천연물 유래의 잇꽃 oleosomes은 미래 에너지 자원으로 사용되며 씨 안쪽에 트리그리세라이드를 저장한 작고($1{\sim}3{\mu}m$) 둥근 모양의 저장소이다. Oleosome의 표면은 고분자의($20{\sim}24$ KDa) oleosin 단백질로 덮여 있으며 유화 특성을 나타낸다. 전통적으로, 잇꽃처럼 오일을 내포하고 있는 씨앗의 Oleosomes은 내부에 있는 오일을 분리하기 위하여 단순히 분쇄하는 방법을 사용하였다. 특허 받은 DermaSphere 기술은 손상되지 않은 상태의 oleosomes의 분리가 가능하다. 분리된, 이 원료는 일반적으로 잇꽃 오일과 관련된 피부 유연제, 보습제, 산화 방지제들을 전달하는 제형에 사용될 수 있다. 그러나, 현재의 에멀젼화된 oleosin 단백질이 둥근 오일 바디를 덮고 있기 때문에, oleosomes은 전형적인 oil-in-water (O/W) 유상액에서 다른 oil phase를 에멀젼화할 뿐만 아니라 자기 유화 특성도 가지고 있다. Oleosomes은 화장품 제형에서 유상의 비 활성 부분으로 역할을 하고 있다. 천연 oleosomes은 다양한 유상 활성 성분들을 포집할 수 있으며 화장품 효능 증진을 위한 전달 시스템으로 사용 될 수 있다. 또한, Oleosomes은 방향제, 비타민, 방충제, UV chromophores 같은 다양한 물질들을 포집 할 수 있었다. 이러한 oleosomes은 제품내에 있는 활성물질들을 보호하거나, 시간이 경과에 따른 활성물질의 적절한 방출을 제어하는데 사용 될 수 있다.
A strain of Pseudomonas sp. isolated from soil was shown to produce a high level of extracellular endo-inulinase. In this work, the endo-inulinase gene (inu1) of the bacterial strain was cloned into the plasmid pBR322 by using EcoRI restriction endonuclease and E. coli HB101 as a host strain. One out of 7, 000 transformants obtained from the above cloning experiment formed a clear zone around its colony on the selective medium supplemented with 2.0% inulin after a prolonged incubation at 37$\circ$C and subsequent cold shock treatment. The functional clone was found to carry a recombinant plasmid (pKMG50) with a 3.7 kb genomic insert containing the genetic information for the inulinase activity. The inulinase from E. coli HB101/pKMG50 was proved to be an endo-acting enzyme and produced constitutively in the recombinant E. coli cells. Zymogram of the enzyme from the recombinant cells with inulin substrate indicated that the molecular mass of the active protein was 190 Kd, while that of the endo-inulinase from the Pseudomonas strain was 170 Kd. This size discrepancy suggested that the inulinase from the recombinant E. coli HB101 cells might be the initial product of translation, not the mature form produced in the strain of Pseudomonas sp..
In this study, we aimed to investigate the neuroprotective effects of caffeic acid phenethyl ester (CAPE), an active component of propolis purified from honeybee hives, on photothrombotic cortical ischemic injury in mice. Permanent focal ischemia was achieved in the medial frontal and somatosensory cortices of anesthetized male C57BL/6 mice by irradiation of the skull with cold light laser in combination with systemic administration of rose bengal. The animals were treated with CAPE (0.5-5 mg/kg, i.p.) twice 1 and 6 h after ischemic insult. CAPE significantly reduced the infarct size as well as the expression of tumor necrosis $factor-{\alpha}$, hypoxiainducible $factor-1{\alpha}$ monocyte chemoattractant protein-1, $interleukin-1{\alpha}$, and indoleamine 2,3-dioxygenase in the cerebral cortex ipsilateral to the photothrombosis. Moreover, it induced an increase in heme oxygenase-1 immunoreactivity and interleukin-10 expression. These results suggest that CAPE exerts a remarkable neuroprotective effect on ischemic brain injury via its anti-inflammatory properties, thereby providing a benefit to the therapy of cerebral infarction.
Hwangtae, dried Alaska pollack, is a major storage product in the fish processing industry. Hwangtae is prepared by removing the internal organs and drying outdoors during the cold witner months by allowing it to thaw during the daytime and re-freeze at night under sub-zero ($-10^{\circ}C$) conditions and gradually dry from December until the next April for around 5 months from Myungtae. In this study, ground Hwangtae was hydrolyzed using two proteolytic enzymes (pepsin and alcalase) which produced five soluble active peptides from Hwangtae (yellowish dried Pollack, Theragra chalcogramma) protein. Two different peptides with strong antioxidative activity were isolated from the hydrolysate using consecutive chromatographic methods of Sephadex G-25 gel, ion-exchange chromatography on a Sepharose-Sephadex C-25 gel, and high-performance liquid chromatography. The isolated peptides, APO1 and APO2, were composed of 16 and 13 amino acid residues, respectively. Both peptides contained a Gly residue at the C-terminus and the repeating motif Gly-Pro-Hyp. The peptide with a molecular weight less than 1,000 Daltons (APACE) obtained from enzymatic hydrolysates of Hwangtae exhibited the highest ACE inhibitory activity. The APACE peptides was composed of 4 amino acid residues (Gly-Leu-Leu-Pro). These results suggest that Hwangtae hydrolysates could be a good source of peptides with ACE inhibitory activity. Biochemical analysis indicated that two 70 kDa peptides (APG1 and APG2) isolated from the hydrolysate had gelatinoytic activity, which was shown to be a calcium dependent protease type as showed by gelatin SDS PAGE.
남극 해양세균 Pseudoalteromonas sp. PAMC 21150에서 분리한 소형 플라스미드(small plasmid, pDK4)의 크기는 3,480bp이고 G+C 함량은 41.64%이며, 3개의 open reading frames(ORFs)을 포함하고 있다. 3개의 ORF는 replication initiation protein (RepA), conjugative mobilization protein (Mob), 그리고 기능이 밝혀지지 않은 단백질을 코팅하고 있다. PCR 반응으로 증폭한 pDK4를 Escherichia coli high-copy pUC19 클로닝 벡터에 삽입하여 fusion vector (pDOC153)를 제작하였고, pDOC 153에 chloramphenicol 저항성 유전자를 삽입하여 ampicillin/chloramphenicol 저항성 Pseudoalteromonas - Escherichia coli 셔틀 벡터(shuttle vector; 7,216 bp 크기; pDOC155)를 제작하였다. 북극 해양세균 P. issachenkonii PAMC 22718이 보유한 2개의 유전자(TonB-dependent receptor gene, chi22718_IV, and exochitinase gene, chi22718_III)를 pDOC155에 삽입하여 두 개의 pDOC155 변형체(pDOC158, pDOC165)를 제작하였다. pDOC158 혹은 pDOC165을 이용하여 triparental mating 방법에 의해 플리스미드 미보유 해양세균인 Pseudoalteromonas sp. PAMC 22137를 형질전환하였다. PCR을 이용한 유전자 증폭실험을 통해서, pDOC158와 pDOC165에 삽입된 유전자들은 Pseudoalteromonas sp. PAMC 22137와 E. coli $DH5{\alpha}$ 내에서 안정적으로 유지되는 것을 확인하였다. 위의 결과는 셔틀 벡터 pDOC155는 Pseudoalteromonas spp. 유래 유전자들을 다른 Pseudoalteromonas spp. 세포 안으로 전달할 수 있는 새로운 유전자 전달시스템으로 이용될 수 있음을 보여주었다.
북부 온대지방에 서식하는 박쥐는 그 대부분이 동면을하며, 그 생식유형은 특이하여 가을에 교미하여 사정된 정자는 자성생식도내에 긴 동면기간 동안 저장되어 있는 것으로 알려져 있다(예: 한국큰관박쥐). 환언하면 저장되어 있던 정자는 이듬해 봄에 배란되는 난자와 수정하여 초여름에 출산하게 된다. 본 연구는 월동하는 정자 두부 Plasma membrane의 성분과 활성 등 형태적 및 기능적 특성을 관찰 분석함으로써, 인공임신율을 높일 수 있는 보다 효과적인 한냉온도 정자저장방법을 모색하기 위하여 시도되었다. 동면하는 한국큰관박쥐와 햄스타 및 비동면동물(마우스)의 정자 Plasma membrane이, 실온과 한냉온도(박쥐-동면온도)에서, 생존율, 첨체반응을, 단백질분포, 능동수송에 관여되는 효소$(Na^+-K^+-ATPase)$의 활성 및 주사전자현미경적 조직화학상을 분석하였다. 본 연구에서 얻은 실험결과에 의거하면, 동면동물인 한국큰관박쥐와 햄스타 및 비동면동물인 마우스 정자의 생존율과 첨체반응율은, 실온과 한냉(박쥐-동면)온도간에 의의있는 차이를 발견할 수 없었고, 단백질 분포와 $Na^+-K^+-ATPase$ 효소활성 및 주사전자현미경적 조직화학적 소견에 있어서도 두 온도간에 의의있는 차이는 없었다. 이와 같이 실온과 한냉온도 간에 형태적 기능적 차이가 없다고 하는 사실은, 동면동물이든 비동면동물이든 Spermatozoa plasma membrane이 동면중 또는 동면 이후에 안정적인 수정을 보장해 주는 형태적 및 기능적 보호구조임을 시사해 준다.
Chinese cabbage (Brassica rapa ssp. pekinesis) is one of the most important vegetable crops in korea and other East Asian countries. Cytosolic fructose-1,6-bisphospha-tase (cytFBPase) is a key enzyme in sucrose biosyn-thesis, which controls the sucrose levels as well as the productivity at plants. The Chinese cabbage cytFBPase gene, BrFBPase, encodes the 340 amino acid polypep-tide, giving a theoretical molecular weight of 37.2 kD and a isolectric point of 5.4. BrFBPase showed high sequence identity with Brassica homologs and its functional domains, such as 12,6P$_2$ binding site or active site and F6P binding site, were highly conserved in diverse sources of organisms. Although the genome of Chinese cabbage seemed to be triplicated, BrFBPase appears to be a single copy gene. The expression of BrFBPase was examined at transcript and protein levels under various conditions. BrFBPase expression was observed only in photosynthetic source tissue, not in sink tissue. The expression was slightly higher during the day than at night, and it showed a diurnal cycle with circadian rhythmicity. Short-term exposure to low temperature inhibited the expression of the BrFBPase, while long-term exposure increased the expression, supporting that sugar levels are high in late autumn when temperature are low.
본 연구에서는, 저온 및 약산성 조건에서 높은 활성을 보이는 티로시나아제인 tyrosinase-CNK의 반응 안정성을 조사하였다. Tyrosinase-CNK는 지금까지 알려진 중온성(mesophilic) 및 호열성(thermophilic) 환경 유래의 티로시나아제 보다는 열 안정성이 낮았으나 0 ℃에서 효소 안정성이 매우 뛰어났고, 반복적인 동결-해동(freeze-thaw) 과정에서도 효소 활성을 안정적으로 유지하였다. 또한, 물과 ethanol 및 acetonitrile이 혼합된 유기용매 환경에서 초기 상대 활성 값의 변화가 관찰되었으나 유기용매 농도의 증가로 인한 추가적인 활성 저하를 유발하지 않고 활성을 일정하게 유지하였다. 한편, 효소 반응의 염(salt)에 대한 저해는 chaotropic 특성이 많이 나타나는 염일수록 적게 나타났다. 결과적으로, tyrosinase-CNK는 통상의 티로시나아제를 이용하여 반응을 수행하기 어려운 환경에서도 원하지 않는 반응을 억제하고 효소 불활성화를 최소화면서 반응을 촉매할 것으로 기대된다.
동해 남서해역에서 입자성 유기탄소와 질소의 시 공간적인 분포 특성을 파악하기 위해서 2011년 9월(하계), 2012년 1월(동계) 그리고 5월(춘계)에 조사하였다. 9월 표층수는 용승 현상에 따른 냉수괴가 관찰되지 않았지만, 높은 chlorophyll a(Chl-a) 농도, 낮은 비광합성 유기입자물질 비율(27%) 그리고 낮은 POC/PON 비(6.2)로 활발한 아미노산 및 단백질 합성을 의미하는 높은 기초생산을 보였다. 하지만, 2012년 5월에는 높은 비광합성 유기입자물질(66%)과 높은 POC/PON 비(8.1)에 근거할 때, 9월과 비교하여 상대적으로 낮은 생산성을 보였다. 이와 같이 식물플랑크톤의 대량 발생이 주로 춘계에 발생한다는 기존의 결과와 상반되며, 이는 춘계 대발생 후기의 동물플랑크톤에 의한 페오피그먼트(phaeopigment)의 증가 때문으로 해석된다. 따라서 입자성 유기물질의 조성은 같은 계절이라도 해양환경의 변화에 따라 달라질 것으로 보인다.
Kim, Kyung-Jae;Han, Shin-Ha;Sung, Ki-Hyun;Yim, Dong-Sool;Lee, Sook-Kyeon;Lee, Chong-Kil;Ha, Nam-Ju
Archives of Pharmacal Research
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제25권2호
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pp.170-177
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2002
The herb, Chrysanthemum zawadskii var, latilobum commonly known as Gu-Jul-Cho in Korea, used in traditional medicine to treat pneumonia, bronchitis, cough, common cold, pharyngitis, bladder-related disorders, gastroenteric disorders, and hypertension. Linarin is the main active compound and the biological mechanisms of its activity are unclear. It is believed that effects of this herb may be exerted through the pluripotent effectors of linarin due to its ability to treat a variety of afflictions. In this study, the effects of linarin on the mouse macrophages cell line, RAW 264.7, were investigated. It was found that linarin could activate macrophages by producing cytokines. Monocytes and tissue macrophages produce at least two groups of protein mediators of inflammation, interleukin 1 (IL-1 ) and the tumor necrosis factor (TNF). Recent studies have shown that TNF and IL-1 modulate the inflammatory function of endothelial cells, leukocytes, and fibroblasts. $TNF-{\alpha}$ production by macrophages treated with linarin occured in a dose dependent manner However, IL-1 production was largely unaffected by this natural product. This study demonstrated the ability of linarin to activate macrophages both directly and indirectly. Linarin also affect both cytosine production and nitric oxide inhibition, in addition to the expression of some surface molecules. Nitric oxide (NO), derived from L-argin-ine, is produced by two forms(constitutive and inducible) of nitric oxide synthase (NOS). The NO produced in large amounts by inducible NOS is known to be responsible for the vasodilation and hypotension observed in septic shock. Linarin was found to inhibit NO production in the LPS-activated RAW 264.7 cells. Linarin may be a useful candidate as a new drug for treating endotoxemia and the inflammation accompanied by NO overproduction. The linarin-treated total Iymphocytes exhibited cytotoxicity in a dose dependent manner between $20{\;}{\mu}g/ml{\;}and{\;}40{\;}{\mu}g/ml$. These results suggest that linarin may function through macrophage activation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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