가토 신장 피질에서 Percoll density gradient방법으로 분리한 basolateral membrane vesicle (BLMV)에서 rapid filtration technique을 이용하여 succinate의 이동 특성을 관찰하였다. $Na^+$은 succinate의 이동을 증가시켜 "overshoot"현상을 보였으며 이러한 효과는 $K^+,{\;}Li^+,{\;}Rb^+,{\;}choline$과 같은 다른 양이온들에 의해 나타나지 않았다. $Na^+$농도변화에 따른 succinate의 이동율은 sigmoid모양을 보였고, $Na^+$에 대한 Hill coefficient는 2.0이었다. soccinate의 이동은 vesicle 내부가 음전압일 때 더욱 증가되었다. BLMV에서 succinate이동은 용액내 pH변화에 따라 영향을 받았으나 brush border membrane vesicle (BBMV)에서는 영향을 받지 않았다. 동력학적 분석결과 succinate의 Km값은 $15.5{\pm}0.94{\;}{\mu}M$이었고 Vmax는 $16.22{\pm}0.25{\;}n{\;}mole/mg{\;}protein/min$이었다. succinate의 이동은 $4{\sim}5$탄소를 가진 dicarboxylate들에 의해 강력하게 억제되었으나 monocarboxylate나 다른 유기음이온들에 의해 영향을 적게 받거나 받지 않았다. succinate의 이동은 DIDS, SITS, furosemide와 같은 음이온 이동 억제제와 harmaline과 같은 $Na^+$ 이동 억제제에 의해 억제되었다. 이들 결과들은 BLMV에서 succinate는 $Na^+$에 의존하여 이동하며 다른 Krebs cycle중간 산물들과 동일한 운반기전을 이용함을 가르킨다. 또한 BLMV에서 succinate의 이동은 그 기질특이성에 있어서 다른 연구자에 의해 보고된 BBMV에서 이동특성과 유사함을 보였다.
Park, Sung-Min;Park, Jong-Sun;Kim, Jae-Han;Baek, Jin-Hyun;Yoon, Tae-Gyun;Lee, Do-Keun;Ryu, Won-Hyang;Chung, In-Kyo;Sohn, Uy Dong;Jang, Hye-Ock;Yun, Il
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제17권4호
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pp.253-257
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2013
This study examined the mechanism of action of a local anesthetic, lidocaine HCl. Energy transfer between the surface fluorescent probe, 1-anilinonaphthalene-8-sulfonic acid, and the hydrophobic fluorescent probe, 1,3-di(1-pyrenyl) propane, was used to determine the effect of lidocaine HCl on the thickness (D) of the synaptosomal plasma membrane vesicles (SPMV) isolated from the bovine cerebral cortex, and liposomes of the total lipids (SPMVTL) and phospholipids (SPMVPL) extracted from the SPMV. The thickness (D) of the intact SPMV, SPMVTL and SPMVPL were $1.044{\pm}0.008$, $0.914{\pm}0.005$ and $0.890{\pm}0.003$ (arbitrary units, n=5) at $37^{\circ}C$ (pH 7.4), respectively. Lidocaine HCl decreased the thickness of the neuronal and model membrane lipid bilayers in a dose-dependent manner with a significant decrease in the thickness, even at 0.1 mM. The decreasing effect of lidocaine HCl on the membrane thickness might be responsible for some, but not all of its anesthetic action.
Objective: The present study was aimed at determining the effect of physical training on glutamate transporter activity in a middle cerebral artery occlusion (MCAO)-induced ischemia injury rat model. Design: Randomized controlled trial. Methods: In this study, we randomly divided them into three groups. Group I included non-occlusion sham controls (n=10), Group II included non-physical training after MCAO (n=10), and Group III included rats that were subjected to physical training after MCAO (n=10). Rats in the physical training group underwent treadmill training, which began at 24 h after MCAO and continued for 14 consecutive days. The training intensity was gradually increased from 5 m/min on the first day to 12 m/min on day 3, and it was maintained until day 14. Focal cerebral ischemia was examined in adult male Sprague-Dawley rats by using the MCAO model. We determined the functional outcomes for each rat on days 1, 7, and 14. Glutamate transporter-1 (GLT-1) activity in the cortex of rats from all three groups was examined at the end of the experiment. Results: Out result show that MCAO rats exhibited severe neurological deficits on the 1 day, and there was no statistically significant in each groups. We observed that the functional outcomes were improved at days 7 and 14 after middle cerebral artery occlusion, and GLT-1 activity was increased in the physical training group (p<0.05). Conclusions: These results indicated that physical training after focal cerebral ischemia exerts neuroprotective effects against ischemic brain injury by improving motor performance and increasing the levels of GLT-1 activity.
The purpose of this study was to compare the response of adjacent tissue and new bone formation after implantation by different methods of subperiosteal using using Proplast I and II in rabbit mandible. Microstructure of Proplast I and II was observed by scanning electron microscope. And the implantation procedure was carried out by dividing into tow groups, A and B. a group consisted of subperiosteal graft on the cortex, and the other B group was made up onlay graft following artificial decortication in the madibular body of rabbit. The experimental animals were sacrificed on the 1st, 2nd, 4th and 8th week after grafting for macroscopic and histopathologic examination. The samples extracted at the 6th postgrafting week were also used for biometric test. The result ere as follows : 1. By scanning electron microscopic observation, pore size was $50{\sim}180{\mu}m$ in the Proplast I and $100{\sim}220{\mu}m$ in Proplast II. 2. Macroscopically, infection of the graft site, deformation and displacement of the implanted materials were not observed in all experimental groups. 3. In the tissue response, infiltration of inflammatory cells and multinucleated giant cells were observed from the 2nd to the 8th week in Proplast I. Inflammatory cells decreased in number from the 2nd week in Proplast II suggesting that Proplast II is better than Proplast I. 4. Bone formation was not observed until the 8th week in the group A, but new bone formation from the surrounding graft bed and the periostium was appeared from the 4th week in the group B. 5. The maximum mean values of shear stress mere serially $65.5gf/mm^2$ in Proplast II of group B, $32.9gf/mm^2$ in Proplast I of group B, $17.0gf/mm^2$ in Proplast II of group A, and $15.7gf/mm^2$ in Proplast I. of group A.
기능적 자기공명영상기법(functional MRI: fMRI)을 통해서 인간의 뇌에 대한 연구가 지난 수년 동안 활발하게 진행되어 왔다. 이러한 기능적 자기공명영상기법의 파라다임에는 Block-diagram 방법과 최근에 개발되어 이용되는 Event-related 방법이 있다. Block-diagram 방법은 여러 블록으로 구성하여 피험자들에게 자극을 인가하여 뇌의 반응신호들을 통해 뇌의 기능을 설명해 주는 데, 이러한 뇌의 기능이 얼굴인식과 관련하여 여러 조건을 포함한 자극인 경우 뇌의 인지 시스템을 설명을 해 주는 데 한계가 있다. 따라서 Event-related 방법을 이용하여 얼굴인식에 관여하는 뇌의 인지시스템에 관련된 부분을 설명하고, 또한 그 영역에서 인종구별과 같은 의식적으로는 관찰되지 않지만 무의식적으로 관찰되는 뇌의 생리적인 현상을 보여주고자 한다. 본 연구는 Event-related 방법에 대한 이해와 얼굴인식에 적용되는 파라다임 알고리즘을 개발하여 피험자들을 통해 해당조건들은 (유명한국인, 무명한국인, 유명 백인 미국인, 무명 백인미국인) 각 Event로 구성하여 한 블록인 Event-related 파라다임으로 변경하여 얼굴을 인식하는데 주로 담당하는 영역인, Ventral occipital-temporal cortex 내의 fusiform face area(FFA)를 확인하고 그 영역에서 의식적으로 반응하는 뇌의 활동과 무의식적으로 반응하는 뇌의 활동을 생리학적 또는 심리학적으로 해석하는데 용이하도록 여러 파라미터들 (즉 Event 간격 , Event의 수, Null Event, TR 간격 등)을 최적화하였다. 자기공명영상기법을 이용한 이러한 뇌 기능 연구는 의학적인 응용연구로서 신경 과학분야와 정신의학적인 측면에서 널리 이용될 것으로 보이며 더 나아가 심리학적측면의 기초 연구로서 발전의 토대가 될 것으로 사료된다.다. 불가능하여 차나무 재배지 부적합한 것으로 나타났다.35\%$일 경우 알칼리-실리카 반응에 의한 팽창을 가장 효과적으로 방지할 수 있는 것으로 판단된다.는 accessory 개발과 보급이 중요하다.에 대하여 500MU 조사 후 방사선량의 측정결과 Field size의 영향은 거의 존재하지 않았으며, beam off 후 $1{\sim}2$분 뒤 측정 시작 시점에서 대략 $1{\mu}Sv/hr$를 나타냈으며, 반감기는 약 $3{\sim}4$분인 것으로 측정되었다. Primus 15MV의 경우 S병원에서 측정을 수행하였으며, $25{\times}25cm^2$ Field size에 대하여 500MU 조사 뒤 방사선량을 측정한 결과, beam off후 $1{\sim}2$분 뒤 측정시점에서 대략 $3.26{\mu}Sv/hr$를 나타냈으며 10MV X선보다 대략 3.3배 큰 값을 나타내었다. 결과 : 일일 치료환자가 $20{\sim}50$명이고, 환자 1인당 Wedge filter의 교체작업이 $1{\sim}2$회일 때 10MV의 경우 연간선량이 $0.08{\sim}0.4mSv$로 평가되었으며, 15MV의 경우 $0.27{\sim}1.36mSv$로 평가되어 작업종사자의 연간 허용선량인 20mSv에 비해 안전한 것으로 평가되었다.서 정상조직이 적게 조사되었다. 결과 : 기존의 ICRU계획은 그 효과 및 안전성이 입증되었음에도 불구하고 CT를 이용한 CTV계획 등을 적용 한다면 잔류종양이 적은 경우 정상조직에 대한 조사를 줄이면서 잔류종양에 목표선량을 조사할 수 있을 것이다. 다만 잔류종양이 큰 경우는 정상조직에 대한 조사선량을 줄이기 위한 효과적 치료계획에
Testosterone에 대한 방사면역측정법(radioimmunoassay, RIA) 검사는 남성의 사춘기 지연 및 androgen 결핍 시, 여성과 어린이의 경우 androgen 과잉(다모증) 및 내분비 치료 모니터링 시 시행된다. 현재 본원 핵의학 검체검사실에서는 testosterone RIA 검사를 A사 kit로 사용하고 있지만, 최근 RIA kit의 생산이 중단되거나 공급에 어려움이 발생하여, 다른 회사에서 판매되고 있는 testosterone RIA kit에 대한 유효성 평가 실험을 실시하여 비교하였다. 2021년 10월 서울대학교병원 본원에 의뢰된 검체를 대상으로 실시하였으며, 정밀도, 민감도, 회수율, 직선성, 상관성을 분석하여 비교 평가하였다. 실험 방법은 각 회사에서 제공하는 testosterone RIA kit의 매뉴얼을 준수하였으며, 검체의 양, incubation, 세척(washing) 방법에서 차이가 있었다. 실험 결과 민감도, 직선성, 상관성 실험의 경우 모두 우수한 결과를 나타내었지만, 정밀도와 회수율의 경우 허용범위를 벗어났는데, 이는 낮은 농도의 검체로 실험을 진행하여 벗어난 것으로 사료된다. 이 실험을 바탕으로 각 병원에서 사용 중인 kit가 생산이 중단되거나 공급에 문제가 생길 경우 상호 호환이 가능할 것으로 생각되나, 본 실험에서 고농도의 검체로 실험을 진행하지 못했다는 아쉬움이 있다. 따라서 추후 검사실별로 다양한 농도와 고농도의 검체를 획득하여 추가적으로 실험을 진행해야 할 것으로 사료된다.
The water extract of Dohongsamul-Tang(DHSMT) has been traditionally used to stroke and brain injuries in Oriental Medicine. The present study was designed to investigate the effects of DHSMT on the gene expression profile of cerebral infarction by cDNA microarray in photothrombotic ischemia mouse model. Photothrombotic ischemia was induced in stereotactically held male BALB/c mice using rose bengal and cold light. MRI was performed 24 hours after inducing photothrombosis using 1.5 T MRI and 47 mm surface coil to obtain T2-weighted, and contrast-enhanced images. After MRI test, animal was sacrificed and the brain sections were stained for hematoxylin and eosin and immunohistochemistry. MRI and histological analysis revealed that lesion of thrombotic ischemia was well induced in the cortex with the evidence of biological courses of infarction. The target area of thrombotic infarction was 1 mm anterior to bregma and 3 mm lateral to midline with 2 mm in diameter, which were decreased by administration of DHSMT. To assess gene expression pattern of cerebral infarction, mRNA was isolated and reacted with microarray chip(Agilant's DNA Microarray 44K). Scatter and MA plot analysis were performed to clustering of each functional genes. M value [M=log2(R/G), A={log2(R ${\times}$ G)}/2] was between -0.5 and +0.5 with 40% difference. After pretreatment with DHSMT, the expression levels of mRNA of many genes involved in various signaling pathway such as apoptosis, cell cycle, cell proliferation, response to oxidative stress, immune response, angiogenesis, and inflammatory cytokine were markedly inhibited in photothrombotic ischemia lesion compared to the control group. These results suggest that DHSMT prevent ischemic death of brain on photothrombotic ischemia model of mice through modulation of gene expression at the transcriptional level.
이 실험에서 우리는 더덕의 기내 소비대근형성에 의한 대량생산을 처음으로 보고하였다. 첫번째로, 다경지유도를 위한 싸이토키닌의 효과를 실험하였다. 2.0 $mg{\cdot}L^{-1}$ kinetin 처리는 줄기유도비율(19.1%)뿐만 아니라 줄기의 길이신장(17.1 mm)이 가장 높았다. 두번째로, 절간절편에서 유도되는 기내 소비대근형성에서 탄소급원의 효과를 연구하였다. 비대근의 직경은 1/2 MS배지에 145.9 mM Suc첨가시 증가하였다. 조직학적 분석은 비대근 내에 전분입자가 포함된 유세포의 수가 증가하였다. 게다가 세근은 비대근과 달리 관다발이 피층내에 흩어져 존재하였다. 세번째로, 소비대근의 보전과 발아 촉진을 위하여 $4^{\circ}C$ 저온저장고에 9달 동안 저장 후 이것을 인공상토로 이식한 결과 생존율 75%, 발아율 70%라는 결과를 보였다. 이러한 결과 더덕의 대량 번식은 기내 소비대근 형성에 의해 얻을 수 있고 이러한 방법은 우수클론의 번식 뿐만 아니라 더덕 유전자원 보존을 위해 제공될 수 있을 것으로 사료된다.
Jo, Jae-Hoon;Kim, Seung-Jun;Yeon, Jong-Pil;Oh, Moon-Ju;Seo, Hye-Myung;Hwang, Seung-Yong;Kim, Sang-Kyum;Kim, Bong-Hee
Molecular & Cellular Toxicology
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제3권4호
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pp.282-291
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2007
Although the etiology of schizophrenia is known to be linked with the disturbance of glutamatergic and dopaminergic neurotransmission, little is known about the relationship between gene expression and the disease process. To identify genes related to abnormalities in glutamatergic and dopaminergic function, we investigated the effects of olanzapine in the changes of mRNA levels in the animal model of schizophrenia, using a high-density DNA microarray. Olanzapine (3.0 mg/kg, i.p.) significantly reduced hyperlocomotive activities, which was induced by MK-801 (1.0 mg/kg, i.p.). We identified that the expression of 719 genes were significantly altered more than two folds in the prefrontal cortex of the rats treated with MK-801. We selected 15 genes out of them by the changes of the expression pattern in the treatment of Olanzapine and/or MK801 for the further confirmation in RT-PCR. The administration of MK-801 increased the expression of 7 genes (NOS3, Hspb1, Hspa1a, CRH, Serpine1, Igfbp6, Snf1lk) and decreased the expression of 1 gene (Aldh1a2), which was attenuated by olanzapine. One gene (Prss12) was up-regulated after olanzapine treatment although it did not show the significant changes after MK-801 treatment. These results showed that antipsychotic drug, such as olanzapine, may alter the gene expression patterns, which were accompanied by MK-801-induced psychosis. Our results also provide us high-density DNA microarray technology could be potential approaches to find the candidate molecules for the therapeutics and also for the early diagnosis of psychiatric diseases.
Various RNA-binding proteins (RBPs) are key components in RNA metabolism and contribute to several neurodevelopmental disorders. To date, only a few of such RBPs have been characterized for their roles in neocortex development. Here, we show that the RBP, Rbms1, is required for radial migration, polarization and differentiation of neuronal progenitors to neurons in the neocortex development. Rbms1 expression is highest in the early development in the developing cortex, with its expression gradually diminishing from embryonic day 13.5 (E13.5) to postnatal day 0 (P0). From in utero electroporation (IUE) experiments when Rbms1 levels are knocked down in neuronal progenitors, their transition from multipolar to bipolar state is delayed and this is accompanied by a delay in radial migration of these cells. Reduced Rbms1 levels in vivo also reduces differentiation as evidenced by a decrease in levels of several differentiation markers, meanwhile having no significant effects on proliferation and cell cycle rates of these cells. As an RNA binding protein, we profiled the RNA binders of Rbms1 by a cross-linked-RIP sequencing assay, followed by quantitative real-time polymerase chain reaction verification and showed that Rbms1 binds and stabilizes the mRNA for Efr3a, a signaling adapter protein. We also demonstrate that ectopic Efr3a can recover the cells from the migration defects due to loss of Rbms1, both in vivo and in vitro migration assays with cultured cells. These imply that one of the functions of Rbms1 involves the stabilization of Efr3a RNA message, required for migration and maturation of neuronal progenitors in radial migration in the developing neocortex.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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