Koo, Taewoan;Jannat, Md Abu Hanifa;Hwang, Seokhwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권4호
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pp.533-539
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2020
A quantitative real-time polymerase chain reaction (QPCR) was applied to estimate biokinetic coefficients of Clostridium cadaveris and Clostridium sporogenes, which utilize protein as carbon source. Experimental data on changes in peptone concentration and 16S rRNA gene copy numbers of C. cadaveris and C. sporogenes were fitted to model. The fourth-order Runge-Kutta approximation with non-linear least squares analysis was employed to solve the ordinary differential equations to estimate biokinetic coefficients. The maximum specific growth rate (μmax), half-saturation concentration (Ks), growth yield (Y), and decay coefficient (Kd) of C. cadaveris and C.sporogenes were 0.73 ± 0.05 and 1.35 ± 0.32 h-1, 6.07 ± 1.52 and 5.67 ± 1.53 g/l, 2.25 ± 0.75 × 1010 and 7.92 ± 3.71 × 109 copies/g, 0.002 ± 0.003 and 0.002 ± 0.001 h-1, respectively. The theoretical specific growth rate of C. sporogenes always exceeded that of C. cadaveris at peptone concentration higher than 3.62 g/l. When the influent peptone concentration was 5.0 g/l, the concentration of C.cadaveris gradually decreased to the steady value of 2.9 × 1010 copies/ml at 4 h Hydraulic retention time (HRT), which indicates a 67.1% reduction of the initial population, but the wash out occurred at HRTs of 1.9 and 3.2 h. The 16S rRNA gene copy numbers of C. sporogenes gradually decreased to steady values ranging from 1.1 × 1010 to 2.9 × 1010 copies/ml. C. sporogenes species was predicted to wash out at an HRT of 1.6 h.
The effects of initial concentration and pulsed pressurization on the inactivation of Clostridium sporogenes spores suspended in deionized water were determined during thermal processing $(TP;\;105^{\circ}C,\;0.1MPa)$ and pressure-assisted thermal processing $(PATP;\;105^{\circ}C\;and\;700MPa)$ treatments for 40 min and 5min holding times, respectively. Different inoculum levels $(10^4,\;10^6\;and\;10^8CFU/ml)$ of C. sporogenes spores suspended in deionized water were treated at $105^{\circ}C$ under 700MPa with single, double, and triple pulses. Thermally treated samples served as control. No statistical significances (p>0.05) were observed among all different inoculum levels during the thermal treatment, whereas the inactivation rates $(k_1\;and\;k_2)$ were decreased with increasing the initial concentrations of C. sporogenes spores during the PATP treatments. Double- and triple-pulsed pressurization reduced more effectively the number of C. sporogenes spores than single-pulse pressurization. The study shows that the spore clumps formed during the PATP may lead to an increase in pressure-thermal resistance, and multiple-pulsed pressurization can be more effective in inactivating bacterial spores. The results provide an interesting insight on the spore inactivation mechanisms with regard to inoculum level and pulsed pressurization.
This experiment was carried out to develop long-term preservable meat products by controlling a water activity which has a potential inhibitory effects on the growth of microorganism and germination of spore. For this purpose the accuracy of instrument for the measurement of water activity, electric hygrometer was used for this study as well as water activity of final products were investigated according to the various amounts of different kinds of additives. Spore of Bacillus spp, Clostridium sporogenes and Cl. botulinum were inoculated to the meat products with different aw and their growth states in $25^{\circ}C$ were observed to find out the lowest aw which inhibit their growth (aw 0.950).
초고압의 미생물에 대한 살균 효과는 다른 제어 방법을 더 적용함으로써 증대 될 수 있다. 본 연구의 목적은 식품 산업에서 중요한 세균 포자들을 tert-butylhydroquinone (TBHQ)를 처리하여 초고압 살균효과를 증진시킴을 알아보고자 한다. Clostridium sporogenes, Bacillus cereus, Bacillus subtilis의 포자를 준비하였다. Dimetylsulfoxide(DMSO)에 용해시킨 TBHQ 200 ppm을 함유한 포자액을 650 또는 700 MPa로, 54-72$^{\circ}C$에서 5분간 처리하였다. 세균 포자의 사멸은 초고압 처리 이후에만 일어났다. Bacillus subtilis 포자가 B. cereus나 C. sporogenes 포자보다 초고압에 의해 더 많이 사멸되었다. C. sporogenes 포자의 사멸은 Bacillus 포자에 비해서 초고압에 의한 germination이 더 일어나면서 이루어 졌다. Bacillus 포자는 54$^{\circ}C$에서 초고압 처리 때 보다 72$^{\circ}C$에서 처리했을 때 더 많이 사멸되었다. 하지만 germination에 의한 사멸은 70$^{\circ}C$에서 감소되었다. 포자를 DMSO와 초고압, TBHQ와 초고압의 병용 처리를 했을 때, 특히 54$^{\circ}C$에서는 포자 사멸이 덜 일어났다. 세균 포자의 사멸에 대한 좀 더 나은 이해를 위해서는 초고압에 의한 germination 과 다른 포자 억제 물질과의 상호 작용에 대한 메커니즘 연구들이 필요하다.
Kim, Jeong-Dong;Lee, Dae-Weon;Lee, Kyou-Seung;Choi, Chang-Hyun;Kang, Kook-Hee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권2호
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pp.401-410
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2004
Soil samples from five different areas in Korea were collected during 2001/02 and examined for presence of the genus Clostridium. Direct immuno-fluorescent assay (IFA) examination showed that Clostridium septicum, Cl. novyi and Cl. chauvoei were detected in the soil of specific areas in Korea. Sixteen species of Clostridium were isolated and cultivated from the soil samples. Cl. peifringens was detected in all sampling locations, while the other species were not. The in vitro activity of 14 antibiotic agents was determined against 421 clostridia isolated from the soil contaminated with animal feces in Korea. Trovafloxacin was effective against all isolates of the genus Clostridium except one isolate of Cl. subterminale, two of Cl. tetani, and three of Cl novyi with $MIC_{50}$$8- 16\mu$g$ml^{-1}$. Thirteen species of Clostridium were resistant to vancomycin except for Cl. perfringens, Cl. sporogenes, and Cl. subterminale. Imipenem and trovafloxacin showed high antimicrobial activities (>95%) against all strains in the clostridia investigated. Therefore, antibiotic agents such as imipenem and trovafloxacin are the most suitable agents for polymicrobial infection as broad-spectrum monotherapy.
A total of 100 swelled, springered or flippered canned meat and fish products were studied the degree of contamination with clostridias and serological relationships to Hobbs'13 "heat resistant" types, heat resistance of spores and susceptibility of Clostridium perfringens isolates to several antibiotics. Samples examined in this study were collected from Seoul area from June to October, 1975 and prepared in Korea. Clostridias were isolated from 46(46%) of these samples; 19 strains of Cl. perfringens, 9 strains of Cl. oedematiens A, B, 5 strains of Cl. sordelli, each 3 strains of Cl. chauvoei, Cl, oedematiens C.E, and Cl. difficile, 2 strains of Cl. sporogenes. The highest percentage of contamination by Cl. perfringens was found in beef products(26.5%), and the following(5.2%) in mackerel pike and none in baitop shell. whale, manna brand. and top shell. One of 19 isolates of Clostridium perfringens found in meat products was shown to produce heat resistant spores which resist $100^{\circ}C$ for 60 minutes and others were heat labile strains which is killed at $90^{\circ}C$ for 30 minutes. The distribution of Hobbs' serotype of 19 isolates were each 4 strains of type 6, 8, and 11, 1 strain of type 13 and others untypable. 19 Strains of Cl. perfringens were shown a marked susceptibility to cefamezin, lincomycin and minocin and relatively sensitive to vibraimycin, geopen, and chloramphenicol. A marked resistance to kanamycin, colimycin, and gentamycin were shown. Aerobic enteropathogens from samples were not recovered.
To investigate the susceptibility and resistance in case of simultaneous administrations of Lactobacilli and Clostridia prekparations with antituberculosis agents and antibiotics, five strains of Lactobacilli, i.e., Lactobacillus bulgaricus, L. casei, L. helveticus, L. acidophilus, L. sporogenes, and Clostridium butyricum were isolated from commercially available preparation. Minimal inhibitory concentrations (MIC) of nine antituberculosis agents and 21 antibiotics against these strains were determined. The results shwoed that these strains were very sensitive only to rifampicin among antituberculosis agents, and sensitive to other antibiotics. Since the simultaneous oral administration of rifampicin and other antibkiotics with these sensitive strains is ineffective, development of new resistant mutants is desirable.
Beneficial bacteria, which have been used for medical purpose and for medicines for treating intestinal disorders, include strains of Bifidobacterium sp., Lactobacillus sp., Enterococcus sp., Clostridium butyricum, Lactobacillus sporogenes, Bacillus subtilis, Bacillus polyfermenticus and the like. Bacillus polyfermenticuss SCD with is commonly called as Bispan strain has been appropriately used for the treatment of long-term intestinal disorders, since the live strains in the form of active endospores can successfully reach the target intestine. In this study, the identification and characterization of Bispan strain was done using SEM observation, API 50CHB kits, isoprenoid quinone analysis, and fatty acid analysis. These results suggest that Bispan strain is very similar to Bacillus subtilis.
Thermal resistance of dried bacterial spores against dry heat was determined. Spare suspensions of Bacillus subtilis var. niger ATCC 9372, Bacillus stearothermophilus Oxoid Code BR 23 and Clostridium sporogenes ATCC 19404 were located on aluminium strips, dried in electric oven under vacuum at room temperature for 10 minutes. The aluminium strips were laid in the middle of gas flow (hot air and superheated steam) with the velocity of 6 m/sec and heated at $120^{\circ}C$ for 180 seconds. The calculated D-values showed that there were no remarkable differences in the heat resistance of bacterial spares between $R.H.\leqq0.012$ and R. H.=0.51. Furthermore the thermal resistance of B. subtilis spores to dry heat was greater than that of B. stearothermophilus.
Ku, Kyojin;Park, Inah;Kim, Doyeon;Kim, Jeongah;Jang, Sangwon;Choi, Mijung;Choe, Han Kyoung;Kim, Kyungjin
Molecules and Cells
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제43권3호
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pp.276-285
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2020
Circadian rhythm is an endogenous oscillation of about 24-h period in many physiological processes and behaviors. This daily oscillation is maintained by the molecular clock machinery with transcriptional-translational feedback loops mediated by clock genes including Period2 (Per2) and Bmal1. Recently, it was revealed that gut microbiome exerts a significant impact on the circadian physiology and behavior of its host; however, the mechanism through which it regulates the molecular clock has remained elusive. 3-(4-hydroxyphenyl)propionic acid (4-OH-PPA) and 3-phenylpropionic acid (PPA) are major metabolites exclusively produced by Clostridium sporogenes and may function as unique chemical messengers communicating with its host. In the present study, we examined if two C. sporogenes-derived metabolites can modulate the oscillation of mammalian molecular clock. Interestingly, 4-OH-PPA and PPA increased the amplitude of both PER2 and Bmal1 oscillation in a dose-dependent manner following their administration immediately after the nadir or the peak of their rhythm. The phase of PER2 oscillation responded differently depending on the mode of administration of the metabolites. In addition, using an organotypic slice culture ex vivo, treatment with 4-OH-PPA increased the amplitude and lengthened the period of PER2 oscillation in the suprachiasmatic nucleus and other tissues. In summary, two C. sporogenes-derived metabolites are involved in the regulation of circadian oscillation of Per2 and Bmal1 clock genes in the host's peripheral and central clock machineries.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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