Norovirus (NoV) is a major cause of food poisoning outbreaks in Korea. Most NoV outbreaks originate from environmental contamination, but bivalves such as oysters are also important vectors. Oyster Crassostrea gigas contamination by NoV has been reported in Korea, but no quantitative analyses of NoV have been performed. We investigated the NoV concentration in 21 oyster samples from a Korean commercial oyster-growing area with confirmed fecal contamination from January to December 2012, using real-time reverse transcription-polymerase chain reaction. Additionally, we assessed the NoV concentration after heating to investigate the effects of heat treatment on NoV-infected oysters. In NoV-positive samples, the cycle threshold (Ct) values were 37.43-39.41 and 36.77-39.30, while viral concentrations were $8.97{\times}10^2-2.24{\times}10^2$ and $3.05{\times}10^2-7.47{\times}10^1$ copies/g for genogroups I and II, respectively. After heat treatment, NoV genogroup I decreased by 83.4%, 88.0%, 89.4% and 100% at $60^{\circ}C$, $68^{\circ}C$, $70^{\circ}C$, and $100^{\circ}C$, respectively, for 15 min, while genogroup II respectively decreased by 67.3%, 76.3%, 80.1%, and 89.8% under the same conditions.
Occurrence and prevalence of Marteilioides chungmueasis have been reported in several waters around Tongyeong but no report has been made for Pukman bay. Therefore, we investigated that the prevalence and infection intensities in Pukman Bay at the inside and the outside areas which are hydrographically divided by tidal current. Furthermore, various environmental parameters were investigated in order to elucidate effective parameter for parasitic infection. Infection rates of Marteilioides chungmuensis in adult oysters were ranged 3.3-20.0% at the inside area during September 2002 through January 2003, and 3.3-30.9% at the outside area during August 2002 through January 2003. External manifestation of infected oyster consisted of abnormal egg masses with nodular appearance in the soft tissue. Histopathological symptoms included massive hemocytic infiltration within or around the follicle wall and atrophic epithelium of digestive diverticula. For the environmental parameters, comparative study made differences between two side of the Bay during the infection period: inside > outside for SS while inside < outside for chlorophyll-a. A positive relationship was observed between chlorophyll-a and infection period, which might indicate the difference in food availability between two areas. The prevalence of ovarian parasite Marteilioides chungmuensis, therefore, was highly associated with food availability. Pearson's correlation analysis was made between environmental parameters and infection prevalence. Significance was observed in water temperature (p < 0.05), suspended solids (p < 0.01) and chlorophyll-a (p < 0.05). A principle component analysis showed that infection of the ovarian parasite, Marteilioides chungmuensis, exhibited effects of seasonality (component I = 55.2%) and chemical/physical environmental factors (component II = 24.4%). These results clearly indicate that the infection of ovarian parasite, M. chungmuensis in the Pacific oyster Crassostrea gigas is closely associated with seasonality and food availability.
굴 미수정란의 동결보존에 적합한 동해방지제의 종류, 농도 및 침투 시간을 구명하기 위하여 4가지 동해방지제 (DMSO, EG, methanol, PEG) 를 대상으로 수정률, 부화율 및 형태 이상률을 조사하였다. 동해방지제의 농도 및 침지시간은 각각 5, 10, 15, 20%와 10, 20, 30, 40분이었다. 침지 후 미수정란은 정상 정자와 수정되었고, 수정률, 부화율 및 형태 이상률은 동해방지제의 종류와 농도 및 침지시간에 영향을 받았다. 동해방지제의 농도와 침지시간의 증가에 따라 수정률과 부화율은 낮아졌고, 대부분의 동해방지제에서 5-10% 농도와 10-20분의 짧은 침지시간에서 좋은 결과를 보였다. 수정률과 부화율을 근거로 굴 미수정란에 가장 적합한 동해방지제는 DMSO였으며, 처리 농도와 침지 시간은 각각 5%와 10-20분이었다.
The efficacy of depuration following growing area translocation for the defecation of norovirus was evaluated under experimental conditions using oysters Crassostrea gigas previously subjected to bioaccumulation of this virus at a waste treatment plant discharge site. Three trials were assayed in an open experimental system with a commercial oyster farm located in a shellfish growing area approved by the Korean Shellfish Sanitation Program. Real-time reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to quantify viruses in the digestive glands of oysters. The final viral loads in oysters after 12 days remained under the detection limit (10 copies/g digestive gland) of the real-time RT-PCR. This reduction trend showed two-phase removal kinetics, with an initial slow reduction or slight increase in viruses during the first 2 days of depuration and subsequent stabilization with 0.12 to 2.64 log unit norovirus copies/g digestive gland per 2 days of depuration for the remaining time.
Son, Pal Won;Chung, Jae Seung;Kim, Jin Hee;Kim, Sung Han;Chung, Ee-Yung
한국발생생물학회지:발생과생식
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제18권3호
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pp.179-186
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2014
Characteristics of the developmental stages of spermatids during spermiogenesis and phylogenetic classicfication of the species using sperm ultrastructures in male Crassostrea ariakensis were investigated by transmission electron microscope observations. The morphology of the spermatozoon of this species has a primitive type and is similar to those of Ostreidae. Ultrastructures of mature sperms are composed of broad, modified cap-shaped acrosomal vesicle and an axial rod in subacrosomal materials on an oval nucleus, four spherical mitochondria in the sperm midpiece, and satellite fibres which appear near the distal centriole. The axoneme of the sperm tail shows a 9+2 structure. Accordingly, the ultrastructural characteristics of mature sperm of C. ariakensis resemble to those of other investigated ostreids in Ostreidae in the subclass Pteriomorphia. In this study, particularly, two transverse bands (stripes) appear at the anterior region of the acrosomal vesicle of this species, unlike two or three transverse bands (stripes) in C. gigas. It is assumed that differences in this acrosomal substructure are associated with the inability of fertilization between the genus Crassostrea and other genus species in Ostreidae. Therefore, we can use sperm ultrastructures and morphologies in the resolution of taxonomic relationships within the Ostreidae in the subclass Pteriomorphia. These spermatozoa, which contain several ultrastructures such as acrosomal vesicle, an axial rod in the sperm head part and four mitochondria and satellite fibres in the sperm midpiece, belong to the family Ostreidae in the subclass Pteriomorphia.
Noroviruses (NoV) are known to cause acute epidemic gastroenteritis worldwide. Outbreak strains are predominantly genogroup I (GI) and genogroup II (GII) in oysters Crassostrea gigas. We investigated the changes in concentration of male specific coliphage (MSC) and NoV under heat treatment of the naturally contaminated oyster, Crassostrea gigas. After heat treatment for 5 min in $85^{\circ}C$, no viable MSC was detected. The concentrations of GI and GII NoV decreased by 1.65 log and 2.25 log, respectively, following heat treatment for 5 min at $100^{\circ}C$. Moreover, both GI and GII NoV were completely deactivated by heat treatment for 10 min at $100^{\circ}C$. Therefore, in order to reduce the risk of norovirus infection from contaminated oysters, immersion in boiling water for at least 10 min is recommended.
To develop a value-added product from individually quick-frozen oyster Crassostrea gigas extract (IQFOE), we prepared two types of oyster sauce (OS): bottled OS (BOS) and retort pouched OS (ROS). We investigated processing conditions, quality metrics and flavor compounds in each type of sauce. We found that the most appropriate base formular for both BOS and ROS consisted of 40.0% IQFOE (Brix $30^{\circ}$), 15.0% sugar, 6.0% salt, 4.0% monosodium glutamate, 4.0% soy sauce, 3.5% starch, 3.0% yeast extract, 3.5% wheat flour and 21.0% water. The crude protein, salinity and amino-nitrogen contents of the BOS and ROS were 8.2 and 8.3%, 9.3 and 9.2%, and 539.2 and 535.2 mg/100 g, respectively. In commercial oyster sauces (COS), these values were 4.7-6.5%, 9.7-12.0%, and 244.7-504.2 mg/100 g, respectively. The total free amino acids content of ROS was 7,346.9 mg/100 g, and the main free amino acids were glutamic acid, taurine, proline, glycine and alanine. The inosinic monophosphate (IMP) content of the ROS was 131.6 mg/100 g, and the primary inorganic ions were Na, K, S and P. The present BOS and ROS have favorable organoleptic qualities and storage stability compared with COS, and are suitable for commercialization as high-flavor seasoning sauces.
To produce cupped oyster sprat consistently, we investigated the efficiency of nine settlement substrates using selective breeding of Pacific oyster Crassostrea gigas, with the goal of popularizing off-bottom culture on the west coast of Korea. We also compared the growth and survival of selectively bred sprat (diploid) with triploid sprat from an off-bottom culture system. Considering, the attachment rate and detachment efficiency, producing cupped oyster in a polypropylene gunny bag proved to be the most effective method. There were no differences in shell growth or total weight between the diploids from selective breeding and triploids from off-bottom culture for 5 months. However, the survival rate was 8 times higher in the diploids than the triploids. Transplanting sprat from selective breeding is one way to restore oyster farms and nurture off-bottom culture along the west coast.
Macrobenthic biodiversity in the rocky intertidal areas of the Tae-an region, Republic of Korea, has decreased since the Hebei Spirit oil spill in December 2007. We aimed to investigate ecological roles of Pacific oyster (Crassostrea gigas) because recruitment and growth of oysters are critical to the recovery of damaged rocky shore ecosystem. We surveyed two sites monthly: natural rocky substrate and farming substrate, from July 2012 to January 2013 to identify and compare the changes in macrobenthic fauna. The abundance of young oysters was higher at the natural site. On the other hand, the mean height of oyster on the farming substrate was more than twice as great. The abundance of oyster at the natural site increased until October and then continuously decreased until end of study period. However, the abundance of oyster at the farming site constantly decreased from the beginning of study period. These different growth patterns might be attributable to spatial competition between oyster and a barnacle species (Balanus albicostatus) and environmental factors. At the natural site, physical stress factors including dramatic temperature changes and desiccation a few of the major factors limiting growth during aerial exposure. In addition, motile macrobenthos could be detrimental to oysters because they interrupt filter-feeding activities and hence hamper the growth of oysters. We show the higher recruitment of oysters at the natural site and healthy growth in the farming substrate are due to complicated differences in physical and biological stress factors.
한국산 참굴의 유전적 특성을 조사하기 위하여 한국의 지역별 참굴을 대상으로 mtDNA 제한효소 절편분석과 클로닝을 수행하였다. 지역별로 각각 20개체의 mtDNA에 대하여 8가지 제한효소를 사용하여 DNA 절편양상을 분석한 결과 서해안산 참굴에서는 개체간 차이가 없는 단일 양상이었으며 남해안산의 경우는 두 가지 양상을 보였으며 차이는 HindIII 절단양상에서만 나타났다. 그 중 소수 개체들에서 나타난 양상은 서해안산 개체들에서의 양상과 동일하여 남해안에 서해안산 참굴이 유입되어 혼재하는 것으로 추정되었다. 한국산 참굴의 mtDNA를 대장균 E. coli HB101에서 클로닝하여 유전적 분석을 용이하도록 하였다. 전체 mtDNA를 제한효소를 사용하여 세부분으로 나누어 pUC19 유전자운반체에 클로닝하였다. 클로닝된 재조합 DNA를 제한효소들로 절단하여 한국산 참굴 mtDNA의 제한효소지도를 작성하였다. 남해안산과 서해안산 참굴 mtDNA에서 HindIII 적단 양상이 다르게 나타남을 확인하였고 이는 남해안산이나 서해안산에서 염기치환의 돌연변이에 의한 것으로 사료되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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