• 생명과학회지
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• 제18권4호
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• pp.585-589
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• 2008

Actin cytoskeleton rearrangement를 조절하는 cofilin은 인산기가 제거되면서 활성화되는데 이를 담당하는 효소가 chronophin이다. 이 효소는 비타민 $B_6$의 활성형태인 pyridoxal 5'-phosphate (PLP)의 세포 내 농도를 조절하는 PLP phosphatase로도 알려져 있다. Chronophin은 cap 도메인과 core 도메인을 갖는 HAD family에 속하는 phosphatase이며 다른 HAD phosphatase와 같이 기질결합을 위해 cap 도메인과 core 도메인 사이의 활성부위가 노출되는 열린 형태로의 전환이 있을 것으로 추정되었다. 이전의 밝혀진 chronophin/PLPP의 결정구조에서는 단백질의 결정화과정이 산화된 상태에 이루어졌기에 cap 도메인의 C91과 core 도메인의 C221 사이에 disulfide bond가 있었으며 이것이 cap 도메인과 core 도메인사이의 움직임을 막고 있었다. 본 연구에서는 환원된 상태의 chronophin의 결정체를 얻어 chronophin의 구조를 규명하였다. 환원된 상태의 chronophin의 구조에는 C91과 C221간의 disulfide 결합은 없었으나 산화된 상태와 동일한 닫힌 형태이었으며 국부적인 core 도메인의 움직임이외에는 core 도메인과 cap 도메인의 구조에는 변화가 없었다. 이는 chronophin이 기질이 없는 상태에서 닫힌 형태로 유지되는 것이 disulfide bond에 의한 것이 아님을 의미하며 세포 내의 환원된 상태에서도 닫힌 구조를 유지함으로서 높은 기질 특이성을 보여줄 것임을 암시한다.

• BMB Reports
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• 제50권6호
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• pp.335-340
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• 2017

Although doxorubicin (Dox)-induced oxidative stress is known to be associated with cytotoxicity, the precise mechanism remains unclear. Genotoxic stress not only generates free radicals, but also affects actin cytoskeleton stability. We showed that Dox-induced RhoA signaling stimulated actin cytoskeleton alterations, resulting in central stress fiber disruption at early time points and cell periphery cortical actin formation at a later stage, in HeLa cells. Interestingly, activation of a cofilin phosphatase, chronophin (CIN), was initially evoked by Dox-induced RhoA signaling, resulting in a rapid phosphorylated cofilin turnover leading to actin cytoskeleton remodeling. In addition, a novel interaction between CIN and $14-3-3{\zeta}$ was detected in the absence of Dox treatment. We demonstrated that CIN activity is quite contrary to $14-3-3{\zeta}$ binding, and the interaction leads to enhanced phosphorylated cofilin levels. Therefore, initial CIN activation regulation could be critical in Dox-induced actin cytoskeleton remodeling through RhoA/cofilin signaling.