While the biosynthetic gene cluster encoding the pigmented antibiotic actinorhodin is present in the two closely related bacterial species, Streptomyces lividans and Streptomyces coelicolor, it normally is expressed only in S. coelicolor---generating the deep blue colonies responsible for the S. coelicolor name. However, multiple copies of the afsR2 gene, which activates actinorhodin synthesis, result in the ability of S. lividansto also synthesize large amounts of actinorhodin. Here we report that the phenotypic property that historicially distinguishes these two Streptomycesspecies is determined conditionally by the carbon source used for culture. Whereas growth on glucose repressed actinorhodin production in S. lividans, culture on solid media containing glycerol as the sole carbon source dramatically increased the expression of afsR2 mRNA---leading to extensive actinorhodin synthesis by S. lividansand obliterating its phenotypic distinction from S. coelicolor. afsR2 transcription under these conditions was developmentally regulated, rising sharply at the time of aerial mycelium formation and coinciding temporally with the onset of actinorhodin production. Our results, which identify media-dependent parallel pathways that regulate actinorhodin synthesis in S. lividans, demonstrate carbon source control of actinorhodin production through the regulation of afsR2 mRNA synthesis. The nucleotide sequences of afsR2 revealed two putative important domains; the domain containing direct repeats in the middle and the domain homologous to sigma factor sequence in the C-terminal end. In this work, we constructed various sized afsR2-derivatives and compared the actinorhodin stimulating effects in S. lividans TK21. The experimental data indicate that the domain homologous to sigma factor sequence in the C-terminal end of afsR2 plays a critical role as an antibiotic stimulating function. In addition, we also observed that the single copy integration of afsR2 regulatory gene into S. lividans TK21 chromosome significantly activates antibiotic overproduction.
Methylmercury (MeHg) is a ubiquitous environmental toxicant that can be exposed to humans by ingestion of contaminated food including fish and bread. MeHg has been suggested to exert its toxicity through its high reactivity to thiols, generation of arachidonic acid and reactive oxygen species (ROS), and elevation of intracellular $Ca^{2+}$ levels ([$Ca^{2+}$]$_{i}$). However, the precise mechanism has not been fully defined. Here we show that phosphatidylcholine-specific phospholipase C (PC-PLC) is a critical pathway for MeHg-induced toxicity. MeHg activated the acidic form of sphingomyelinase (A-SMase) and group IV cytosolic phospholipase $A_2$ ($cPLA_2$) downstream of PC-PLC, but these enzymes as well as protein kinase C were not linked to MeHg's toxicity. Furthermore, MeHg produced ROS, which did not cause the toxicity. However, D6O9, an inhibitor of PC-PLC, significantly reversed the toxicity in a time- and dose-dependent manner in MDCK and SH-5YSY cells. Addition of EGTA to culture media resulted in partial decrease of [$Ca^{2+}$]$_{i}$ and partially blocked cell death. In contrast, D609 completely prevented cell death with parallel decreases in diacylglycerol and [$Ca^{2+}$]$_{i}$. Together, our findings indicated that MeHg-induced toxicity was caused by elevation of [$Ca^{2+}$]$_{i}$ through activation of PC-PLC. The toxicity was not attributable to the signaling pathways such as $cPLA_2$, A-SMase, and PKC, or to the generation of ROS.
Rice blast disease, caused by Magnaporthe oryzae, results in an extensive loss of rice productivity. Previously, we identified a novel M. oryzae secreted protein, termed MSP1 which causes cell death and pathogen-associated molecular pattern (PAMP)-triggered immune (PTI) responses in rice. Here, we report the transcriptome profile of MSP1-induced response in rice, which led to the identification of 21,619 genes, among which 4,386 showed significant changes (P < 0.05 and fold change > 2 or < 1/2) in response to exogenous MSP1 treatment. Functional annotation of differentially regulated genes showed that the suppressed genes were deeply associated with photosynthesis, secondary metabolism, lipid synthesis, and protein synthesis, while the induced genes were involved in lipid degradation, protein degradation, and signaling. Moreover, expression of genes encoding receptor-like kinases, MAPKs, WRKYs, hormone signaling proteins and pathogenesis-related (PR) proteins were also induced by MSP1. Mapping these differentially expressed genes onto various pathways revealed critical information about the MSP1-triggered responses, providing new insights into the molecular mechanism and components of MSP1-triggered PTI responses in rice.
Objectives: Few studies have been published regarding the relevance of the admission diagnosis to the smoking cessation rate. We studied smoking cessation rates in relation to admission diagnoses in our inpatient smoking cessation programmes. Methods: This retrospective study included all patients recruited into our inpatient smoking cessation programmes at 2 institutions in Singapore between June 2008 and December 2016. Patients were given individualized intensive counselling and were followed up via phone interviews for up to 6-month to assess their smoking status. Multivariable logistic regression was used to analyse potential associations between admission diagnoses and 6-month abstinence. Results: A total of 7194 patients were included in this study. The mean age was 54.1 years, and 93.2% were male. In total, 1778 patients (24.7%) were abstinent at the 6-month follow-up call. Patients who quit smoking tended to be of Chinese ethnicity, have initiated smoking at a later age, be better educated, and have lower Fagerström Test of Nicotine Dependence scores. After adjusting for these factors, patients with a cardiovascular admission diagnosis had a significantly higher probability of quitting tobacco use than patients with a respiratory or other diagnosis. Conclusions: In patients acutely admitted to the hospital, a diagnosis of cardiovascular disease was associated with the highest quit rate. Smoking cessation interventions need to be incorporated into all cardiovascular disease treatment pathways to leverage the patient's motivation and to improve the quit rate. In addition, patients in groups with lower quit rates may benefit from more intensive programmes to increase the rate of successful cessation.
Considering that the world population is expected to total 9 billion by 2050, it will clearly be necessary to sustain and even accelerate the rate of improvement in crop productivity. In the 21st century, we now face another, perhaps more devastating, environmental threat, namely climate change, which could cause irreversible damage to agricultural ecosystem and loss of production potential. Enhancing intrinsic yield, plant abiotic stress tolerance, and pest and pathogen resistance through agricultural biotechnology will be a critical part of feeding, clothing, and providing energy for the human population, and overcoming climate change. Development and commercialization of genetically engineered crops have significantly contributed to increase of crop yield and farmer's income, decrease of environmental impact associated with herbicide and insecticide, and to reduction of greenhouse gas emissions from this cropping area. Advances in plant genomics, proteomics and system biology have offered an unprecedented opportunities to identify genes, pathways and networks that control agricultural important traits. Because such advances will provide further details and complete understanding of interaction of plant systems and environmental variables, biotechnology is likely to be the most prominent part of the next generation of successful agricultural industry. In this article, we review the prospects for modification of agricultural target traits by genetic engineering, including enhancement of photosynthesis, abiotic stress tolerance, and pest and pathogen resistance associated with such opportunities and challenges under climate change.
In clinical neurology various different electrophysiological tests are widely used to demonstrate the unsuspected malfunctioning in the nervous system and to monitor over time the clinical status of patients. In addition clinical neurologists and neurosurgeons take advantage of the intraoperative monitorings to increase the quality of neurosurgical operations in the posterior fossa, in the spinal cord, or in visual pathways. In the field of movement disorders, elecrophysiolgical tests provide neurologists with making accurate differential diagnoses with useful therapeutic stratergies as well as with investigating the pathophysiological machanisms. By using the electromyographic tests it could be possible for us to evaluate the types of blephalospasm, the extent of hemifacial spasm, the level of myoclonus, and the prime muscles of torticollis etc. Sometimes the myographic guidance may be critical for choosing the exact injecting site of botulinum toxin. These several decades various electroencephalographic and evoked potential tests has been utilized in the electrophysiological laboratories to understand the basic pathophysiology of myoclonus, spasticity and other central motor dysfunctions. It could be one of the breakthroughs in the area of behavorial neurology that the brain function can be mapped by the spontaneous or evoked electrical activities of nervous system since the movement related potentials (MRPs) had been studies for several decades. Various reflex tests such as masseter reflex, blink reflex, click evoked vestibulocollic reflex, facial reflex, stretch reflex, flexor reflex, H-reflex, H-reflex recovery curve, vestibular inhibition of H-reflex, reciprocal inhibition, recurrent or Renshaw reflex, Ib inhibition, cutaneous reflex have been also used to understand normal or abnormal physiology in movement disorders. Polysomnography, posturography and gait studies are also applied in clinical neurology in association with with movement disorders which are useful in deciding the treatment regimen.
Skin is a major thermoregulatory organ in the body controlling homeothermy, a critical function for climate adaptation. We compared genes expressed between tropical- and temperate-adapted cattle to better understand genes involved in climate adaptation and hence thermoregulation. We profiled the skin of representative tropical and temperate cattle using RNA-seq. A total of 214,754,759 reads were generated and assembled into 72,993,478 reads and were mapped to unique regions in the bovine genome. Gene coverage of unique regions of the reference genome showed that of 24,616 genes, only 13,130 genes (53.34%) displayed more than one count per million reads for at least two libraries and were considered suitable for downstream analyses. Our results revealed that of 255 genes expressed differentially, 98 genes were upregulated in tropically-adapted White Fulani (WF; Bos indicus) and 157 genes were down regulated in WF compared to Angus, AG (Bos taurus). Fifteen pathways were identified from the differential gene sets through gene ontology and pathway analyses. These include the significantly enriched melanin metabolic process, proteinaceous extracellular matrix, inflammatory response, defense response, calcium ion binding and response to wounding. Quantitative PCR was used to validate six representative genes which are associated with skin thermoregulation and epithelia dysfunction (mean correlation 0.92; p < 0.001). Our results contribute to identifying genes and understanding molecular mechanisms of skin thermoregulation that may influence strategic genomic selection in cattle to withstand climate adaptation, microbial invasion and mechanical damage.
Vertical distributions of aerosol mass concentrations over Seoul and Gangneung from January to February 2015 were investigated using aerosol Mie-scattering lidars. Vertical mass concentration of aerosol was calculated from the lidar data using KALION's algorithm and quantitatively compared with ground PM10 concentration to obtain objectivity of data. The backward trajectories calculated using HYSPLIT (version 4) were clustered into 5 traces for Seoul and 6 traces for Gangneung, and the observed aerosol vertical mass distribution was analyzed for individual trajectories. Result from the analysis shows that, aerosol concentrations with in the planetary boundary layer were highest when airflows into the measurement points originated in the Shandong Peninsula or the Inner Mongolia. In addition, the difference of aerosol mass concentrations in the two regions below 1 km was about twice as large as that in the long range transport from the Shandong Peninsula compared to the local emission. This result shows that the air quality over Korea related to particulate matters are affected more by aerosol emissions in the upstream source regions and the associated transboundary transports than local emissions. This study also suggests that the use of local aerosol observations is critical for accurate simulations of aerosol-cloud interactions.
Brassinosteroids (BRs) are plant steroid hormones that play essential roles in growth and development. Mutations in BR-signaling pathways cause defective in growth and development like dwarfism, male sterility, abnormal vascular development and photomorphogenesis. Transition from vegetative to reproductive growth is a critical phase change in the development of a flowering plant. In a screen of activation-tagged Arabidopsis, we identified a mutant named abz126 that displayed longer hypocotyls when grown in the dark on MS media containing brassinazole (Brz), an inhibitor of BRs biosynthesis. We have cloned the mutant locus using adapter ligation PCR walking and identified that a single T-DNA had been integrated into the ninth exon of the GIGANTEA (GI) gene, involved in controling flowering time. This insertion resulted in loss-of-function of the GI gene and caused the following phenotypes: long petioles, tall plant height, many rosette leaves and late flowering. RT-PCR assays on abz126 mutant showed that the T-DNA insertion in GIGANTEA led to the loss of mRNA expression of the GI gene. In the hormone dose response assay, abz126 mutant showed: 1) an insensitivity to paclobutrazole (PAC), 2) an altered response with 6-benzylaminopurine (BAP) and 3) insensitive to Brassinolide (BL). Based on these results, we propose that the late flowering and tall phenotypes displayed by the abz126 mutant are caused by a loss-of-function of the GI gene associated with brassinosteroid hormone signaling.
Mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling cascades play critical roles in various cellular events in plants, including stress responses, innate immunity, hormone signaling, and cell specificity. MAPK-mediated stress signaling is also known to negatively regulate nitrogen-fixing symbiotic interactions, but the molecular mechanism of the MAPK signaling cascades underlying the symbiotic nodule development remains largely unknown. We show that the MtMKK5-MtMPK3/6 signaling module negatively regulates the early symbiotic nodule formation, probably upstream of ERN1 (ERF Required for Nodulation 1) and NSP1 (Nod factor Signaling Pathway 1) in Medicago truncatula. The overexpression of MtMKK5 stimulated stress and defense signaling pathways but also reduced nodule formation in M. truncatula roots. Conversely, a MAPK specific inhibitor, U0126, enhanced nodule formation and the expression of an early nodulation marker gene, MtNIN. We found that MtMKK5 directly activates MtMPK3/6 by phosphorylating the TEY motif within the activation loop and that the MtMPK3/6 proteins physically interact with the early nodulation-related transcription factors ERN1 and NSP1. These data suggest that the stress signaling-mediated MtMKK5/MtMPK3/6 module suppresses symbiotic nodule development via the action of early nodulation transcription factors.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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