Immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC) was used to separate various types of recombinant hirudins from the culture broth. The wild type hirudin exhibited a retention in Cu(II)-chelated affinity chromatgoraphy since it contained a single exposed histidine at position 51. To obtain a stronger retention on an IDA-Cu(II) column, the hirudin variants were genetically engineered to contain one or two histidine (s) more than the wild type. While the affinity of the variants for IDA-Cu(II) ligand increased in comparison to that of the wild type, the antithrombin activities reduced to a certain degree. Cu(II), Ni(II) and Zn(II) ions were applied separately to the metal chelate column to investigate ligand specificity with respect to protein retention. As a result, the Cu(II) chelated chromatography gave the best resolution for all the hirudins tested and appeared to be the only IMAC that could be used generally for the purification of hirudins with a decreasing pH gradient.
It was found that cupric ion selective electrode, which was prepared by mixing CuS and $Ag_2S$ with the ratio four to one and PVC, was hard and durable. The response potentials were reproducible and linear in the range from 1.0 ${\times}$$10^{-1}M$ to 1.0 ${\times}$$10^{-5}M$ copper (II) solution and its slope was 25.0 mV per decade concentration at $298^{\circ}K$, slightly different from Nernstian slope. The copper (II) indicating electrode was applied in precipitation titration of 1.0 ${\times}$$10^{-2} M Cu(II)$ sample solution containing proper amounts $NaNO_3$ with 0.1 M NaOH standard solution. Also, this electrode could be used in complex titration of Zn(II), Mg(II), Ca(II) with EDTA and stability constant of EDTA complex of Ca(II) and Mg(II) was calculated by using known Cu-$EDTA^{2-}$ stability constant.
The separation efficiency of metal ions by using the poly-NTOE(1, 12-diaza-3, 4:9, 10-dibenzo-5, 8-dioxacyclopentadeca-1, 12-ylene-2, 7-dihydroxyoctamethylene) has been determined by column chromatography in aqueous solution. Binding constants and separation factors for several poly-NTOE interactions were measured in aqueous solution. The order of these binding constants and separation factors with metal ions were Co(II)Zn(II) for the transition metal ions and Cd(II)
Kim, Hyoung-Chun;Jhoo, Wang-Kee;Kim, Kyeong-Ho;Kim, Jin-Tae;Lee, Sang-Joon;Hur, In-Hoi
Archives of Pharmacal Research
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v.13
no.2
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pp.121-125
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1990
The present study examined the alterations in endogenous oxy-radical scaverging system of pancreatic tissue associated with the dose of 45 mg/kg steptozotocin (STZ) alone or with various combinations. The activities of pancreatic Min-superoxide dismutase (SOD) and catalase were no apparent changes in the other groups except for the Cu(II) 4 mg/kg pretreated group. The presence of 4 mg/kg of Cu(II) with or without 125 mg /kg of diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA) markedly attenuated the fall in activity of Cu, Zn-Sod by STZ stress. In particular, STZ-induced superoxide generation was dramatically abolished by prior administration of Cu(II) 4 mg/kg. Conculsively, We suggested the possible involvement that copper may enhance the defence mechanism of pancreatic oxidative damage by STZ challenge.
The electronic absorption spectra of [3-(2-thenoyl) 3-(p-NO2-phenylhydrazone) ethyl pyruvate] (I), p-Br (II) and p-CH3 (III) were studied in ethanol and the spectra comprise four absorption bands which assigned to the corresponding electronic transition. The pK values of these compounds have been determined spectrophotometrically and pH-metrically, the results shown that the interval range for color change of compound (I) is (8-10) similar to that of phenolphethalin indicator, indicating that this compound can be used as acid-base indicator. The successive stability constants of the compounds under study with some transition elements (Mn(II), Co(II), Ni(II), Cu(II), Zn(II), Cd(II), UO2(II), La(III) and Zr(IV) have been determined pH- metrically. Stoichiometric complexes with ratios 1:1 and 1:2 (M: L) were formed for all metals. The pK of the three derivatives and the values of the stability constant (logK) of the complexes have the order; III > II > I. Also conductometric titrations have been carried out and the results show that this titration can be used for determination of both the metal ion and the ligand concentrations by each others.
The Kamkye Cu-Pb-Zn-Au-Ag deposits occur as quartz veins that filled fault-related fractures of NW system developed in the Cretaceous Gyeongsang basin. Three major stages of mineral deposition are recognized: (1) the stage I associated with wall rock alteration, such as sericite, chlorite, epidote and pyrite, (2) the early stage II of base-metal mineralization such as pyrite, hematite, and small amounts of sphalerite and chalcopyrite. and the middle to late stage II of Cu-As-Sb-Au-Ag-S mineralization, such as sphalerite, chalcopyrite, galena with tetrahedrite, tennantite, pearceite, Pb-Bi-Cu-S system, argentite and electrum. (3) the stage III of supergene mineralization, such as covellite, chalcocite and malachite. K-Ar dating of alteration sericite is a late Cretaceous ($74.0{\pm}1.6Ma$) and it may be associated with granitic activity of nearby biotite granite and quartz porphyry. Fluid inclusion data suggest a complex history of boiling, cooling and dilution of ore fluids. Stage II mineralization occurred at temperatures between 370 to $220^{\circ}C$ from fluids with salinities of 8.4 to 0.9 wt.% NaCl. Early stage II($320^{\circ}C$, 2.0 wt.% NaCl) may be boiled due to repeated fracturing which opened up the hydrothermal system to the land surface, and which resulted in a base-metal sulfide. Whilst the fractures were opened to the surface, mixing of middle-late stage II ore fluids with meteoric waters resulted in deposition of Cu-As-Sb-Au-Ag minerals from low temperature fluids(${\leq}290^{\circ}C$). Boiling of ore fluids may be occured at a pressure of 112 bar and a depth of 412 m. Equilibrium thermodynamic interpretation of sphalerite-tetraherite assemblages in middle stage II indicates that the ore-forming fluid had log fugacities of $S_2$ of -6.6~-9.4 atm.
In this research, the processing control of NiCuZn Ferrite has been developed. The relationship between initial permeability and bulk density of NiCuZn Ferrite with processing factors was studied. NiCuZn Ferrite, which calcinated at $700^{\circ}C$ for 3 hours, was ball milled for about 60 hours to make a size of $0.5\mu\textrm{m}$ followed by granulation using spray dryer. The physical properties and the magnetic properties of NiCuZn Ferrite were investigated with the processing factor, such as (i) granule size and forming pressure, and (ii) sintering temperature. The green density of NiCuZn Ferrite was largely depended on the forming pressure rather than its granule size. The green density of NiCuZn Ferrite was increased from $2.484\;g/cm^{3}$ to $3.002\;g/cm^{3}$ with increase in forming pressure. The bulk density of NiCuZn Ferrite was increased from $3.470\;g/cm^{3}$ to $4.754\;g/cm^{3}$ linearly with increase in sintering temperature. The relationship between initial permeability and bulk density of NiCuZn Ferrite was expressed with the empirical equation,$\mu_{i}=a+b_{\rho}+c_{\rho}^2$ at forming pressure and sintering temperature.
The effect of high pressure on the stability of copper(II), cadmium(II) and zinc (II) complex ions with ethylenediamine, propylenediamine, diethylenetriamine has been investigated polarographically. 0.10M KN$O_3$ solution was used as a supporting electrolyte. The concentration of chelating agents was varied from 0.01M to 1.00M. The dissociation constants of metal complex ions were increased with increasing the pressure from 1 atmosphere to 1,500 atmospheres. The increment of the dissociation constant per unit atmosphere varied from 1.1 ${\times} 10^{-3}$% for Cu(dien)$_2^{2+}$ to 5.0 ${\times} 10^{-3}$ % for Zn(en)$_2^{2+}$.
Solvent extraction using a Schiff-base, salen$(NEt_2)_2$, as a chelating agent has been conducted on several water samples to study the determination of trace Cu(II), Mn(II) and Zn(II). Experimental conditions for the formation and extraction of metal complexes were optimized with an aqueous solution similar in composition to the samples. The matrix difference between the sample and standard solutions was approximately matched, and the pH of each sample solution was adjusted to 9.5 with $NaHCO_3/NaOH$ buffer. The concentration of salen$(NEt_2)_2$ was $7.3\;{\times}\;10^{-3}$ mol/L, and the complexes were extracted into MIBK solvent followed by the measurement of AAS absorbance. The potential interference of concomitant ions was investigated, but no interference from alkaline and alkali earth ions was shown in this procedure. The given procedure is precise, as judged from the relative standard deviation of less than 5% for five measured data. The recovery of 93-103% shows that this method is quantitative for such trace metal analysis.
The sorption and desorption properties of U(VI), Th(IV), Zr(IV), Cu(II), Pb(II), Ni(II), Zn(II), Cd(II) and Mn(II) ions on XAD-16-[4-(2-thiazolylazo)orcinol] (TAO) chelating resin were studied by elution method. The effect was examined with respect to overall capacity of each metal ion, separation of mixed metal ions, flow rate and concentration of buffer solution for optimum condition of sorption. The overall capacities of some metal ions on this chelating resin were 0.35nmol U(VI)/g resin, 0.49nmol Th(IV)/g resin, 0.41nmol Cu(II)/g resin, and 0.31nmol Zr(IV)/g resin, respectively. The elution order of metal ions obtained from breakthrough capacity and overall capacity at pH 5.0 was Th(IV)>Cu(II)>U(VI)>Zr(IV)>Pb(II)>Ni(II)>Zn(II)>Mn(II)>Cd(II). The group separation of mixed metal ions was possible by increasing pH in pH range 2~5 at a flow rate of 0.28mL/min. Characteristics of desorption were investigated with desorption agents such as $HNO_3$, HCl, $HClO_4$, $H_2SO_4$, and $Na_2CO_3$. It was found that 2M $HNO_3$ showed high desorption efficiency to most of metal ions except Zr(IV) ion. Also, desorption and recovery of Zr(IV) ion were successfully performed with 1M $H_2SO_4$. Recovery of trace amount of U(VI) ion from artificial sea water was over 94%. The chelating resin, XAD-16-TAO was successfully applied to group separation of rare earth metal ions from U(VI) by using 2M $HNO_3$ as an eluent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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