• Journal of Ginseng Research
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• 제22권3호
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• pp.188-192
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• 1998

We established the model of clonogenic assay with human tumor cell line such as Calu-3 (lung carcinoma), HEC- lB (endometrial adenocarcinoma) , HEp-2 (larnyx carcinoma), Hs-5787 (breast carcinoma), K-562 (chronic myelogenous leukemia), SF-188 (brain carcinoma), SNU-1 (stomach carcinoma) and WiDr (colon carcinoma) . We investigated growth inhibition of solvent (EtOH, MeOH) and water (100$^{\circ}C$, 121$^{\circ}C$) extracts from Korean red ginseng by clonogenic assay. The results of clonogenic assay showed that EtOH extract had growth inhibition against Calu-3, SF-188 and SNU-1, MeOH extract had growth inhibition against Calu-3, Hs-5787, K-562, and WiDr, but water extract at 100$^{\circ}C$ and water extract at 121$^{\circ}C$ had not growth inhibition against used cell lines.

• Journal of Ginseng Research
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• 제19권1호
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• pp.27-30
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• 1995

We established the model of clonogenic assay with cancer cell lines such as SW-156(kidney), SNU-5(stomach), Hep G2(liver), and WiDr(colon), and we investigated anticancer effect of hydrophobic protein fraction(N-fraction) from Korea red ginseng by using this model. The results of clonogenic assay showed that N-fraction had anticancer activity against SNU-5 above 100 $0.2\mu\textrm{g}$/ml concentration, and did not exhibit anticancer activity against cell lines such as SW-156, WiDr, and Hep G2 up to 1,000 $\mu\textrm{g}$/ml concentration. This result suggests that N-fraction has specially anti-stomach cancerous effect.

• Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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• 제15권1호
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• pp.35-48
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• 1993

The in vitro predictive tests in cancer chemotherapy of cancer cell lines to anticancer drugs were determined using novel dye exclusion assay [NDEA], [3H] thymidine incorporation, and clonogenic assay [CA>. Antitumor effect of Bleomycin, Cis-platin, Vinblastine, Methotrexate to HEp-2, B16 cell lines using rapid assays was compared with [CA> in this study. In dye exclusion assay of B l6 cell line, cancer cells were sensitive to Bleomycin at all concentrations, to Vinblastine at the level of peak plasma concentration [PPC], ${\times}1/10$ [PPC](P<0.05). And Bleomycin revealed relatively good cytotoxicity than that of CDDP and vinblastine at ${\times}10$[PPC], (P<0.05). HEp-2 cells were resistive to methotrexate at the level of ${\times}100$[PPC] (P<0.05) In [3H] thymidine incorporation assay, B 16 cells were sensitive to Bleomycin, CDDP, Vinblastine at the level of [PPC], ${\times}10$ [PPC](P<0.01). Dose-dependent drugs of bleomycin, CDDP were more sensitive than Vinblastine at high concentration (P<0.05). In clonogenic assay, HEp-2 cell line was sensitive to three drugs of all concentrations except ${\times}10$ [PPC] of CDDP. B 16 cell line was sensitive to all drugs(P<0,01). In comparison of chemosensitivity tests among three assays, the results were correlated(${\gamma}=0.99$, P<0.05).

• 한국축산식품학회지
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• 제24권3호
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• pp.293-297
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• 2004

본 연구에서는 유황오리로부터 항종양 효과를 나타내는 물질을 용매 추출법과 각종 크로마토그래피를 사용하여 분리 및 정제하였다. 유황오리로부터 정제한 활성 물질의 각종 종양세포에 대한 항암 효과를 측정한 결과 MTT assay는 100 $\mu\textrm{g}$/mL의 농도에서 HEp-2는 56%, KB는 58%의 세포 증식 억제 효과가 나타났다. 정상 세포주인 MDBK는 28%의 세포증식억제 효과가 나타나 정상 세포에 대한 세포 독성은 나타나지 않았다. Clonogenic assay는 200 $\mu\textrm{g}$/mL의 농도에서 HEp-2는 26%, KB는 28%의 생존율을 나타내었다. 따라서 유황오리로부터 정제한 활성 물질은 후두암 세포주인 HEp-2와 구강암 세포주인 KB에서만 특이적으로 세포 증식 억제 효과를 나타내었다.

• Radiation Oncology Journal
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• 제19권2호
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• pp.163-170
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• 2001

목적 : 방사선조사후 세포의 생존 분획은 세포집락 측정기법으로 확인하는 것이 표준이나 많은 비용과 시간이 소요되는 단점을 갖고 있다. 이에 생존 세포의 tetrazolium염의 자색 formazan 침전물로의 환원시키는 능력에 그 기반을 둔 MTT 기법을 사용하여 세포집락 측정기법을 대체하기 위한 기법으로서의 유용성과 그 실행상의 최적조건을 규명하고자 하였다. 방법 : PCI-1, SNU-1066, NCI-H630, RKO등의 세포주에 0, 2, 4, 6, 8, 10 Gy의 방사선을 조사한 후 세포집락 측정 기법과 MTT기법으로 세포 생존 분획을 조사하였다. 세포집락 측정기법은 $25\;cm^2$ 폴리스티렌 배양 플라스크에 방사선량에 따라 다른 수의 세포를 분주한 후 24시간 동안 배양 후 방사선을 조사하였고 이를 $10\~14$일 동안 배양 후 염색하여 생성된 세포집락의 수를 측정하였다. MTT기법은 침전물의 용해과정이 필요없는 Premix WST-1 시약을 이용하여 시행하였다. MTT기법은 각각의 세포주에서 세포수와 흡광도간의 선형관계와 최적 실험조건을 확인한 이후 시행하였다. 이 기법은 방사선을 조사받은 세포에서는 지수적 성장을 회복한 이후와 방사선을 조사받지 않은 세포는 4회 이상의 세포분열을 거친 후에 시행하였다. 세포집락 측정기법 및 MTT기법을 통하여 얻은 세포 생존율을 구한 후 이를 지표로 비교하였다. 결과 : 각 기법으로 얻은 세포 생존율의 표준편차는 $5\%$ 내외였다. 2가지 방법으로 구한 세포 생존율은 t-test로 비교하였을 때 $0\~4\;Gy$에서는 통계적으로 유의한 차이가 없었으며 회귀분석 결과는 선형적 관계가 있었다$(R^2=0.975-0.992)$. MTT 기법의 시행에 최적인 세포수는 배양효율에 따라 다른 것으로 나타났는데, 배양효율이 $30\%$ 이상이면 300개 이하가, $30\%$ 미만인 경우는 $500\~1,000$개가 적당한 것으로 확인되었다. MTT기법은 6 배가시간 경과 이후에 시행하는 것이 세포집락 측정기법과 가장 근접하였으며 적어도 4 배가시간 이후에 시행하는 것이 필요할 것으로 사료되었다. 이에 따르면 배가시간이 3일 이하인 세포주가 세포 민감성 측정방법으로서 MTT 기법이 세포 집락 측정 기법을 대체하여 사용하기에 적합한 것으로 사료되었다. 결론 : 이상에서, MTT기법을 이용하여 방사선조사 후의 세포생존을 측정하기 위해서는 예비실험을 통해 각 세포주에서의 최적의 조건을 찾는 것이 필수적이며 이 조건하에서 MTT기법을 시행해야만 방사선에 의한 세포 민감성 측정에 이용될 수 있음을 확인하였다.

• Radiation Oncology Journal
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• 제26권3호
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• pp.166-172
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• 2008

목 적: 암환자의 방사선 치료 전 방사선에 대한 감수성을 미리 측정할 수 있다면 임상적으로 많은 도움이 될 것이다. 본 연구는 전 임상 실험을 통하여 MTT assay가 세포집락 측정기법과 비교해서 방사선 감수성을 예측할 수 있고, 직장암 환자의 조직에 사용할 수 있는지 가능성을 확인하고자 하였다. 대상 및 방법: 대장암 세포 주인 HCT-8, LoVo, CT-26, WiDr을 이용하여 세포집락 측정기법을 통해 세포생존곡선 및 2 Gy에서의 세포생존확률(SF2)을 구하였다. 세포 주 자체를 대상으로 MTT assay를 시행하는 실험(in vitro) 및 환자의 암 조직과 같은 상태를 만들기 위하여, 누드 마우스에 세포 주를 주입하여 암 조직을 형성한 후 in vitro와 같은 방식으로 MTT assay를 시행(ex vivo)하였다. 이 두 실험에 대한 흡광도 값에 따른 저해율(inhibition rate, %)을 구하였다. 결 과: $SF_2$ 및 세포생존곡선에 따르면 CT-26 및 LoVo가 HCT-8, WiDr에 비해 방사선에 민감하였다(p<0.05). In vitro MTT assay 결과 WiDr, HCT-8, LoVo와 CT-26의 방사선 저해율이 각각 17.3%, 21%, 30%, 56.5%를 나타내었다. 또한 ex vivo MTT assay의 저해율은 HCT-8, WiDr, LoVo와 CT-26에서 각각 23.5%, 26%, 38%, 53%를 나타내었다. 통계적인 차이를 감안하였을 때 세포생존곡선을 통해 얻은 방사선 감수성의 결과와 동일한 순서를 가졌다. 결 론: 4개의 세포 주의 방사선의 감수성의 순서가 세포집락 측정기법 및 in vitro와 ex vivo MTT assay 결과에서 거의 일치함을 보였다. 이는 직장암 환자에서 MTT assay를 통해 방사선 감수성을 예측할 수 있는 가능성을 제시하였다.

• 생약학회지
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• 제30권3호
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• pp.275-279
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• 1999

The solvent extracts from Aloe arborescens and Aloe vera were randomly screened for inhibitory effects on the growth of tumor cell lines. In case of Aloe vera extracts, butyl alcohol extract and ethyl alcohol extract showed antitumor activity at $100\;{\mu}g/ml$ on lung cell lines(A427, Sk-mes-1, Calu-3 and 3LL). In Aloe arborescens extracts, butyl alcohol extract and ethyl alcohol extract exerted high activity at $100\;{\mu}g/ml$ on breast cell line(Hs-578T) and lung cell line(Sk-mes-1), respectively. The solvent extracts from Aloe vera exerted antitumor activity broadly on various tumor cell lines. In contract, the solvent extracts from Aloe arborescens exerted specific antitumoricity on a few tumor cell lines.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제18권6호
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• pp.410-414
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• 1995

Adaptive response induced by low dese .gamma.-ray irradiation in human cervical carcinoma cells was examined. Cells were exposured to low dose of .gamma.-ray irradiation in human cervical carcinoma cells was examined. Cells were exposured to low dose of .gamma.-ray (1-cGy) followed by high doses of r-ray irradiation (0,1,2,3,5,7 and 9Gy for chlnogenic assay or 1.5Gy for micronucleus assay) with various time intervals. Survival fractions of cells in both low dose-irradiated and unirrated groups were analyzed by clonogenic assay. Surviva fractions of low dose-irradiated in cell survival was maximum when low and high dose irradiation time interval was 4 hr. Frequencies of micronuclei which is an indicative of chromosome aberration were also enutained from survival fractions analyzed by clonogenic assay, maximum when low and high dose irradiation time interval was 4hr. Frequencies of micronuclei which is an indicative of chromosome aberration were also enumerated in both low dose-irradiated and unirradiated groups. In consiststent with the result obtained from survival fractions analyzed by clonogenic assay, maximum reduction in frquencies of micronuclei was observed when low dose radiation was given 4 hr prior to high response to subsequent high dose .gamma.-ray irradiation in human cervical carcinomal cells. Our data suggest that one of the possible mechanisms of adaptive response induced by low dose rediation is the increase in repair of DNA double strand breaks in low dose radiation-adapted cells.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제17권4호
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• pp.1891-1898
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• 2016

Imperata cylindrica, a tall tufted grass which has multiple pharmacological applications is one of the key ingredients in various traditional medicinal formula used in India. Previous reports have shown that I. cylindrica plant extract inhibited cell proliferation and induced apoptosis in various cancer cell lines. To our knowledge, no studies have been published on the effect of I. cylindrica leaf extract on human oral cancers. The present study was undertaken in order to evaluate the anticancer properties of the leaf extract of I. cylindrica using an oral squamous cell carcinoma cell line SCC-9 as an in vitro model system. A methanol extract from dried leaves of I. cylindrica (ICL) was prepared by standard procedures. Effects of the ICL extract on the morphology of SCC-9 cells was visualized by microscopy. Cytotoxicity was determined by MTT assay. Effects of the ICL extract on colony forming ability of SCC-9 cells was evaluated using clonogenic assay. Cell cycle analysis was performed by flow cytometry and induction of apoptosis was determined by DNA fragmentation assay. The ICL extract treatment caused cytotoxicity and induced cell death in vitro in SCC-9 cells in a dose-dependent manner. This treatment also significantly reduced the clonogenic potential and inhibited cell proliferation by arresting the cell cycle in the G2/M phase. Furthermore, DNA fragmentation assays showed that the observed cell death was caused by apoptosis. This is the first report showing the anticancer activity of the methanol extracts from the leaves of I. cylindrica in human oral cancer cell line. Our data indicates that ICL extract could be considered as one of the lead compounds for the formulation of anticancer therapeutic agents to treat/manage human oral cancers. The natural abundance of I. cylindrica and its wide geographic distribution could render it one of the primary resource materials for preparation of anticancer therapeutic agents.

• 한국방사선학회논문지
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• 제10권7호
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• pp.483-487
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• 2016

이 연구는 ${\gamma}$선 및 x선 조사 시 AuNPs 입자의 방사선감수성의 향상을 생물물리학적으로 평가하기 위해 두 가지 실험을 시행하였다. 생물학적 방사선 감수성의 평가에 앞서 6시간, 12시간, 18시간, 24시간 incubation한 후 세포생존율(surviving Fraction, SF)값을 비교하여 AuNPs 입자의 독성 여부와 세포질에 입자의 균일 된 분포 여부를 확인 해 보았다. incubation time에 따라 세포생존율(surviving Fraction, SF)이 낮아지지 않음을 확인한 다음 ${\gamma}$선 및 x선 조사 후 Clonogenic assay 실시하고 세포생존율(surviving Fraction, SF)을 구하여 방사선 감수성을 비교 평가하였다. 방사선량 증가 시 세포생존율(surviving Fraction, SF)이 계속해서 낮아졌고 8Gy 조사 시 최대치로 약 30%의 차이가 있음을 확인하였다. 또한 Gate v6.1을 사용하여 몬테카를로 시뮬레이션 후 percent depth dose(PDD)를 구한 뒤 선량 평가하여 약 40% Dose Enhancement가 있음을 확인하였다. 두 가지 실험에 따라 생물물리학적으로 AuNPs 입자는 방사선 감수성이 향상되도록 하며 이는 nanoparticle을 이용한 방사선 병합 치료 시 치료 성적 향상에 큰 도움이 될 것으로 보인다.