Yoon, Hyung Joo;Lee, Kyeong Yong;Kim, Mi Ae;Ahn, Mi Young;Park, In Gyun
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제26권2호
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pp.124-130
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2013
Bumblebees are widely used to pollinate various greenhouse crops. Among the different bumblebee species, Bombus ignitus is indigenous to Korea, China, Japan and Russia. B. ignitus undergoes one generation per year, and artificial hibernation is essential for year-round rearing of the bumblebee. Keeping the queens under low-temperature conditions for several months is an effective method for terminating their diapause and promoting colony development. In the present study, we investigated how cold temperature affects the artificial hibernation of B. ignitus queens. Under chilling temperatures of $-2.5^{\circ}C$, $0^{\circ}C$, $2.5^{\circ}C$ and $5^{\circ}C$ with constant humidity >80%, the queens stored at $2.5^{\circ}C$ exhibited the highest survival rates, which were 74.0% at one month, 67.0% at two months, 60.0% at three months, 46.0% at 4 months, 33.0% at 5 months and 24.0% at 6 months. Lower survival rates were observed at $0^{\circ}C$, $5^{\circ}C$, $7.5^{\circ}C$ and $12.5^{\circ}C$. At $2.5^{\circ}C$ the colony developmental characteristics after diapause were 1.2- to 1.5-fold greater than those when queens were stored at $5^{\circ}C$. Thus, $2.5^{\circ}C$ and 70% R.H. were the most favorable chilling temperature and humidity conditions for terminating the diapause of B. ignitus queens.
This study was conducted to investigate the cause of a new duck disease occured in southern part of Korea. A meat type duck farm located in Kangjin, Chonnam Province had experienced outbreaks of septicemic disease at around 20 days of age in nearly every batch of ducklings from early spring to early summer in 1989. Main symptoms of the birds were eye and nasal discharge, depression, inappetence, diarrhea and nervous signs such as tremor and ataxia. Some birds died suddenly without any signs. Mortality reached from 20% to 80% in severe cases. The autopsy findings of the affected ducklings revealed consistantly severe airsacculitis, fibropericarditis, perihepatitis and occasionaly enteritis and distended ureter with urate deposit. A rod shaped gram-negative bacterium was isolated purely from brain and liver of the diseased ducks by culturing the specimens on blood agar for 48 hours in candle jar. The isolate neither produced hemolysis nor grew on MacConKey Agar. It formed colony relatively slowly being recognizable at least 36 hours after culturing, reaching colony size of about 1mm in diameter at 48 hours culture. The colony looked iridescent under oblique light and had muddy odor. The isolate did not ferment carbohydrates tested but produced gelatinase, hippuricase and oxidase which were considered as characteristics of P anatipestifer. The isolate induced similar signs and lesions when infected experimentally into ducks of 3 to 38 days age via intraperitoneum or intratrachea. However it did not produce any clinical signs wen inoculated via intranasal route. It produced only mild signs in chicken just injected with a very large dose. The bacteria did not produce any signas or lesions in mice. It was concluded through biochemical and physiological tests and animal inoculation tests that the new disease was caused by P anatipestifer.
The tube formation assay is a widely used in vitro experiment model to evaluate angiogenic properties by measuring the formation of tubular structures from vascular endothelial cells (ECs). In vitro experimental results are crucial when considered the advisability of moving forward to in vivo studies. Thus, the additional attentions to the in vitro assay is necessary to improve the quality of the pre-clinical data, leading to better decision-making for successful drug discovery. In this study, we improved the tube formation assay system in three aspects. First, we used human endothelial colony forming cells (ECFCs), which are endothelial precursors that have a robust proliferative capacity and more defined angiogenic characteristics compared to mature ECs. Second, we utilized a real-time cell recorder to track the progression of tube formation for 48 hours. Third, to minimize analysis error due to the limited observation area, we used image-stitching software to increase the microscope field of view to a $2{\times}2$ stitched area from the $4{\times}$ object lens. Our advanced tube formation assay system successfully demonstrated the time-dependent dynamic progression of tube formation in the presence and absence of VEGF and FGF-2. Vatalanib, VEGF inhibitor, was tested by our assay system. Of note, $IC_{50}$ values of vatalanib was different at each observation time point. Collectively, these results indicate that our advanced tube formation assay system replicates the dynamic progression of tube formation in response to angiogenic modulators. Therefore, this new system provides a sensitive and versatile assay model for evaluating pro- or anti-angiogenic drugs.
Background: Pre-B-cell colony enhancing factor (PBEF) has been suggested as a novel biomarker in sepsis and acute lung injury. We measured the PBEF in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid of acute critically ill patients with lung infiltrates in order to evaluate the clinical utility of measuring PBEF in BAL fluid. Methods: BAL fluid was collected by bronchoscope from 185 adult patients with lung infiltrates. An enzyme-linked immunosorbent assay was then performed on the collected fluids to measure the PBEF. Results: Mean patient age was 59.9 ${\pm}$14.5 years and 63.8% of patients were males. The mean concentration of PBEF in BAL fluid was 17.5 ${\pm}$88.3 ng/mL, and patients with more than 9 ng/mL of PBEF concentration (n=26, 14.1%) had higher Acute Physiology and Chronic Health Evaluation (APACHE) II and Sequential Organ Failure Assessment (SOFA) scores on the BAL exam day. However, there were no significant differences in clinical characteristics between survivors and non-survivors. In patients with leukocytosis (n=93) seen on the BAL exam day, the linear regression analysis revealed a significant, positive relationship between PBEF and APACHE II ($r^2$=0.06), SOFA score ($r^2$=0.08), Clinical Pulmonary Infection Score ($r^2$=0.05), and plateau pressure in patients on ventilators ($r^2$=0.07) (p<0.05, respectively). In addition, multivariate regression analysis with PBEF as a dependent variable showed that the plateau pressure ($r^2$=0.177, p<0.05) was correlated positively with PBEF. Conclusion: The PBEF level in the BAL fluid may be a useful, new biomarker for predicting the severity of illness and ventilator-induced lung injury in critically ill patients with lung infiltates and leukocytosis.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제20권2호
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pp.93-98
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2010
Bumblebees are widely used to pollinate various crops, especially tomato, in greenhouses and fields. An artificial hibernation is essential for year-round rearing of the bumblebee, which passes through one generation per year. Here, we investigated whether a chilling temperature and humidity affect artificial hibernation of the bumblebee queen Bombus terrestris. In chilling temperature regimes of $0^{\circ}C$, $2.5^{\circ}C$, $5^{\circ}C$, $7.5^{\circ}C$ or $12.5^{\circ}C$ under constant humidity >70%, the queens stored at $2.5^{\circ}C$ exhibited the highest rate of survival, which was 74.0% at one month, 67.0% at two months, 60.0% at three months, 46.0% at 4 months, 33.0% at 5 months, and 24.0% at 6 months. Rates of survival decreased at the following temperatures: $0^{\circ}C$, $5^{\circ}C$, $7.5^{\circ}C$ and $12.5^{\circ}C$. Colony developmental characteristics after diapause were 1.2- to 1.5-fold higher than those of queens stored at $5^{\circ}C$. In terms of chilling humidity, the queens hibernated at 70% under $2.5^{\circ}C$ exhibited the highest rate of survival, which was $93.3{\pm}3.4%$ at one month, $83.3{\pm}0.0%$ at two months, $76.7{\pm}0.0%$ at 3 months and $36.7{\pm}12.1%$ at 5 months. The rates of oviposition, colony foundation and progeny-queen production of queens hibernated at 70% were 80.8%, 30.8% and 30.8%, respectively. These values correspond to 1.7- to 3.3-fold increases in comparison to queens stored at 50% humidity. Therefore, $2.5^{\circ}C$ and 70% R.H. were the favorable chilling temperature and humidity conditions for diapause break of B. terrestris queens.
Background: Florfenicol might be ineffective for treating Staphylococcus aureus small colony variants (SCVs) mastitis. Objectives: In this study, florfenicol-loaded chitosan (CS)-sodium tripolyphosphate (TPP) composite nanogels were prepared to allow targeted delivery to SCV infected sites. Methods: The formulation screening, the characteristics, in vitro release, antibacterial activity, therapeutic efficacy, and biosafety of the florfenicol composite nanogels were studied. Results: The optimized formulation was obtained when the CS and TPP were 10 and 5 mg/mL, respectively. The encapsulation efficiency, loading capacity, size, polydispersity index, and zeta potential of the optimized florfenicol composite nanogels were 87.3% ± 2.7%, 5.8% ± 1.4%, 280.3 ± 1.5 nm, 0.15 ± 0.03, and 36.3 ± 1.4 mv, respectively. Optical and scanning electron microscopy showed that spherical particles with a relatively uniform distribution and drugs might be incorporated in cross-linked polymeric networks. The in vitro release study showed that the florfenicol composite nanogels exhibited a biphasic pattern with the sustained release of 72.2% ± 1.8% at 48 h in pH 5.5 phosphate-buffered saline. The minimal inhibitory concentrations of commercial florfenicol solution and florfenicol composite nanogels against SCVs were 1 and 0.25 ㎍/mL, respectively. The time-killing curves and live-dead bacterial staining showed that the florfenicol composite nanogels were concentration-dependent. Furthermore, the florfenicol composite nanogels displayed good therapeutic efficacy against SCVs mastitis. Biological safety studies showed that the florfenicol composite nanogels might be a biocompatible preparation because of their non-toxic effects on the renal tissue and liver. Conclusions: Florfenicol composite nanogels might improve the treatment of SCV infections.
Objective : Endothelial colony-forming cells (ECFCs) have been reported to play an important role in the pathogenesis of moyamoya disease (MMD). We have previously observed stagnant growth in MMD ECFCs with functional impairment of tubule formation. We aimed to verify the key regulators and related signaling pathways involved in the functional defects of MMD ECFCs. Methods : ECFCs were cultured from peripheral blood mononuclear cells of healthy volunteers (normal) and MMD patients. Low-density lipoproteins uptake, flow cytometry, high content screening, senescence-associated β-galactosidase, immunofluorescence, cell cycle, tubule formation, microarray, real-time quantitative polymerase chain reaction, small interfering RNA transfection, and western blot analyses were performed. Results : The acquisition of cells that can be cultured for a long time with the characteristics of late ECFCs was significantly lower in the MMD patients than the normal. Importantly, the MMD ECFCs showed decreased cellular proliferation with G1 cell cycle arrest and cellular senescence compared to the normal ECFCs. A pathway enrichment analysis demonstrated that the cell cycle pathway was the major enriched pathway, which is consistent with the results of the functional analysis of ECFCs. Among the genes associated with the cell cycle, cyclin-dependent kinase inhibitor 2A (CDKN2A) showed the highest expression in MMD ECFCs. Knockdown of CDKN2A in MMD ECFCs enhanced proliferation by reducing G1 cell cycle arrest and inhibiting senescence through the regulation of CDK4 and phospho retinoblastoma protein. Conclusion : Our study suggests that CDKN2A plays an important role in the growth retardation of MMD ECFCs by inducing cell cycle arrest and senescence.
Deonjang has been developed as a fermented food in Korea. It produces a distinctive flavors and tastes during the fermentation process. The purpose of this study was to determine the quality characteristics of commercial deonjang certified for traditional foods. We investigated the amino nitrogen, sodium chloride(NaCl), total colony counts, coliforms, Bacillus cereus and isoflavone of 24 commercial deonjang samples certified for traditioinal foods. Deonjang showed wide ranges in amino nitrogen(105.76~318.93 mg%) and NaCl(12.53~16.51%). Survey distribution of microflora investigation in the total colony counts were detected in all 24 samples(100%), and the range is low $1.5{\times}10^6$ CFU/g, at the highest $2.5{\times}10^9$ CFU/g respectively. For the coliform, the following results were $0{\sim}5.0{\times}10^1$ CFU/g. B.cereus was detected in a total of four samples were $2.5{\times}10^3{\sim}3.3{\times}10^4$ CFU/g in the distribution. Daidzein of isoflavones showed the lowest at 86.7 ppm, 681.8 ppm range of the best shows and genistein as low as 0 to 50.0 ppm respectively. This research provided information for quality characteristics of commercial deonjang certified for traditional foods.
이 연구는 개의 귀 속에서 분리한 $Malassezia$$pachydermatis$의 특성과 이들 효모에 대한 essential oil들의 항진균효과를 측정한 결과로서 일반적인 $M.$$pachydermatis$를 분리하기위한 Sabouraud dextrose agar (SDA), olive oil이 첨가된 SDA (SDAO) 배지 및 지방 친화성 효모를 검출하기 위한 Leeming's medium (LM)으로 구성된 세종류의 분리배지가 사용되었다. $Malassezia$ spp는 77.8%의 개로부터 분리되었으며 분리배지에 따라 분리율에 큰 차이를 나타내었으며 지방성분이 포함된 배지에서의 분리율이 일반적으로 사용하는 SDA에서 보다 높았다. 분리된 모든 $Malassezia$ spp는 $M.$$pachydermatis$로 동정되었지만 육안적으로 보이는 집락의 모양과 SDA에서의 증식속도를 고려했을 때 4개의 아종으로 관찰되었다. 배양 72시간 후 집락의 직경이 3 mm 이상인 큰 집락(LC)과 2 mm 정도인 중간 집락(MC) 및 배양 5일 후에도 1 mm 이상으로 크지지 않는 작은 집락(SC), 그리고 SDA에서 증식하지 않는 지방의존 집락(Lipo)으로 분류되었다. SDA, SDAO 및 LM 배지에서 각 type의 효모가 분리된 정도를 보면, LC type 효모는 각각 4, 11, 11개 시료에서, MC type 효모는 각각 2, 3, 1개 시료에서, SC type 효모는 각각 1, 2, 1개시료에서 분리되었으며 Lipo type은 SDAO과 LM 배지 중 3 곳에서 분리되었다. $M.$$pachydermatis$에 대한 essential oil의 항진균효과 측정은 디스크 확산법과 well 확산법에 의해 이루어졌으며, 대부분의 essential oil은 0.5에서 1.0%의 농도에서 $M.$$pachydermatis$ 의 증식을 억제하였다. MIC90과 MIC50은 essential oil의 성분에 따라 다양하였으나, Thyme oil이 가장 억제 효과가 좋았으며 marjoram과 tea tree oil은 비교적 낮은 억제 능력을 나타내었다.
Objective: This study was to compare the characteristics between parthenogenetic mES (P-mES) cells and in vitro fertilization mES cells. Materials and Methods: Mouse oocytes were recovered from superovulated 4 wks hybrid F1 (C57BL/6xCBA/N) female mice. For parthenogenetic activation, oocytes were treated with 7% ethanol for 5 min and $5{\mu}g$/ml cytochalasin-B for 4 h. For IVF, oocytes were inseminated with epididymal sperm of hybrid F1 male mice ($1{times}10^6/ml$). IVF and parthenogenetic embryos were cultured in M16 medium for 4 days. Cell number count of blastocysts in those two groups was taken by differential labelling using propidium iodide (red) and bisbenzimide (blue). To establish ES cells, b1astocysts in IVF and parthenogenetic groups were treated by immunosurgery and recovered inner cell mass (ICM) cells were cultured in LIF added ES culture medium. To identify ES cells, the surface markers alkaline phosphatase, SSEA-1, 3,4 and Oct4 staining were examined in rep1ated ICM colonies. Chromosome numbers in P-mES and mES were checked. Also, in vitro differentiation potential of P-mES and mES was examined. Results: Although the cleavage rate (${\geq}$2-cell) was not different between IVF (76.3%) and parthenogenetic group (67.0%), in vitro development rate was significantly low in parthenogenetic group (24.0%) than IVF group (68.4%) (p<0.05). Cell number count of ICM and total cell in parthenogenetic b1astocysts ($9.6{\pm}3.1,\;35.1{\pm}5.2$) were signficantly lower than those of IVF blastocysts ($19.5{\pm}4.7,\;63.2{\pm}13.0$) (p<0.05). Through the serial treatment procedure such as immunosurgery, plating of ICM and colony formation, two ICM colonies in IVF group (mES, 10.0%) and three ICM colonies (P-mES, 42.9%) in parthenogenetic group were able to culture for extended duration (25 and 20 passages, respectively). Using surface markers, alkaline phosphatase, SSEA-l and Oct4 in P-mES and mES colony were positively stained. The number of chromosome was normal in ES colony from two groups. Also, in vitro neural and cardiac cell differentiation derived from mES or P-mES cells was confirmed. Conclusion: This study suggested that P-mES cells can be successfully established and that those cell lines have similar characteristics to mES cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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