산국과 감국의 용매분획물과 sesquiterpenoid lactones, Compound I, II를 4종의 미생물에 대하여 항균실험을 하였다. 이 중에서 산국의 chloroform분획과 sesquiterpenoid lactones, Compound I에서 B. subtilis과 V. parahaemolyticus에 대하여 항균력이 있었다. 그리고 야생감국의 chloroform분획과 sesquiterpenoid lactones 에서는 항균력이 산국보다 약하게 나타났으며, Compound II와 재배감국의 모든 분획은 미생물에 대하여 항균력이 전혀 나타나지 않았다.
Chrysanthemum boreale Makino is widely distributed in Korea, China, Japan and Southeast Asian countries. C. boreale is one of the herbs used for treating various inflammatory diseases in oriental medicine. The present study was conducted to identify biologically active compounds from the leaves and stems of C. boreale. We isolated two sesquiterpene sactones from the leaves and stems of C. boreale using silica gel column chromatography and recyclic high perfomance liquid chromatography. The lactones were characterized by their spectroscopic data (NMR, IR, MASS). These compounds were subjected to Farnesyl Protein Transferase (FPTase) inhibition, Nitric Oxide (NO) release inhibition and apoptosis inhibition. The structur of the following isolated compound were elucidated 8,10-${\small{O}$-Acetyl-2-methoxy-10-hydroxy-3,11(13)-guaiadiene-12,6-olide and 4,10-dihydroxy-8-${\small{O}$-Acetyl-2,11(13)-guaiadiene-12,6-olide. In the NO release inhibition assay, compound 2 showed strong activities, with an $IC_{50}$ value of $7{\mu}g/mL$, whereas compound 1 did not exhibit significant activity with an $IC_{50}$ value of over $14{\mu}g/mL$ against murine macrophage.
Chrysanthemum boreale Makino (C. boreale) is widely distributed in Asian countries, and has traditionally been used to treat various inflammatory diseases including bronchitis. In this study, we aimed to isolate biologically active compounds from leaves and stems of C. boreale. Chemical components were purified by column chromatograpy and recyclic HPLC, and characterized from their spectral data (IR, MS, NMR). Biological activity experiments were conducted for Farnesyl-protein transferase (FPTase) activity, apoptosis and nitirc oxide (NO) release. As a results, three sesquiterpene lactones were isolated. Compound 1 (4-methoxy-8-O-acetyl-10-hydroxy-2,11(13)-guaiadiene-12,6-olide) showed strong cytotoxic activities having an average growth inhibition of 50% ($GI_{50}$) value of $1.89{\mu}g/m{\ell}$ against human colon adenocarcinoma cells. Compound 1 also showed a low half maximal inhibitory concentration ($IC_{50}$) value of $10{\mu}g/m{\ell}$ for NO release. In the caspase 3 activity, compound 1 and compound 2 (8-O-(2-carbonyl-2-butyl)-3,10-dihydroxy-4,11(13) -guaiadiene-12,6-olide) exhibited 94% and 90% apoptosis inhibition activity, respectively. Compound 3 (4,8-O-diacetyl -10-hydroxy-2(3),11(13)-guaiadiene-12,6-olide) showed a strong inhibitory effect on FPTase activity with 90% inhibitory activity at a concentration of $100{\mu}g/m{\ell}$. These results clearly show the presence of lactone compounds in the leaves and stems, which may partially contribute to the pharmacological activity of C. boreale.
The effect of the essential oil obtained from Chrysanthemum boreale Makino on the apoptosis of KB cells was investigated. Cytotoxicity and cellular DNA content were analyzed by MTT assay, flow cytometry, agarose gel electrophoresis, and Hoechst 33258 staining. The caspase-3 and poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) proteins were estimated by Western blotting method. The various cytotoxic effects of the essential oil which are hallmarks of apoptosis, including DNA fragmentation, apoptotic body formation, and sub-G1 DNA content, all progressed in a dose-dependent manner. Treatment with an apoptosis-inducing concentration of the essential oil caused rapid and transient induction of caspase 3 activity. Further, the efficacious induction of PARP cleavage and caspase-3 activation was observed at an essential oil concentration of 0.1 and 0.2 mg/mL for 12 hr.
Effects of water extract obtained from Chrysanthemum boreale M. (CE) on serum enzyme activities and Kupffer cells of carbon tetrachloride ($CCl_4$)-induced rats were investigated. Thirty-two healthy male Sprague-Dawley rats were divided into normal (N), $CCl_4$-induced (T), CE-supplemented (C), and $CCl_4$-induced and CE-supplemented (TC) groups. $CCl_4$ injection significantly increased aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, lactate dehydrogenase, and alkaline phosphatase activities in serum. Significant increases in total cholesterol and triglyceride concentrations were also observed in $CCl_4$-induced rats. Oral administration of CE at 300 mg/kg body weight significantly decreased serum enzyme levels and suppressed $CCl_4$ hepatotoxicity-induced lipid profile changes. Histological findings showed fatty change, fibrosis and increased number of Kupffer cells in T group. Electron microscopic examination showed increased lysosome content and dilation of rough endoplasmic reticulum within Kupffer cells in T group, whereas CE supplement attenuated liver injury in $CCl_4$-induced liver. These results indicated CE could significantly alleviate CC4-induced hepatotoxicity injury.
감국, 산국 및 구절초꽃 열수추출물에 덱스트린과 말토덱스트린 부형제의 첨가량을 달리하여 분말차를 제조하고 이의 품질특성과 관능특성을 평가하였다. 국화차 분말의 흡습성은 국화 품종별 덱스트린 단독 첨가구에서 가장 높았으며, 부형제의 종류 및 첨가량에 따라 유의적인 차이를 보였다. 용해도는 덱스트린과 말토덱스트린을 8:2로 혼합한 처리구에서 당도 변화가 크게 나타났다. 국화 분말차의 색도는 부형제에 따른 차이는 없었으나, 덱스트린과 말토덱스트린을 9:1로 혼합한 첨가구에서 명도를 나타내는 L값이 높게 나타났으며, 국화 분말차의 pH는 $5.33{\sim}5.63$ 범위를 보였다. 갈변도와 탁도는 품종, 부형제의 종류 및 농도에 따라 유의적인 차이를 나타내었으며, 환원당 함량은 국화 품종별로 덱스트린과 말토덱스트린을 8:2로 혼합한 처리구에서 높았다. 총폴리페놀 및 플라보노이드 함량과 총 항산화력은 산국 분말차가 각각 $6.47{\sim}6.75$, $1.95{\sim}1.99$ 및 $4.37{\sim}4.55\;mg/g$ 범위로 감국과 구절초 분말차보다 높았고 전자공여능은 감국 분말차가 $24.85{\sim}27.93%$로 산국과 구절초 분말차보다 높았다. 관능평가에서 색과 향은 유의적인 차이를 보이지 않았으며, 산국의 경우 쓴맛에 대한 낮은 평가로 인하여 전반적으로 기호도가 낮게 평가되었다.
산국(Chrysanthemum boreale M.)은 국화과에 속하는 다년생 식물이며 우리나라에 널리 분포하는 자생식물자원으로서 오래 전부터 식용과 약용으로 널리 이용되어 왔다. 최근 건강에 대한 관심이 고조되면서 산국의 수요가 급증하고 있으나 자연채집을 위주로 하기 때문에 공급을 충당하지 못하고 있는 실정이다. 본 연구에서는 우수품질의 산국을 대량생산하기 위해 질소시비반응 시험을 실시하였다. 처리구는 질소수준에 따라 6처리구(0, 50, 100, 150, 200, $250kg\;ha^{-1}$)로 설정하였다. 이때 모든 처리구에서 기본적으로 $P_2O_5-K_2O=80-80kg\;ha^{-1}$을 시비하였다. 그 결과, 질소의 시비량이 증가할수록 수량이 증가하였다. 전체 산국을 건물중으로 하여 회귀곡선을 통해 추정한 결과 N $246kg\;ha^{-1}$였으며, 꽃의 수량은 N $226kg\;ha^{-1}$이였다. 꽃의 주요 아미노산은 proline이였고 질소의 시비량이 증가할수록 아미노산의 함량이 증가하였다. 이때 질소의 이용율은 41.5-61.8%였고 N100처리구에서 가장 높았다. Sespuiterpene계 화합물로서 우수한 혈압강하효과를 가지고 있는 물질인 Cumambrin A의 함량은 식물부위 중 꽃에 가장 많이 함유되어 있었다. 질소의 시비량이 증가할수록 Cumambrin A의 함량이 다소 감소하였으나 통계적 유의성은 인정되지 않았다. 꽃에서 Cumambrin A의 전체 함량은 산국의 수량증가에 따라 질소 시비량이 증가할수록 증가하는 경향을 보였다. 따라서 유효성분이 많이 함유된 양질의 산국재배를 위해 질소의 적정시비량은 $225{\sim}250kg\;ha^{-1}$ 수준으로 판단되었으며 포장시험을 통한 현장입증시험이 있어야 할 것으로 판단된다.
우수한 자생식물자원인 산국의 수량과 유효성분을 높이기 위해 식물생장조절제 ABA와 SA를 처리한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 꽃의 건물수량은 ABA, SA과 ABA+SA 처리구에서 무처리구보다 증가되었으며, ABA 처리구보다는 SA 처리구가 증수되었다. 2. 무기성분의 함량변화는 SA 처리구가 다른 처리구들에 비하여 질소, 인산, 마그네슘의 함량이 증가하였으나 칼륨의 흡수는 오히려 감소하였다. 3. 아미노산함량은 SA 처리구와 ABA+SA 처리구는 ABA 처리구보다 높았다. 4. 생장조절제처리는 정유함량을 증가시켰으며, 그 반응은 monoterpenoid계 화합물보다는 sesquiterpennoid계 화합물에서 더 민감하였다. 5. Cumambrin A의 함량은 ABA 처리구에서 증가하였고, SA 처리구에서는 차이가 없었다.
The methanol extract from the whole parts of the flowers of Chrysanthemum boreals was found to exhibit a significant inhibition of a rat lens aldose reductase (RLAR) activity in vitro. Bioassay guided systematic fractionation of the methanol extract led to the isolation of four flavonoids which were identified as acacetin (1), apigenin (II), luteolin (III) and linarin (IV). Compounds I-III were demonstrated to exhibit a significant inhibition of RLAR. Luteolin (II) was found to be the most potent AR inhibitor with $IC_{50}$ value of $5{\times}10^{-7}M$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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