6]$LHRH through the mucosal membrane of rabbit mounted on George-Grass diffusion cells were examined in the presence of polyoxyethylene 9-lauryl ether (POE), ${\beta}$-cyclodextrin$({\beta}-CyD)$ or ethylene diamine tetra acetate disodium salt(EDTA). The vaginal membrane showed higher permeability of $[D-Ala^6]$LHRH than the rectal and nasal membrane. POE and ${\beta}-CyD$ showed a small promoting effect on the membrane permeation of $[D-Ala^6]$LHRH, but EDTA showed significant enhancement. Ovaluation was enhanced by the coadministration of sodium laurate(0.5%), a protease inhibitor but was not enhanced by EDTA, a penetration enhancer. On the other hands, coadministration of sodium tauro 24,25 dihydrofusidate(1%) and EDTA(2%) enhanced the ovulation inducing-effect 2.8 times. These results suggest that the vaginal administration of $[D-Ala^6]$LHRH with STDHF or sodium laurate as a protease inhibitor, and EDTA as a penetration enhancer, may become an elective method for transmucosal delivery of $[D-Ala^6]$ LHRH.
In the post-genome period, the technique for identifying gene expression has been progressed to high throughput screening. In the field of molecular nutrition, the use of screening techniques to clarify molecular function of specific nutrients would be very advantageous. In this study, we have evaluated Zn-regulated gene expression in Zn-deficient, homocystein-treated EA.hy926 cells, using cDNA microarray, which can be used to screen the expression of many genes simultaneously. The information obtained can be used for preliminary assessment of molecular and signaling events modulated by Zn under pro-atherogenic conditions. EA.hy926 cells derived from human umbilical vein endothelial cells were cultured in Zn-adequate (control, 15 $\mu$M Zn) or Zn-deficient (experimental, 0 $\mu$M Zn) Dulbecco's MEM media under high homocysteine level (100 $\mu$M) for 3 days of post-confluency. Cells were harvested and RNA was extracted. Total RNA was reverse-transcribed and the synthesized cDNA was labeled with Cy3 or Cy5. Fluorescent labeled cDNA probe was applied to microarray slides for hybridization, and the slide was then scanned using a fluorescence scanner. The expression of seven genes was found to be significantly decreased, and one significantly increased, in response to treatment of EA.hy926 cells with Zn-deficient medium, compared with Zn-supplemented medium. The upregulated genes were oncogenes and tumor suppressor genes, cell cycle-related genes and transporter genes. The down-regulated gene was RelB, a component of the NF-kappaB complex of transcription factors. The results of this study imply the effectiveness of cDNA microarray for expression profiling of a singly nutrient deficiency, namely Zn. Furthur study, using tailored-cDNA array and vascular endothelial cell lines, would be beneficial to clarify the molecular function of Zn in atherosclerosis, more in detail.
To investigate the XIST gene expression and its effect in a Klinefelter's patient, we used Klinefelter's syndrome (XXY) patient with azoospermia and also used a normal male (XY) and a normal female (XX) as the control, We were performed cytogenetic analysis, Y chromosomal microdeletion assay (Yq), semi-quantitative RT-PCR, and the Northern blot for Klinefelter's syndrome (KS) patient, a female and a male control, We extracted total RNA from the KS patient, and from the normal cells of the female and male control subjects using the RNA prep kit (Qiagen), cDNA microarray contained 218 human X chromosome-specific genes was fabricated. Each total RNA was reverse transcribed to the first strand cDNA and was labeled with Cy-3 and Cy-5 fluorescein, The microarray was scanned by ScanArray 4000XL system. XIST transcripts were detected from the Klinefelters patient and the female by RT-PCR and Northern blot analysis, but not from the normal male, In the cDNA microarray experiment, we found 24 genes and 14 genes are highly expressed in KS more than the normal male and females, respectively. We concluded that highly expressed genes in KS may be a resulted of the abnormal X inactivation mechanism.
Pharmacological research on (CHA), a marine-derived quinazolinone alkaloid with significant cytotoxic activity, is restricted by low yields and is a problem that needs to be settled urgently. In this work, the selection of additional nitrogen sources and the optimization of additional concentrations and longer fermentation times using ammonium acetate, were investigated. CHA production was optimized to 62.1 mg/l with the addition of 50 mM ammonium acetate at 120 h of the fermentation in the shaker flask. This feeding strategy significantly increased 3-deoxy-arabino-heptulosonate-7-phosphate synthase activity and transcript levels of critical genes (laeA, dahp, and trpC) in the shikimate pathway compared with the non-treatment group. In addition, the selection of the feeding rate (0.01 and $0.03g/l{\cdot}h$) was investigated in a 5-L bioreactor. As a result, CHA production was increased by 57.9 mg/l with a $0.01g/l{\cdot}h$ ammonium acetate feeding rate. This work shows that the strategy of ammonium acetate supplementation had an effective role in improving CHA production by Aspergillus fumigatus CY018. It also shows that this strategy could serve as an important example of large-scale fermentation of a marine fungus in submerged culture.
Ji Yeon Yoo;Dong Sin Kim;Tae Jin Kim;Yun Ji Kang;Min Jae Kim;Jeong Hwan Kim
한국미생물·생명공학회지
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제51권2호
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pp.147-156
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2023
Tetragenococcus halophilus CY54, an isolate from jeotgal, grows best in media with 5% NaCl and can grow at 18% and higher salt concentration. Three different doenjang samples were prepared with multiple starters including T. halophilus CY54. TBZA doenjang was prepared with T. halophilus, Bacillus subtilis, Zygosaccharomyces rouxii and Aspergillus oryzae. BZA doenjang was prepared with the same 3 starters except T. halophilus. KACC doenjang was prepared with a single starter, B. subtilis KACC16750. During 16 weeks of fermentation at 25℃, the viable counts were maintained in the range of 7-8 log CFU/g in all 3 samples. As fermentation progressed, pH decreased and titratable acidity (TA) gradually increased. Crude protein contents decreased slightly. TBZA doenjang showed higher amino-type nitrogen (ANN) and volatile basic nitrogen (VBN) contents, and KACC doenjang showed higher ammonia-type nitrogen (AMN) content. TBZA doenjang showed higher fibrinolytic and protease activity than other doenjang samples. Metabolites analyses by GC/MS showed that doenjang samples were separated from each other by partial least squares-discriminant analysis (PLS-DA) analysis. Seventeen major metabolites involved in the differences between samples were identified and they included organic acids, amino acids, sugars, fatty acids and alcohols. TBZA doenjang showed higher contents for most metabolites responsible for flavor and taste of fermented foods including doenjang. These results showed that T. halophilus could be useful as a starter for doenjang and can improve the product quality by accelerating the fermentation processes.
Lin, Chunmei;Kim, Saet Byeol;Yon, Jung-Min;Park, Seul Gi;Gwon, Lee Wha;Lee, Jong-Geol;Baek, In-Jeoung;Lee, Beom Jun;Yun, Young Won;Nam, Sang-Yoon
대한수의학회지
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제57권4호
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pp.215-222
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2017
Temporal and subcellular distributions of hyaluronic acid (HA) as a degradable nanoparticle (NP) in animals were investigated to determine if HA-NP could be utilized as an appropriate drug delivery system. After mice were intravenously injected with 5 mg/kg of Cy5.5-labeled HA-NP sized 350-400 nm or larger HA-polymers, the fluorescence intensity was measured in all homogenized organs from 0.5 h to 28 days. HA-NP was greatly detected in spleen, liver and kidney until day 28, while it was maintained at low levels in other organs. HA-polymer was observed at low levels in all organs. HA-NP quantities in spleen and liver were reduced until day 3, but increased sharply between days 3 and 7, then decreased again, while their HA-polymers were maintained at low levels until day 28. In kidneys, both HA-NP and HA-polymer showed high levels after 0.5 h of administration, but steadily decreased until day 28. According to ultrastructural analyses, HA-NP was engulfed in Kupffer cells of liver and macrophages of spleen and kidney at day 1 and was accumulated in the cytoplasm of kidney tubular cells at day 7. Overall, these findings suggest that HA-NP could be considered a desirable drug carrier in the liver, kidney, or spleen.
Consideration of factors driving crew productivities is imperative for accurate construction time estimation. Their impacts need to be well understood by estimators. There have been, however, little studies that quantified relationships between crew productivities and factors. This paper quantifies impacts of $^{\circ}A$ECrew size $^{\circ}\phi$ on crew productivities, for three highway concrete bridge activities, namely Column, Cap, and Deck, based on data compiled from 17 on-going highway projects in Texas State, USA. It was found that, for Bridge Deck operation, an increase of one crew-worker of formwork and rebarwork by one, leads to an increase of the productivity (cy/crew day) by 2.5 and 2.9, respectively. For the other activities, larger crew sizes did not lead to better crew productivities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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