This study was carried out to observe the formation of superoxide radicals and the changes in the activities of superoxide dismutase (EC.1.15.1.1.) from the various organs of a rat which was blocked tricarboxylic acid cycle. In order to block the tricarboxylic acid cycle, the beta-fluoroethylacetate was injected into peritoneal cavity of rat and removed the various tissues from the rat at internals of an hour. By tissue extracts being prepared by the method of Weigiger and Fridovich the activities of superoxide dismutase, aconitase, and contents of bliid glucose, citrates, and wuperoxide radicals were determined. The experimental results are summarized as follows: Accumulation of citrates if increased within three hours after treatment in the all tested tissues, especially, in the geart and spleen they are higher than one of other tissues as 12 and 20 times of control. The activities of aconitase are ingibited to 30-35% on an hour after beta-fluoroethylacetate treatment comparing with that of control rat. The content of blood glucose is increased to 1.6 fold of normal value after 5 hours of treatment. In all tested tissues, superoxide radicals are formed in the heart as 0.26 micromoles per gram tissue between one and three hours after treatment. The activities of total superoxide dismutase are increased between one and three hours after treatment in the all tested tissues and one of these enzymes in heart is highest. The activities of superoxide dismutase containing Mn are also increased with an increase of total superoxide dismutase activities.
This study was performed to determine the contents of mineral and bioactive components in leek samples harvested at different times. Analysis of chlorophyll contents of leek harvested at different times showed the latest one (5th sample) had the highest level among samples. The leek harvested at the earliest (1st) had the highest amount of Fe, f and Cu while 5th sample was highest in Ca, Mn, P, Zn and Na contents. Lead (Pb) was not detected in any leek sample harvested at different times. SOD (superoxide dismutase)-like activity was the highest in leek harvested at the earliest.
Flavonoids are class of polyphenolic compounds widely distributed in the plant kingdom, which display a variety of biological activities, including antiviral, antithrombotic, antiinflammatory, antihistaminic, antioxidant and free-radica 1 scavenging abilities. The antioxidant enzyme (AOE) system plays an important role in the defense against oxidative stress insults. To determine whether flavonoid, myricetin can exert antioxidative effects not only directly by modulating the AOE system but also scavenging free radical, we investigated the influence of the flavonoid myricetin on cell viability, different antioxidant enzyme activities, ROS level and the expression of different antioxidant emzyme in B16F10 murine melanoma cells. Myricetin in a concentration range from 6.25 to $50\;{\mu}M$ decreased superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx) enzyme activities, but catalase (CAT) activity was increased. In the myricetin-treated group, ROS levels were decreased dose-dependently. Antioxidant enzyme expression was measured by RT-PCR. Myricetin treatment of B16F10 cells increased catalase expression. Expression levels of copper zinc superoxide dismutase (CuZn SOD) were not affected by exposure of myricetin. Manganese superoxide dismutase (Mn SOD) and GPx expression levels decreased slightly after myricetin treatment. In conclusion, the antioxidant capacity of myricetin was due to CAT and free-radical scavenging.
Protective effects on subcellular localization of Photobacterium leiognathi CuZnSOD(PSOD) were examined in Escherichia coli SOD mutant cells on the treatment of paraquat, heat shock $(37^{\circ}C{\to}42^{\circ}C{\to})$, hydrogen peroxide and copper sulfatem respectively. The physiological characteristics of the periplasmic and cytoplasmic PSOD localized differently are dependent on the conditions in this experiment. Cells expressing SOD periplasmically in the treatments of paraquat and $H_2O_2$ respectively were somewhat better protective effects cells expressiong SOD cytoplasmically at comparable level and SOD expression level showed, the most consistently important variable. However, this was reversed in the treatments of heat shock and $CuSO_4$, respectively.
The present study was attempted to investigate the mechanism of oxidative cellular injuries which occur in diabetic rats by determining changes of antioxidant enzymes activity in the lung of alloxan-induced diabetic rats, the contents of glutathione in the lung, liver, blood samples, and ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase activities in the liver. Superoxide dismutase activities (SOD), including Cu, Zn-SOD and Mn-SOD, decreased in the lung of diabetic rats compared with those of normal control rats. However, activities of catalase and glutathione peroxidase(GPX) activities were not affected in the lung of diabetic rats. In diabetic rats, glutathione contents in the lung, liver, and blood samples, as well as the activities of ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase in the livers which is known to be the key enzyme of glutatione biosynthesis, decreased significantly. From these experimental results, it is thought that the decrease in SOD activities in the lung, glutathione contents and ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase activities in some tissues in alloxan-induced diabetic rats may be the crucial cause of vullnerability to oxidative cellular injuries.
Oxygen is required for many important aerobic cellular reactions, it may undergo electrontransfer reactions, which generate highly reactive membrane-toxic intermediates (reactive oxygen species, ROS), such as hydrogen peroxide, singlet oxygen, superoxide radical, hydroxyl radical, hydroperoxyl radical, hydroxy ion. Various mechanisms are available to protect cells against damage caused by oxidative free radicals, including scavenging enzyme systems such as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPx). This antioxidant defense system is a very complex and finely tuned system consisting of enzymes capable of detoxifying oxygen radicals as well as low molecular weight antioxidants. In addition, repair and turnover processes help to minimize subcellular damage resulting from free radical attack. $H_2O_2$,one of the major ROS, is produced at a high rate as a product of normal aerobic metabolism. The primary cellular enzymatic defense systems against $H_2O_2$ are the glutathione redox cycle and catalase. From Northern blot analysis of total RNAs from cultured cell with $H_2O_2$ treatment, various results were obtained. Expression of Cu/Zn SOD decreased when cell passage increased, but the level of the Cu/Zn SOD was scarcely expressed in 35 passage.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.5
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pp.875-880
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2000
Reactive oxygen species are produced under diabetic conditions and possibly cause various forms of tissue damage in patients with diabetes mellitus. The aim of this study was to examine the effects of high glucose on the alloxan-induced beta cell injury. The insulinoma (RINm5F) cells were clutured either with high glucose (22.2 mM) or normoglucose (5.6 mM) in RPMI 1460 media for 3 days. The SOD activities were determined by spectrophotometric assay and nitroblue tetrazolium (NBT) stain. The effects of high glucose on the cytotoxicity of alloxan were also investigated in RINm5F cells and the cells viability were determined by 3-(4,5-dimethylthiazolyl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) methods. Results showed that the CuZn-SOD activity was decreased but Mn-SOD activity was increased significantly in RINm5F cells cultured with high glucose (22.2 mM) media. The cytotoxicity of alloxan was increased by high glucose compared with normoglucose in RINm5F cells. Diethyl-dithiocarbarmate (DDC), as inhibitor of CuZn-SOC, also potentiate the alloxan-induced cytotoxocity in RINm5F cells. These results suggest that, in RINm5F cells, short term culture with high glucose media decreases Cu-Zn-SOD activity and the decreased activity of CuZn-SOD many one of the causative factors of beta-cell injury induced by high glucose.
This study was aimed to investigate that training of horses is related with the activity of superoxide dismutase(SOD) in erythrocyte of racing horses. The SOD activity was assayed from erythrocyte of six Thoroubred horses having final stage of training, about 21 month-old, 474~509 kg body weight for race trainig. During 7 weeks of training period from 24th Sep. to 6th Nov, horses were bled very carefully 4 times at 1st Oct, 16th Oct, 30th Oct. and 6th Nov. As the training period passed, erythrocyte of the horses have gradually increased the MnSOD activity(p<0.05) and lowered the CuZnSOD activity. The plasma ceruloplasmin and peroxidase activities, and lactate levels were reduced gradually while peroxide and glucose levels gradually increased. The calculated oxygen consumption(Eaton, 1995) for training of horses were linearly related with the MnSOD activity(r=0.650, n=32) but negatively with CuZnSOD activity in erythrocyte and lactate levels(r=-349, n=32) in plasma. Also, peroxide levels in plasma of horses had positive relation with the MnSOD activity in erythrocyte(r=0.616, n=48). In conclusions, as the training is progressed, the raised MnSOD activity in erythrocytes and peroxide levels in plasma indicated balances between oxidant and antioxidants for the protection from ROS during race of horses. The results showed that the MnSOD activity in erythrocyte and peroxide levels in plasma may be used as marker for the intensity of training racing horses.
We investigated relations between physiological damages and gene expression and enzyme activities of superoxide dismutase(SOD) isoenzymes in leaves of rice (Oriza sativa L. cv. Ilpoombyeo) plants irradiated with a high-dose gamma-ray. Gamma-irradiation with 500 Gy caused significant decreases in the contents of protein, chlorophyll and carotenoid in the rice leaves by 24 h, especially reducing the chlorophyll contents up to 26% relative to the control. In contrast, gene expressions of SOD isoenzymes were kept higher in the irradiated leaves until 24 h after the irradiation than in the control and they started to noticeably decrease at 48 h, finally being lower in the irradiated leaves at 72 h than in the control. In the case of enzyme activities of SOD isoenzymes, some CuZn-SOD isoenzymes showed slightly increased activities until 48 h after the irradiation but at 72 h, all isoenzyme activities markedly decreased in the irradiated leaves below the control levels. In conclusion, 500 Gy gamma-irradiation used in the current study caused decreases in the contents of protein, chlorophyll and carotenoid as symptoms for physiological damages. Although such physiological damages were not directly related to the gene expressions and enzyme activities of SOD isoenzymes until 24 h after the irradiation, the damages at 72 h were reasonably attributable to their reduction.
We investigated changes in the superoxide dismutase (SOD) activity and SOD isoenzyme pattern in suspension cultures of tomato (Lycopersicon esculentum), which were compared with those of intact tomato plants. two grams (fr wt) of cells subcultured at 15-day intervals were inoculated into 50 mL MS medium containing l mg/L 2,4-D and 30 g/L sucrose in a 300 mL flask and maintained at $25^{\circ}C$ in the dark (100 rpm). The cell growth reached a maximum at 20 days after subculture (DAS), followed by a rapid decrease with further cultures. The cell colour changed from white to black from 23 DAS. The intracellular SOD activity (units/g cell dry wt) was significantly increased from 23 DAS and reached a maximum at 28 DAS (52,400 units), followed by a decrease with further cultures, whereas the extracellular SOD activity showed a maximum at 25 DAS (27,800 units/50 mL medium). The total SOD activity per flask showed a maximum at 25 DAS (35,700 units), in which the extracellular SOD activity occupied about 75%. The tomato cultured cells had four SOD isoenzymes and their patterns were well correlated with SOD activity without a qualitative change during the cell cultures. The intact tomato plants had an additional CuZnSOD isoenzyme, showing the different isoenzyme patterns from cultured cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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