A Corynebacterium diphtheriae iron-repressible gene dirA, that was homologous to TSA of Saccharomyces cerevisiae and AhpC subunit of Salmonella typhimurium alkyl hydroperoxide reductase, was amplified with PCR and expressed in E. coli. The DirA purified from the transformed E. coli crude extracts prevented the inactivation of enzyme caused by metal-catalyzed oxidation (MCO) system containing thiols but not by ascorbate/Fe$^{3+}$/$O_2$ MCO system. The DirA concentration, which inhibited the inactivation of glutamine synthetase by 50% (IC$_{50}$) against MCO system, was 0.12 mg/ml. The multimeric forms of DirA were converted to the monomeric form in SDS-PAGE under the thioredoxin system comprised of NADPH, Saccharomyces cerevisiae thioredoxin reductase, and thioredoxin. Also, DirA showed thioredoxin dependent peroxidase activity. All of these results were consistent with the characteristics of a thiol specific antioxidant (TSA) protein having two conserved cysteine residues.
Fusarium head bight (FHB) is a devastating disease on major cereal crops worldwide which causes primarily by Fusarium graminearum. Synthetic fungicides are generally used in conventional agriculture to control FHB. Their prolonged usage has led to environmental issues and human health problems. This has prompted interest in developing environmentally friendly biofungicides, including botanical fungicides. In this study, a total 100 plant extracts were tested for antifungal activity against F. graminearum. The crude extract of Pterocarpus santalinus heartwood showed the strongest antifungal activity and contained two antifungal metabolites which were identified as ${\alpha}$-cedrol and widdrol by GC-MS analysis. ${\alpha}$-Cedrol and widdrol isolated from P. santalinus heartwood extract had 31.25 mg/l and 125 mg/l of minimal inhibitory concentration against the spore germination of F. graminearum, and also showed broad spectrum antifungal activities against various plant pathogens. In addition, the wettable powder type formulation of heartwood extract of P. santalinus decreased FHB incidence in dose-dependent manner and suppressed the development of FHB with control values of 87.2% at 250-fold dilution, similar to that of chemical fungicide (92.6% at 2,000-fold dilution). This study suggests that the heartwood extract of P. santalinus could be used as an effective biofungicide for the control of FHB.
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2001.11a
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pp.46-53
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2001
A commensal thermophile, Symbiobacterium toebii, isolated from hay compost (toebii) in Korea commensally interacted with a thermophilic Geobacillus toebii sp. nov., which was a new species within the genus Geobacillus on the basis of the phenotypic traits and molecular systematic data. S. toebii required the crude extracts and/or culture supernatant of the Geobacillus toebii for axenic growth and could grow on the temperature between 45 and $70^{\circ}C$ (optimum: $60^{\circ}C$; 2.4 h doubling time) and pH 6.0 and 9.0 (optimum: pH 7.5). The G+C content of the genomic DNA was $65 mol\%$, and the major quinones were MK-6 and MK-7. A phylogenetic analysis of its 16S rDNA sequence indicated that Symbiobacterium toebii was closely related with solely reported Symbiobacterium thermophilum. The presence of the commensal thermophile 16S rDNA and accumulation of indole in all the enriched cultures indicate that Symbiobacterium toebii is widely distributed in the various soils. The genome of S. toebii constituted a circular chromosome of 3,280,275 base pairs and there was not an extra-chromosomal element (ECE). It contained about 4,107 predicted coding sequences. Of these protein coding genes, about $45.6\%$ was encoded well-known proteins and annotated the functional assignment of 1,874 open reading frames (ORFs), and the rest predicted to have unknown functions. The genes encoding thermostable tyrosine phenol-lyase and tryptophan indole-lyase were cloned from the genomic DNA of S. toebii and the enzymatic production of L-tyrosine and L-tryptophan was carried out with two thermostable enzymes overexpressed in recombinant E. coli.
The chemical components and physiological activities of Neungee mushroom (Sarcodon aspratus) were investigated to assess its nutritional and functional value. The moisture, total protein, crude fat and ash contents of Neungee mushroom were 85.73%, 1.78%, 1.87% and 1.27%, respectively. The alanine, linoleic acid, tartaric acid and glucose concentrations in Neungee mushrooms were 90.11, 39.09, 75.47 and 1,680 mg%, respectively. The radical and nitrate scavenging activities in Neungee mushroom extracts were 46.2% and 77.8% on $800{\mu}g/mL$ depending on the extract concentration. The lipid peroxidation inhibitory effect of Neungee mushroom extract ($1,500\;{\mu}g/mL$) was $2,347\;{\mu}mol$ MDA/g liver. We also observed that an extract concentration of $1,500\;{\mu}g/mL$ was more effective than the control at 7 d. The cytotoxicity of the Neungee mushroom extract ($100\;{\mu}g/mL$) for the A549 (lung carcinoma) cells was 96.0%.
This study was carried out to provide basic information related to improvement of flavor and consumption of cheonggukjang. Red ginseng cheonggukjang (RGC) and Rubus coreanum cheonggukjang (RCC) extracts were prepared, and their physicochemical characteristics were compared with either general cheonggukjang (GC) or non-fermented boiled soybean (BS). The moisture and crude fat contents were not significantly different among samples. RGC had the highest reducing sugar content and BS had the lowest. The free sugar content of RGC was higher than that of either GC or RCC, and the major free sugars present were glucose, fructose and sucrose. Seventeen free amino acids were detected in BS and cheonggukjang, and the content of free amino acids ranged from 1,233.8 to 2,599.6 mg/100 g. The greatest content of free amino acids was found in RGC. Color L, a and b values were highest in BS and lowest in RCC. The hardness and strength of RGC and RCC were lower than for GC.
KIM Woo-Jun;BAE Tae-Jin;CHOI Jong-Duck;CHOI Ji-Hyun;AHN Myung-Ho
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.27
no.3
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pp.259-264
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1994
The possibility of shellfish utilization of juice as seasoning materials was examined through the analyzing proximate compositions and N-containing materials. The amounts of the sucking liquid wastes were estimated as 58,819 tons for oyster, 764 tons for pen-shell, 604 tons for cockle and 3,896 tons for blue-mussel from 1985 to 1990 in Korea. Water contents ranged from 95.2 to $97.4\%$ and crude protein level was $1.0{\sim}1.4\%$. Taurine was the most abundant nitrogenous compound($40{\sim}56\%$) in extracts, and glycine($10.4{\sim}36.1\%$), alanine($4.8{\sim}8.6\%$) and glutamic acid($3.1{\sim}5.3\%$) followed. More than $40\%$ of ADP and AMP as mucleotide were contained in all shellfish samples but pen-shell and cockle had $20\%$ of inosine, also. Glycinebetaine was present in corcentrations of 139.8mg/g in oyster and $45.5{\sim}61.9mg/100g$ in pen-shell, cockle and blue-mussel. Total creatinine and trimethylamine oxide levels were $30.4{\sim}59.1mg/100g$ and $0.82{\sim}47.2mg/100g$, respectively.
In order to establish the processing condition of rapid- and low salt-fermented liquefaction of anchovy (Engrulis japonica), effect of temperature on crude enzyme activity of anchovy viscera, pretreatment conditions, and the minimum content of adding NaCl were investigated. The minimum limitation of NaCl content for anchovy liquefaction was 10%. Sample A(water adding, heating, adding 10% NaCl): chopped whole anchovy adding 20% water and then heating for 9 hrs at $50^{\circ}C$ and then adding 10% NaCl and then fermented at room temperature$(8-29^{\circ}C)$ for 180 days. Sample B(water adding, heating, adding 13% NaCl): chopped whole anchovy adding 20% water and then heating for 9 hrs at $50^{\circ}C$ and then adding 13% NaCl and then fermented at room temperature for 180 days. Sample C(adding 13% NaCl): chopped whole anchovy and then adding 13% NaCl and then fermented at room temperature for 180 days. Sample D(adding 17% NaCl): whole anchovy adding 17% NaCl and then fermented at room temperature for 180 days. The content of free amino acids such as aspartic acid, serine and threonine fluctuated severely according to the pretreatment methods. Possibly they might be recommend quality indices of standardization for salt-fermented liquefaction of anchovy. As for the relation between fermentation period(X) and individual free amino acid(Y), five kinds of free amino acids such as glutamic acid, valine, glycine, lysine, and alanine showed highly significant in their coefficient of determination in most of samples. They might be recommend as quality indices for salt-fermented liquefaction of anchovy during fermentation. The difference of taste between products of the rapid- and low salt-fermented liquefaction and the traditional salt-fermented liquefaction were caused by their composition of the free amino acids ratios, in which were umami, sweet, and bitter taste in the extracts of anchovy during fermentation. The appropriate fermentation period of the sample A was shorten 30 days than the sample B and 60 days than the samples C and 90 days than the sample D in the processing of anchovy.
Jin, Yinzhe;Ahn, So Young;Hong, Eun Suk;Li, Guang hua;Kim, Eun-Ki;Row, kyung Ho
Applied Chemistry for Engineering
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v.16
no.3
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pp.348-353
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2005
The extracts from natural and fermented products such as Artemisia plants, Rhodiola Salientness, fermented soybeans and soybean paste were used to investigate the whitening effect. 10 g of Artemisia plant were added to 300 mL of ethanol and extracted by sonification at room temperature for 3 h. The extract was further partitioned by the equal volume percent in the order of the n-hexane, chloroform and ethyl acetate. 5 g of Rhodiola salientness was also added to 150 mL of methanol and extracted at the room temperature for 12 h. The effluents from a chromatographic column ($3.9{\times}250mm$, $C_{18}$, $15{\mu}m$) were collected and concentrated in two parts. The extraction of fermented soybeans and soybean paste were done by 60% ethanol. In this work, tyrosinase inhibitory activity and melanin inhibitory effect were measured to confirm the whitening effect. The water layer of Artemisia princeps Pampan showed the good inhibitory of antioxidant, while the hexane layer of Artemisia iwayomogi Kitamura and the chloroform layer of Artemisia princeps Pampan had the excellent melanin inhibitory effect. The Rhodiola salientness had the superior whitening effect to the arbutin in in-vivo melanin production ratio assay. However, the fermented soybeans and soybean paste did not show any whitening effect.
An indole oxygenase originated from Rhodococcus sp. RHA1 was cloned into the expression vector, pTrc99A, in Escherichia coli, and designated pTCAN1. The pTCAN2 was constructed from pTCAN1 by the deletion of $lacI^q$ for the constitutive expression of indole oxygenase without adding IPTG in the medium. The complete open reading frame of indole oxygenase was 1,224 bp long, which encodes a protein of 407amino acids. Crude extracts of E. coli $DH5{\alpha}$/pTCAN1 and pTCAN2, respectively, were prepared and subjected to SDS-PAGE analysis. A band corresponding to molecular mass of about 43 kDa was appeared and this result correlated with the predicted molecular mass of cloned indole oxygenase. The E. coli harboring pTCAN1 and pTCAN2, respectively, showed blue color colony in LB plate. The pigment showing blue color was prepared from E. coli $DH5{\alpha}$/pTCAN2, and identified as indigo by experiments using spectrophotometer, HPLC, and TLC. The indigo-forming activity of indole oxygenases from the whole cell of E. coli $DH5{\alpha}/pTCAN1$ cultured at LB medium added 1mM of IPTG and that of E. coli/pTCAN2 showed about 1.75nmol/min/mg DCW (dry cell weight) and 3.85 nmol/min/mg DCW, respectively. Also, the E. coli $DH5{\alpha}$/pTCAN2 produced about $236{\mu}M$ of indigo after 48 hours incubation in TB medium supplemented with 2.5 mM of tryptophan.
Kim, Jung-Rae;Oh, You-Kwan;Yoon, Yeo-Joon;Lee, Eun-Yeol;Park, Sung-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.13
no.5
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pp.717-724
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2003
A newly isolated Citrobacter sp. Y19 catalyzes the CO-dependent $H_2$ production (biological water-gas shift reaction) by the actions of CO dehydrogenase (CODH) and hydrogenase. Y 19 requires $O_2$ for fast growth, but its $H_2$ production activity is significantly inhibited by $O_2$. In the present study, the effect of $O_2$ on the activities of CODH ard hydrogenase was investigated quantitatively in both whole cells and broken cells, based on CO-dependent or methyl viologen (MV)-dependent $H_2$ production in addition to CO-dependent MV reduction. In crude cell extracts, CODH activity was mostly found in the soluble fraction. Inactivation of CODH and hydrogenase activities by $O_2$ followed the first-order decay kinetics, and the dependence of the rate constants on $O_2$ partial pressure could be expressed by the Michaelis-Menten equation. In whole cells, the maximum deactivation rate constants ($k_{d,max}$ of hydrogenase and CODH were quite similar: $0.07{\pm}0.03 min^{-1}\;and\;0.10{\pm}0.04 min^{-1}$, respectively. However, the first-order rate constant ($k_{d,max}/K_s$) of CODH ($0.25\;min^{-1}\;atm^{-1}$) at low $O_2$ partial pressures was about 3-fold higher than that of the hydrogenase, since the half-saturation constant ($K_s$) of CODH was about half of that of hydrogenase. In broken cells, both enzymes became significantly more sensitive to $O_2$ compared to the unbroken cells, while $k_{d,max}/K_s$ increased 37-fold for hydrogenase and 6.7-fold for CODH. When whole cells were incubated under anaerobic conditions after being exposed to air for 1 h, hydrogenase activity was recovered more than 90% in 2 h suggesting that the deactivation of hydrogenase by $O_2$ was reversible. On the contrary, CODH activity was not recovered once deactivated by $O_2$ and the only way to recover the activity was to synthesize new CODH. This study indicates that $O_2$ sensitivity of $H_2$ production activity of Citrobacter sp. Y19 is an important drawback as in other $H_2-producing$ bactria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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