• 제목/요약/키워드: Cut-Cell Method

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초기 계대 인간 배아줄기세포의 해동 후 효율적인 배양 방법 (Efficient Culture Method for Early Passage hESCs after Thawing)

  • 백진아;김희선;설혜원;서진;정주원;윤보애;박용빈;오선경;구승엽;김석현;최영민;문신용
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제36권4호
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    • pp.311-319
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    • 2009
  • 목 적: 인간 배아줄기세포 (human embryonic stem cells; hESCs)는 미분화 상태로 무한 증식할 수 있는 자가 증식(self-renewal) 능력과 인체의 모든 세포로 분화할 수 있는 전분화능 (pluripotency)의 특징을 가진 세포로, 손상된 세포를 건강한 세포로 대체하고자 하는 세포치료 (cell therapy) 연구에 활용하기 위한 세포 공급원 (cell source)으로 제시되고 있다. 그러나 인간 배아줄기세포는 확립된 초기에 세포를 안정적으로 배양하고 유지하는 과정이 쉽지 않으며, 특히 동결보존되어 있던 세포를 해동한 후 배양할 때 자연 발생적 분화가 높기 때문에 세포주의 유지에 많은 어려움이 따른다. 본 연구에서는 동결보존되어 있던 초기 계대의 인간 배아줄기세포를 해동하여 다시 배양할 때 자연 발생적 분화 부분을 기계적 분리 방법으로 제거하여 미분화 상태의 세포를 보다 빠르게 확보하기 위한 효율적인 방법에 대해 알아보고자 하였다. 연구방법: 인간 배아줄기세포를 계대 배양한지 4일이 되는 날, 50% 이상의 자연 발생적 분화가 나타난 세포군에서 분화된 부분만을 절개용 유리 피펫 (drawn-out dissecting pasture pipette)을 사용하여 기계적인 방법으로 제거하였다. 이후 지속적으로 배양액을 교환해 주며 세포군의 제거된 부분을 7일째 되는 날까지 관찰하였다. 결 과: 기계적 분리 방법을 사용하여 인간 배아줄기세포의 자연 발생적인 분화 부분을 제거한 빈 공간에 미분화상태의 인간 배아줄기세포가 분열하여 채워지는 것을 관찰하였다. 또한, 이 실험 방법을 연속 두 번 적용하여 배양했을 때 미분화 세포로 회복되는 세포군의 비율이 조금 더 높아지는 것을 확인할 수 있었다. 결 론: 동결되어 있던 초기 계대 인간 배아줄기세포의 해동 후, 자연 발생적 분화에 의해 미분화 상태를 유지하는 세포의 수가 적어 계대를 유지 하기가 어려울 때 이와 같은 기계적 분리 방법을 사용하여 자연 발생적 분화 부분을 제거한 후 배양을 지속하는 것이 단기간 내에 미분화 상태를 유지하는 인간 배아줄기세포의 양적 확보를 위한 효율적인 방법이라고 사료된다.

흰쥐 대구치의 치수강 노출 후 치유 및 형성과정에서 치수와 상아질 기질내의 교원질과 당단백의 분포에 관한 면역조직화학적 연구 (FORMATION OF EXTRACELLULAR MATRIX COMPONENTS DURING DEVELOPMENT AND REPAIR OF PERFORATION OF THE RAT DENTIN AND PULP)

  • 김병우;민병순
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제21권1호
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    • pp.35-53
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    • 1996
  • The development and repair requires the formation of new tissues comprised of various extracellular matrix components. The present study investigated the formation and distribution of the major ECM components such as type I collagen, type III collagen, fibronection, bone sialoprotein, and osteonection during development and repair. For developing observation. Sprague-Dawley rats weighing $27{\pm}1gm$ were sacrificed. For repair observation, Sprague-Dawley rats weighing $110{\pm}5gm$ were used. The pulp perforation were prepared on mesial surface of the maxillary first molar by using 1/2round bur. At 5 days after perforation, rats were sacrificed by perfusion with 3 % paroformaldehyde. The maxillary first molar region were cut, demineralized, dehydrated and embedded in paraffin. Immunostaining the ECM components was achieved by the avidin-biotin complex method. The results as follows : 1. Bright immunoreaction for fibronectin was present in the basement membrane at the inner epithelial-mesenchymal interface, especially concentrated in the blood vessel walls, cell membrane of odontoblasts, and initial predentin. 2. Type I and III collagen was observed in the newly formed pulp tissue, predentin, and its intensity increased as more of these components during repair. 3. Strong immunostaining for bone sialoprotein and osteonectin was found in dentin while no or weaker staining was observed loose connective tissue of the pulp. 4. These results suggest that develpment and repair is achieved through a series of cell differentiation and attachment by the specific ECM components.

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광계측 시스템을 이용한 유.기중 코로나 방전의 전계변화 측정 및 비교분석 (Analysis and the measurement of the variation of electric field in air and oil using optical measuring system)

  • 마지훈;류철휘;강원종;장용무;구자윤
    • 대한전기학회:학술대회논문집
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    • 대한전기학회 2002년도 하계학술대회 논문집 C
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    • pp.1668-1670
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    • 2002
  • Since more than two decades, the conventional PD detecting systems have been employed in order to detect the partial discharges occurring inside the HV power apparatus for their diagnosis by use of different type of detection such as acoustic and UHF detection method. Regardless of their wide on-site application, a certain number of technical inconveniences have been disclosed as follows : multistage amplification. large volume, susceptible to external noise and high price. In this respect, the optical measurement techniques are widely proposed in these days in this concerned field ascribed to the following advantages : immune to external EMI noise and broad band response of the Pockels cell covering from DC to GHz. However, the reliability of several proposed techniques enabling to measure the electric field inside the large high power apparatus has not yet been well approved In this work, an optical measuring system, based on the Pockels effect, has been developed for measuring the field variation due to the corona discharges occurring in air and in oil. This system consists of He-Ne laser, single mode optical fiber, multi mode optical fiber, polarizing film, Y-cut LiNbO3 cell, photo detector, digital oscilloscope and personal computer with GPIB. For this purpose, optical probe has been specially designed and realized and put into the needle-plane electrode. Afterward, same measurement is carried out in oil. We demonstrate the characteristic of the optical measuring system and the measurement results.

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Detection of Circulating Tumor Cells in Breast Cancer Patients: Prognostic Predictive Role

  • Turker, Ibrahim;Uyeturk, Ummugul;Sonmez, Ozlem Uysal;Oksuzoglu, Berna;Helvaci, Kaan;Arslan, Ulku Yalcintas;Budakoglu, Burcin;Alkis, Necati;Aksoy, Sercan;Zengin, Nurullah
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제14권3호
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    • pp.1601-1607
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    • 2013
  • A determination of circulating tumor cell (CTC) effectiveness for prediction of progression-free survival (PFS) and overall survival (OS) was conducted as an adjunct to standard treatment of care in breast cancer management. Between November 2008 and March 2009, 22 metastatic and 12 early stage breast carcinoma patients, admitted to Ankara Oncology Training and Research Hospital, were included in this prospective trial. Patients' characteristics, treatment schedules and survival data were evaluated. CTC was detected twice by CellSearch method before and 9-12 weeks after the initiation of chemotherapy. A cut-off value equal or greater than 5 cells per 7.5 ml blood sample was considered positive. All patients were female. Median ages were 48.0 (range: 29-65) and 52.5 (range: 35-66) in early stage and metastatic subgroups, respectively. CTC was positive in 3 (13.6%) patients before chemotherapy and 6 (27.3%) patients during chemotherapy in the metastatic subgroup whereas positive in only one patient in the early stage subgroup before and during chemotherapy. The median follow-up was 22.0 (range: 21-23) and 19.0 (range: 5-23) months in the early stage and metastatic groups, respectively. In the metastatic group, both median PFS and OS were significantly shorter in any time CTC positive patients compared to CTC negative patients (PFS: 4.0 vs 14.0 months, Log-Rank p=0.013; and OS: 8.0 months vs. 20.5 months, Log-Rank p<0.001). OS was affected from multiple visceral metastatic sites (p=0.055) and higher grade (p=0.044) besides CTC positivity (log rank p<0.001). Radiological response of chemotherapy was also correlated with better survival (p<0.001). As a result, CTC positivity was confirmed as a prospective marker even in a small patient population, in this single center study. Measurement of CTC by CellSearch method in metastatic breast carcinoma cases may allow indications of early risk of relapse or death with even as few as two measurements during a chemotherapy program, but this finding should be confirmed with prospective trials in larger study populations.

Combination of Hydrophobic Filtration and Enrichment Methods for Detecting Bacillus cereus in Fresh-Cut Cabbage

  • Lee, Sujung;Choi, Yukyung;Lee, Heeyoung;Kim, Sejeong;Lee, Jeeyeon;Ha, Jimyeong;Oh, Hyemin;Lee, Yewon;Kim, Yujin;Yoon, Yohan;Lee, Soomin
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제33권5호
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    • pp.325-329
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    • 2018
  • 본 연구에서는 신선편이 양배추 내 Bacillus cereus의 최적 증균 온도를 선정하고 증균배양액에 소수성필터를 적용하여 multiplex PCR의 검출률을 확인하였다. B. cereus 증균온도는 B. cereus 균주 5 개를 혼합하여 1 Log CFU/mL이 되도록 증균배지에 접종하고 $30^{\circ}C$, $37^{\circ}C$, $42^{\circ}C$에서 증균한 뒤 3시간 간격으로 MYP agar에 도말한 후 계수하여 선정하였다. 소수성필터 미적용 그룹은 B. cereus 균주 5 개를 혼합하여 신선편이 양배추에 접종한 뒤 최적 증균온도에서 증균하였으며, 증균배양액을 가열하여 DNA를 추출한 뒤 multiplex PCR을 진행하였다. 소수성필터 적용 그룹은 증균배양액을 소수성 필터에 적용하고 필터에 있는 균을 멸균증류수로 현탁한 뒤 가열하여 추출된 DNA로 multiplex PCR을 진행하였다. 증균온도 확인 결과, 6시간 증균 시 $42^{\circ}C$에서 증균된 샘플($5.4{\pm}0.3Log\;CFU/mL$)과 $30^{\circ}C$에서 증균된 샘플($4.6{\pm}0.6Log\;CFU/mL$) 간 유의차가 확인되었다(p < 0.05). 소수성필터 적용 유무에 따른 multiplex PCR 결과, 1 Log CFU/g 접종된 샘플의 검출률이 소수성 필터 적용 전 60%(3/5)에서 100%(5/5)로 향상되었다. 2 Log CFU/g 접종 샘플은 소수성필터 적용 전 80%(4/5)에서 소수성 필터 적용 후 100%(5/5)로 검출률이 증가하였으나, 3 Log CFU/g 접종 샘플은 소수성 필터 적용 전후 모두 100%(5/5)로 확인되었다. 이상의 결과를 통해 신선편이 양배추 내 B. cereus 검출 시 증균배양액에 소수성필터를 적용하고 multiplex PCR을 적용했을 때 신속하고 효율적인 검출이 가능할 것으로 판단된다.

세척방법에 따른 신선편이 슬라이스 더덕의 저장 중 품질 특성 변화 (Effect of washing methods on the quality of freshly cut sliced Deodeok (Codonopsis lanceolata) during storage)

  • 최덕주;이윤정;김윤경;김문호;최소례;차환수;윤예리
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제20권6호
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    • pp.751-759
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    • 2013
  • 세척방법 차이에 따른 신선편이 슬라이스 더덕의 저장 중 품질 변화를 알아보기 위하여 $10^{\circ}C$에서 저장 실험을 진행하였다. 저장 10일 후에 무세척구와 손세척은 전체의 80.3% 더덕이 부패되어 상품성을 상실하였을 뿐만 아니라 조직감의 연화도 급격히 진행되어 측정이 불가능하였다. 그러나 버블세척구들은 20.4~30.1%의 중량 손실만을 보였으며, 특히 마이크로버블세척구는 저장초기에 비하여 11.1%정도의 조직감만 감소하여 저장 중 변화가 가장 적었다. 슬라이스 더덕의 표면색도 갈변화를 최소화시키며 저장 중 색을 유지하는데 효과적인 것으로 나타났다. 저장 중 수분함량의 변화는 모든 처리구에서 감소하였는데, 특히 무세척구와 손세척은 각각 74.6, 78.3%로 수분함량이 크게 감소하였다. 저장 중 미생물의 수도 마이크로버블세척, 일반버블세척, 손세척, 무세척구 순으로 증식하는 것으로 나타났다. 관능검사와 video microscope system을 이용하여서도 마이크로버블 세척구는 이물질이 발견되지 않았음을 알 수 있었으며, 다른 처리구들보다 세척효과도 우수한 것으로 확인되었다. 이는 마이크로버블세척을 하여 슬라이스 더덕을 저장하는 것이 품질유지에 가장 적합하였으며, 저장수명도 10일($10^{\circ}C$ 저장시)로 가장 길게 나타났다.

포장방법이 칼치제품의 저장성에 미치는 영향 (Effect of Packaging Method on the Storage Stability of Hair Tail Products)

  • 조길석;김현구;강통삼;신동화
    • 한국식품과학회지
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    • 제20권1호
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    • pp.45-51
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    • 1988
  • 포장방법이 칼치 Chunk의 저장성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 시료를 염장 혹은 무염처리 상태로 진공포장, 탈산소제 포장 및 대조구로 하여 $0^{\circ}C$ 또는 $5^{\circ}C$에 저장하면서 실험한 결과는 다음과 같았다. 염장 칼치의 적정 염농도를 4% 내외로 하였을때 적정 식염수의 농도는 15%였고 염장기간은 24시간 이었다. 염장 혹은 무염 처리구의 VBN, TMA, 생균수는 저장 기간이 길어짐에 따라 증가하는 경향이었으나 TBA 값은 $5{\sim}15$일 경에 최고값에 달한후 감소하였다. 칼치 Chunk의 품질 유효지표 성분은 VBN 이었으며 그 함량의 상한선은 29mg%였다. 칼치 Chunk의 간이 품질 평가방법을 도출하였다. $0^{\circ}C$에 저장한 무염처리 칼치의 진공포장, 탈산소제 포장 및 대조구의 경우, 저장 가능기간은 14, 10 및 6일 이었으며, $5^{\circ}C$의 경우는 7, 6 및 4일 이었다. 또한 염장한 칼치를 $5^{\circ}C$에 저장할 경우는 각각 14, 13 및 10일 이었다.

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Loss of Expression of PTEN is Associated with Worse Prognosis in Patients with Cancer

  • Qiu, Zhi-Xin;Zhao, Shuang;Li, Lei;Li, Wei-Min
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제16권11호
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    • pp.4691-4698
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    • 2015
  • Background: The tumor suppressor phosphatase and tensin homolog (PTEN) is an important negative regulator of cell-survival signaling. However, available results for the prognostic value of PTEN expression in patients with cancer remain controversial. Therefore, a meta-analysis of published studies investigating this issue was performed. Materials and Methods: A literature search via PubMed and EMBASE databases was conducted. Statistical analysis was performed by using the STATA 12.0 (STATA Corp., College, TX). Data from eligible studies were extracted and included into the meta-analysis using a random effects model. Results: A total of 3,810 patients from 27 studies were included in the meta-analysis, 22 investigating the relationship between PTEN expression and overall survival (OS) using univariate analysis, and nine with multivariate analysis. The pooled hazard ratio (HR) for OS was 1.64 (95% confidence interval (CI): 1.32-2.05) by univariate analysis and 1.56 (95% CI: 1.20-2.03) by multivariate analysis. In addition, eight papers including two disease-free-survival analyses (DFSs), four relapse-free-survival analyses (RFSs), three progression-free-survival analyses (PFSs) and one metastasis-free-survival analysis (MFS) reported the effect of PTEN on survival. The results showed that loss of PTEN expression was significant correlated with poor prognosis, with a combined HR of 1.74 (95% CI: 1.24-2.44). Furthermore, in the stratified analysis by the year of publication, ethnicity, cancer type, method, cut-off value, median follow-up time and neoadjuvant therapy in which the study was conducted, we found that the ethnicity, cancer type, method, median follow-up time and neoadjuvant therapy are associated with prognosis. Conclusions: Our study shows that negative or loss of expression of PTEN is associated with worse prognosis in patients with cancer. However, adequately designed prospective studies need to be performed for confirmation.

전기방사법을 이용한 LiFePO4 양극 활물질의 합성 및 전기화학적 특성 (Synthesis and Electrochemical Properties of LiFePO4 Cathode Material obtained by Electrospinning Method)

  • 이승병;조승현;박선일;이완진;이윤성
    • 전기화학회지
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    • 제11권4호
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    • pp.268-272
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    • 2008
  • 본 연구에서는 $LiFePO_4$의 입자크기를 조절함으로써 우수한 전극특성을 나타낼 수 있도록 최적의 입자크기($50{\sim}100\;nm$)를 가지는 $LiFePO_4$ 양극 활물질을 전기방사법을 이용하여 합성하였다. XRD 분석결과 FeP, $Fe_2P$ 등의 불순물이 존재하지 않는 Pnma의 공간군을 가지는 잘 발달된 사방정 구조의 $LiFePO_4$가 합성됨을 확인하였으며, SEM 분석을 통하여 시료의 입자형태 및 크기를 관찰하였다. $0.1\;mA/cm^2$의 전류밀도와 $2.8{\sim}4.0\;V$의 전위영역에서 충 방전 테스트 수행시 135 mAh/g의 초기 방전용량을 나타내었으며, 50 싸이클 후에도 99.9% 이상의 용량 보존율을 보이는 우수한 싸이클 특성을 나타내었다.

폐암에서 혈중 CYFRA 21-1의 진단적 가치 (Diagnostic Value of Serum CYFRA 21-1 in Lung Cancer)

  • 윤현대;김기덕;정진홍;이형우;이관호;이현우;조인호
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제42권2호
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    • pp.149-155
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    • 1995
  • 연구목적: Cytokeratin 19는 기관지의 상피세포와 같은 단순 또는 가중층상피세포에 국한된 40KD의 산성 분자로 면역조직학적 검사를 통해 cytokeratin 19가 폐암 조직에서 많이 발현되는 것으로 알려져 있다. Cytokeratin 19에 특징적인 단일 클론 항체 BM 19-21과 KS 19-1을 이용한 면역방사계수법, CYFRA 21-1을 이용하여 cytokeratin 19분절이 폐암 특히 편평상피세포암의 진단에 유용한 표지자가 될 수 있다는 보고가 있어 폐암 표지자로서 CYFRA 21-1의 유용성을 조사해 보기 위하여 본 연구를 하였다. 방법: 저자 등은 영남대학교 의과대학 부속병원 내과에 1993년 4월부터 1994년 8월까지 입원한 원발성 폐암 환자 39명(편평상피 세포암 19명, 선암 11명, 소세포암 9명)을 폐암군으로, 비악성 호흡기질환자 15명(폐결핵 8명, 만성 폐색성 폐질환 3명, 폐렴 2명, 만성 폐색성 폐질환과 폐결핵이 동반된 환자 2명)을 대조군으로 하여 새로운 폐암 표지자의 가능성이 있는 CYFRA 21-1의 유용성을 조사하였다. CYFRA 21-1의 측정은 면역방사계수측정 kit인 ELSA-CYFRA 21-1을 사용하였다. 결과: 폐암의 조직학적 분류에 따른 CYFRA 21-1의 혈중 측정치는 편평상피세포암이 $20.2{\pm}4.7ng/ml$, 선암이 $7.2{\pm}1.6ng/ml$, 비소세포암이 $15.5{\pm}4.7ng/ml$로 모두 대조군의 $1.7{\pm}0.5ng/ml$보다 유의하게 증가되어 있었다(p<0.01). 또한 비소세포암중 편평상피세포암에서 선암보다 유의하게 증가되어 있었다(p<0.05). 그러나 소세포암에서는 $2.9{\pm}0.9ng/ml$로 대조군과 유의한 차이가 없었다. CYFRA 21-1의 정상 범위를 3.3ng/ml 이내로 하였을때 소세포암에서는 민감도 11.1%, 특이도 65.2% 였으나, 비소세포암에서는 민감도 70.0%, 특이도 62.5%였고 이 중 편평상피 세포암인 경우 민감도 73.7%, 특이도 75%였으며 선암인 경우 63.6%, 78.9%로 산출되었다. 결론: CYFRA 21-1은 비소세포암의 종양 표지자로 유용성이 있을 것으로 생각되며, 특히 편평상피 세포암의 진단에 도움이 될 것으로 생각되었다.

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