• 한국양식학회지
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• 제16권3호
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• pp.165-170
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• 2003

Isolation, cloning and sequencing of red seabream (Pagrus major) somatolactin (rsbSL) cDNA from pituitary gland revealed an open reading frame of 693 bp coding for a pre-growth hormone of 231 amino acids with a 22 amino acid putative signal peptide. Deduced amino acid sequence showed that there was one possible N-glycosylation site at Asn$^{145}$ and seven Cys residues (Cys$_{29}$ , Cys$^{39}$ , Cys$^{66}$ , Cys$^{89}$ , Cys$^{205}$ , Cys$^{222}$ , Cys$^{230}$ ). Except Cys$^{66}$ , others may be involved in disulfide bond formation. The rsbSL presented a 93% amino acid sequence identity with the SL of gilthead seabream (Sparus aurata) and contained the conserved hormone domain region. Expression of rsbSL in E. coli (BL2l) cells and gel analysis revealed a higher molecular weight for rsbSL than expected theoretically, implying posttranslational modifications.

• 한국동물번식학회:학술대회논문집
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• 한국동물번식학회 2001년도 발생공학 국제심포지움 및 학술대회 발표자료집
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• pp.48-49
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• 2001

While transgenic manipulation in mice have been very successful the same is not true for cattle and pigs. The inability to isolate ES cells from the bovine and porcine has precluded the utilization of the gene targeting technology in these species. Fortunately new advances in cloning by nuclear transfer have opened up a unique opportunity to undertake precise genetic modification in cattle and pigs. The ability of a number of different laboratory groups to successfully clone cattle is due to numerous research programs focused on nuclear transfer in cattle, and the enormous base of knowledge developed over the last 20 years involving the application of assisted reproductive techniques in cattle. Successful and repeatable procedures for in vitro oocyte maturation, in vitro fertilization, and in vitro embryo culture are now well established for cattle. In our laboratory we have utilized nuclear transfer to reproduce the genotypes of several animals, selected for cloning based on their inherent genetic value. Results that we have obtained to date are similar to those reported by other laboratories. (omitted)

• 한국동물학회지
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• 제27권2호
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• pp.103-116
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• 1984

유전자 구조 및 유전정보 흐름의 차이로 인하여 고등생물의 유전자를 미생물에 직접 cloning하면 원하는 유전자 산물을 얻지 못하는 경우가 많다. 이것을 극복하기 위해서는 화학적인 방법으로 유전자를 합성하든지, 또는 역제효소를 사용하여 고등생물의 mRNA로부터 유전자를 합성하여 cloning하는 방법을 사용한다. 본 연구에서는 oligo(dT)-cellulose column 방법으로 순수분리한 plasmid pBR322의 Pst I site에 cloning하였다. 우선 AMV reverse transcriptase로 primary cDNA를 합성하고, 알칼리를 처리하여 주형 RNA를 제거했다. 이번에는 이 primary cDNA를 주형으로 Klenow enzyme과 reverse transcriptase를 차례로 처리하여 double stranded DNA를 합성하고, 이 때 5' end 근처에 형성되는 hairpin loop을 Sl nuclease로 제거했다. Terminal deoxynucleotidyl transferase를 사용하여, 합성된 dsDNA에는 poly(dC) track을, Pst I endonuclease를 처리한 plasmid DNA에서는 poly(dG) track을 각각 붙인다음 이들을 서로 annealing시키고 E. coli에 transformation시켜서 크기가 큰 plasmid를 갖는 clone을 cracking 방법으로 일처 선별하였다. 이렇게 선별된 clone을 in 냐셔 hybridization 방법으로 조사하여 globin DNA가 들어간 colony를 이차 선별하고 여러 restriction enzyme으로 잘라보아 globin DNA가 cloning된 것을 확인하였다. 토끼 hemoglobin으로 immunize한 rat (Wistar)에서 뽑은 제일차 혈청과 염소에서 뽑은 제이차 혈청의 antibody를 사용한 radioimmunoassay방법으로, cloning된 globin gene이 대장균내에서 발현되는 지의 여부를 살펴 보았는데, 박테리아의 $\\beta$-lactamase와 토끼의 globin이 결합된 chimeric protein이 대장균 내에서 다량 합성되며, 이 단백질은 토끼 hemoglobin의 antigenic determinant를 가지고 있음을 알 수 있었다.

• 고려인삼학회:학술대회논문집
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• 고려인삼학회 1990년도 Proceedings of International Symposium on Korean Ginseng, 1990, Seoul, Korea
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• pp.65-67
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• 1990

The sequence of ginseng peptide gene was designed and synthesized by the solid phase plasmid pUC19. Escherichia coli JM101 cells were transformed with above hybrid plasmids. Ampicillin resistant transformants were screened and identified by in situ colony hybridization and Southern blot techinques. Finally the gene sequencing was done by the Sanger dideoxy method using primer extension.

• 한국환경과학회:학술대회논문집
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• 한국환경과학회 2002년도 봄 학술발표대회 발표논문집
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• pp.445-447
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• 2002

본 연구는 환경친화적인 biosurfactant를 생산하는 Pseudomonas aeruginosa EMS1 and KH7를 rhamnolipid의 rhlR, rhlA, rhlB를 기초로한 primer를 이용하여 752bp, 802pb, 1280bp pcr을 수행하였으며 $pGEM^{(R)}$ / - T Easy Vector gene cloning 하여 Pseudomonas aeruginosa EMS1 and KH7의 Partial Sequencing를 서로 비교하였다. 이들 실험을 통하여 Pseudomonas aeruginosa의 유전적 구조 및 특성을 비교하여 유전적 조작을 위한 기초적인 자료가 되도록 한다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제14권2호
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• pp.207-209
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• 1990

The sequence of ginseng peptide gene was designed and synthesized by the solid phase phosphoramidiate method. Synthetic segments were isolated, pllrified and joined to the plasmid pUC19. E.icherichiu coli JM101 cells were transformed with above hybrid plasmids. AmpiciIBin resistant transformants were screened and identified by in situ colony hybridization and Southern blot techniques. Finally the gene sequencing was done by the Sanger dideoxy method using primer extension.

• 한국동물번식학회:학술대회논문집
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• 한국동물번식학회 2002년도 춘계학술발표대회 발표논문초록집
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• pp.37-37
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• 2002

The success of embryo cloning depends on numerous factors; interaction between recipient ooplasm and donor nucleus, nuclear reprogramming, oocyte activation, and donor cell cycle and type. In this study, the cell cycle and apoptosis of bovine fetal fibroblast as a donor cell for embryo cloning were evaluated following different activation treatments. (omitted)

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제5권1호
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• pp.22-25
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• 1995

Bacillus licheniformis SSA3 can produce a dark-brown antimutagenic pigment. The optimal conditions for production of this pigment are reached at 0.1% tyrosine, in pH 6-8, within 7-9 days, at $30^{\circ}C$, and in aerobic condition. We cloned a DNA fragment involved in pigment synthesis from Bacillus licheniformis SSA3 using a mutant strain. The cloned DNA was 7kb in size, which can produce the same pigment even in E. coli.

• 한국생명과학회:학술대회논문집
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• 한국생명과학회 2008년도 제49회 학술심포지움 및 국제학술대회
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• pp.55.1-55.1
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• 2008

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1993년도 제2회 신약개발 연구발표회 초록집
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• pp.61-61
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• 1993

사람의 혈액의 백혈구로부터 Polymerase Chain Reaction 방법으로 $\beta$$_2$-adrenergic receptor 유전자를 증폭하였다. 이 증폭된 유전자를 pbluescript KS(＋)에 cloning하였으며, 제한효소지도 작성과 부분적인 염기배열 확인으로 증폭된 유전자가 사람의 $\beta$$_2$-adrenergic receptor 유전자임을 확인하였다. $\beta$$_2$-adrenergic receptor 유전자를 N말단의 아미노산이 21개 제거되도록 결손시킨후 yeast의 pSec5의 Killer toxin signal sequence의 뒤에 in-frame으로 연결하였다. 현재 효모에서의 발현양상 및 발현된 단백질의 활성을 조사중이다.