To determine the characteristics of heterotrophic bacterial community in estuarine ecosystem, water and sediment samples were taden from Naktong estuary. All isolates were compared with 73 characters and described by cluster analysis. With same characters, 30 reference strains were able to divide into approximate species level at 80% similarity (S value). Diversity indices ($H^{1}$) of sediment column isolates were higher than water column isolates. The bacterial community commonly appeared in water and sediment column was reduced with going to downstream. Tolerance indices for temperature (Pt) and salinity (Ps) were also higher in sediment isolates than in water isolates. The bacterial community in sediment column is believed to be composed with diverse populations compared to water column and maintains its stability against various environmental changes with high physiological tolerances.
To understand the ecological function of heterotrophic bacterial community in water column of large freshwater lakes in the permafrost zone, we investigated the structure and function of bacterial community in Lake Khuvsgul, Mongolia. Species composition of overall bacterial community was analyzed by denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) of 16S rRNA gene fragments, and bacteria that can be cultured at 10oC were isolated and characterized. Based on the depth profile of environmental parameters, thermocline and chemocline were recognized at the 5~10 m zone of the water column. The stratified DGGE profile indicated that the discontinuity of water properties might influence the structure of bacterial community: band profiles in the 0~5 m zone were diverse with large change by depth, but the profile was relatively stable at the $\geq$10 m zone, with predominance of the band identified as Acidovorax facilis. Bacterial cultures were screened for protease, cellulase, amylase and lipase activity, and 23 isolates were selected for high activity of the hydrolytic enzymes. The isolates were identified based on their 16S rRNA gene sequences. In the surface water (zero meter depth), Acidovorax defluvii and Sphingobacterium faecium with high cellulase activity were present. Flavobacterium succinicans, Mycoplana bullata and A. facilis were stably predominant isolates at 2 m, 5 m, and $\geq$10 m depths, respectively. F. succinicans isolates showed high protease activity while M. bullata isolates showed moderate levels of protease and celluase activity. A. facilis isolates showed either cellulase or lipase activity, exclusively to each other. According to the profile of growth rates of the isolates in the temperature range of $0\sim42^{\circ}C$, the surface-zone (0~5 m) isolates were facultative psychrophiles while isolates from $\geq$10 m depth were typical mesophiles. This stratification is believed to be due to stratified availability of organic materials to the bacterial decomposers. In the water column below the chemoline, the environment is extremely oligotrophic so that the trait of rapid growth in low temperature might not be demanded by deep-lake decomposers. The stratified distribution of community composition and decomposer activity in Lake Khuvsgul implies that ecological functions of bacterial community in lakes of cold region are sharply divided by water column stratification.
Immunoglobulin G was purified by 40% $(NH_4)_2SO_4$ precipitation, DEAE-Sephadex, Sephadex G-150 column chromatographies from rabbit antiserum against V. vulnificus ATCC 27562 O antigen and used for immunological test for V. vulnificus isolates. The profiles of cell lysate total protein and outer membrane protein from the isolates were analyzed by SDS-PAGE and densitometry. The overall profiles in all isolates were similar. Distict protein band was observed in comparison with V. parahaemolyticus. Western Blotting with rabbit Immunoglobulin G against cell lysates and OMP of V. vulnificus isolates showed a strong antigenic response to antigen 66, 60, 54, 48, 33 and 26 kDa which were common to all strains examined. The 26 kDa antigen showed V. vulnificus specific antigen in comparison with Vibrio parahaemolyticus. A sandwich enzyme-linked immunosorbent assay was developed by using rat anti-V. vulnificus ATCC 27562 polyclonal antibodies as capture antibody, a purified rabbit IgG antibody as detector antibody, and goat anti-rabbit IgG-alkaline phosphatase conjugate as developer antibody. When four V. vulnificus isolates were tested, the reactivity showed from 50 to 70% by sandwich ELISA.
Fifty-two nematode predatory fungi were isolated from 37 soil samples collected from eight provinces in Korea. Isolated fungi were tested their predacity against Rhabditis sp. and Meloidogyne incognita in petri dish, and against M. incognita in greenhouse pot experiments. Fifty isolates had trapping organ of adhesive networks and two isolates had adhesive column or adhesive knob. In petri dish experiments, 5 1 isolates against Rhubditis sp. and 26 isolates against M. incognita showed over 91 % of predacity; in greenhouse experiments, however, only three isolates showed over 81% of predacity. These results imply that the results from the laboratory experiments are not consistent with those from the greenhouse experiments. Therefore, to select a promising biocontrol predatory fungi for plant-parasitic nematodes, the screening experiment should be conducted in conditions close to nature.
Kim Young-Soo;Lee Jong-Soo;Jang Joon-Ho;Kim Keun-Yong;Kim Chang-Hoon
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.8
no.2
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pp.76-82
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2005
We analyzed the paralytic shellfish poisoning (PSP) toxins of the toxic marine dinoflagellate Alexandrium tamarense collected from Dadaepo and Gaduck-do in Busan and from Sujeong-ri in Jinhae Bay, Korea, in April 2003. We also analyzed the PSP toxin of mussels (Mytilus galloprovincialis) and oysters (Crassostrea gigas) collected around Busan and Jinhae Bay. PSP toxin analyses were conducted by high performance liquid chromatography (HPLC). Fifteen cultured A. tamarense isolates contained 2.78 to 57.47 fmol/cell, with nearly identical toxin profiles: major components C2, GTX4; minor components C1, GTX1, NEO; and trace components GTX2, GTX3, STX. PSP toxin contents were 0 to $492\;\mu{g}$ STXeq/100 g in mussels and 0 to $48\;\mu{g}$ STXeq/100 g in oysters. Mussels at Gijang and Sujeong-ri contained the most PSP toxin contents ($492\;\mu{g}\;STXeq/100\;g\;and\;252\;\mu{g}\;STXeq/100\;g,\;respectively$), exceeding the quarantine level ($80\;\mu{g}$ STXeq/100 g). Their dominant toxin components were C2, C1, GTX2, and GTX3; the minor components GTX1, GTX4, GTX5, and NEO were sporadically detected. Phytoplankton contained 0.774 fmol/L seawater and 1.228 fmol/L seawater at Gijang and Sujeong-ri in April. At that time, Alexandrium cells were present in the water column at Gijang at 2,577 cells/mL and at Sujeong-ri at 6,750 cells/mL. Overall, we found the high and similar PSP toxin contents in AZexandrium isolates and mussels, and a correlation between occurrence of toxic Alexandrium cells in the water column and mussel intoxification. High densities of toxic Alexandrium cells in the water column immediately preceded shellfish intoxification at Gijang and Sujeong-ri in April.
In the screening of actinomycetes culture filtrate for inhibitor of adenosine deaminase, a novel inhibitor was found in a cultured broth of strain J-144K. The optimum conditions for the adenosine deaminase inhibitor production from the isolated strain J-144K were evaluated. This strain showed the maximum yield of adenosine deaminase inhibitor when grown at pH 7.0 and 30$\circ$C for 60 hours in the medium of 1.0% dextrose, 0.5% yeast extract, 0.5% peptone and 0.1% KH$_{2}$PO$_{4}$ under the aerobic condition. Through the activated charcoal extraction, methanol fractionation, Dowex 50 H$^{+}$ X-8 ion exchange column chromatography, Dowex CI$^{-}$ X-8 ion exchange column chromatography, and Sephadex G-15 gel filtration procedures, this inhibitor was purified with three materials.
Han, Gui Hwan;Bong, Ki Moon;Kim, Jong Min;Kim, Pyoung Il;Kim, Si Wouk
KSBB Journal
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v.29
no.3
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pp.131-138
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2014
In this study, we isolated two novel chitinase producing bacterial strains from yellow loess samples collected from Jullanamdo province. The chitinase producing bacteria were isolated based on the zone size of clearance in the chitin agar plates. Both of them were gram positive, rod ($2{\sim}3{\times}0.3{\sim}0.4{\mu}m$), spore-forming, and motility positive. They were facultative anaerobic, catalase positive and hydrolyzed starch, gelatin, and casein. From the 16s rRNA gene sequence analysis, the isolates were labeled as Bacillus licheniformis KYLS-CU01 and B. licheniformis KYLS-CU02. The isolates showed higher extracellular chitinase activities than B. licheniformis ATCC 14580 as a control. The optimum temperature and pH for chitinase production were $40^{\circ}C$ and pH 7.0, respectively. Response Surface Methodology (RSM) was used to optimize the culture medium for efficient production of the chitinase. Under this optimal condition, 1.5 times higher chitinase activity of B. licheniformis KYLS-CU02 was obtained. Extracellular chitinases of the two isolates were purified through ammonium sulfate precipitation and anion-exchange DEAE-cellulose column chromatography. The specific activities of purified chitinase from B. licheniformis KYLS-CU01 and B. licheniformis KYLS-CU02 were 7.65 and 5.21 U/mg protein, respectively. The molecular weights of the two purified chitinases were 59 kDa. Further, the purified chitinase of B. licheniformis KYLS-CU01 showed high antifungal activity against Fusarium sp.. In conclusion, these two bacterial isolates can be used as a biopesticide to control pathogenic fungi.
Kim, Keun-Yong;Matoko Yoshida;Yasuwo Fukuyo;Kim, Chang-Hoon
ALGAE
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v.17
no.1
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pp.11-19
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2002
Twenty-nine culture strains belonging to the genus Alexandrium Halim (Dinophyceae) were established from water column or sediments in Korea. Seventeen isolates were identified as A. tamarense (Lebour) Balech, eight isolates as A. sp. cf. catenella and one as A. catenella (Whedon et Kofoid) Balech according to the presence or absence of a ventral pore, the shape of the posterior sulcal plate and the sulcal width. Three isolates were unable to be identified due to considerable distortion of thecal plates and lack of enough materials, but typical of A. tamarense and/or A. catenella. The overall cell shape of A. tamarense was usually longer than wide. The posterior sulcal plate was definitely longer than wide dorsoventrally, and sulcus extended posteriorly without apparent widening. They were distributed in three major coasts of Korea. In contrast, the cell shape of A. sp.cf. catenella was generally anterior-posteriorly flattened. The transversal axis of the posterior sulcal plate was always longer than the longitudinal, or both axes were nearly equal in length. Its sulcus was broader than that of A. tamarense and widened in the direction of antapex about 1.5 times. This morphotype existed in nearshore and offshore waters of the southern Korea sea. One of A. catenella isolates from Jinhae Bay showed no conspicuous differences with A. sp. cf. catenella except for the consistent absence of a ventral pore.
To search for the antifungal substances, various actino-mycete isolates were obtained from various soils of Korea using plate dilution method on the humic acid vitamin agar plates. In the screening procedures using a dual culture method, 32 actionomycete isolates were selected, which showed the inhibitory activity against mycelial growth of plant pathogenic fungi Altirnaria mali, Colletotrichum gloeosporides, Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum, Magnaporthe grisea, Phytophthora capsici, and Rhizoctonia solani. Bioassay of the crude extracts from culture filtrates and mycelial mets revealed that 12 antagonistic actionomycetes produced highly active antifungal substances. Actinomycete strain S5-55 which showed the substantial antifungal activity against the tested fungi was selected for production of the antifungal substances. Based on the cytochemical and morphological characteristics, strain S5-55 was identified as a Streptomyces species. The results of the numerical identification using the TAXON program confirmed that Streptomyces strain S5-55 was identical with Streptomyces humidus including in TAXON major cluster 19. The production of antifungal substance was most favorable when S. humidus strain S5-55 was cultivated for 10 dats on soluble starch broth supplemented with $K_2$HPO$_4$. The antifungal substances active against the plant pathogenic fungi P. capsici and M. grisea were partially purified using $\textrm{C}_{18}$ reversed-phase column chromatography.
Kang, Chang-Ho;Jung, Ho Geon;Koo, Ja-Ryong;So, Jae-Seong
KSBB Journal
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v.30
no.4
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pp.161-165
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2015
Lactic acid and its derivatives are widely used in the food, pharmaceutical, and cosmetic industries. It is also a major raw material for the production of poly-lactic acid (PLA), a biodegradable and environmentally friendly polymer and a possible alternative to synthetic plastics derived from petroleum. For PLA production by new strains of lactic acid bacteria (LAB), we screened LAB isolates from shellfish. A total of 51 LAB were isolated from 7 types of shellfishes. Lactic acid production of individual isolates was examined using high-performance liquid chromatography using a Chiralpak MA column and an ultraviolet detector. Lactobacillus plantarum T-3 was selected as the most stress-resistant strain, with minimal inhibition concentrations of 1.2 M NaCl, 15% ethanol, and 0.0020% hydrogen peroxide. In a 1 L fermentation experiment, $\small{D}$-lactic acid production of 19.91 g/L fermentation broth was achieved after 9 h cultivation, whereas the maximum production of total lactic acid was 41.37 g/L at 24 h.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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