단마와 장마 영여자에 대한 항산화 및 항돌연변이원성을 비교 평가하였다. 단마와 장마 영여자 80% 메탄올의 폴리페놀함량은 2.2 와 3.9 mg/g로 장마에서 높았다. 또한 분획물에 있어서는 장마 영여자 에틸아세테이트 분획물에서 가장 높은 함량을 나타냈다. 그리고 DPPH과 ABTS 라디칼소거능 및 지질과산화 억제효과에 있어서는 총폴리페놀이 높은 장마와 에틸아세테이트 분획물에서 가장 높은 활성을 나타냈다. 한편 단마와 장마 영여자 80%메탄올 추출물 1mg/plate의 1-NP, $AFB_1$, Trp-P-1에 대한 항돌연변이원성은 $S.$$typhimurium$ TA98($his$D3052)에서 37.5, 24.5, 37.9% 돌연변이 억제효과를 나타내었으며, 장마 영여자는 31.7, 53.9, 56.85%의 돌연변이 억제효과를 나타냈다. 또한 분획물 중에는 단마와 장마 영여자 클로로포름과 에틸아세테이트 분획물에서만 돌연변이 억제효과를 나타내었으며, 농도 의존적으로 증가하였다.
흑마늘의 기능성을 분석하기 위하여 용매별 계통 분획물을 만들어 100, 250, 500 및 $1,000\;{\mu}g/mL$ 농도에서 항산화 활성을 측정하였다. 총 페놀 및 플라보노이드 화합물의 함량은 chloroform, ethyl acetate 및 hexane 분획물에서 유의적으로 높아 butanol, methanol 및 물 분획물에 비하여 5.5~11.6배 더 많았다. 흑마늘 계통 분획물의 항산화 활성은 시료의 첨가농도가 증가함에 따라 그 활성도 증가하였으며, chloroform과 ethyl acetate 분획물의 활성이 유의적으로 높았다. DPPH 라디칼 소거능은 $1,000\;{\mu}g/mL$ 농도에서는 butanol과 물 분획물을 제외한 모든 시료 모두에서 50% 이상의 활성을 나타내었다. ABTS 라디칼 소거능의 경우 hexane, chloroform, ethyl acetate 분획물에서 비교적 활성이 높아, $1,000\;{\mu}g/mL$ 농도에서는 70% 이상의 소거능을 보였다. $1,000\;{\mu}g/mL$ 농도에서 hydroxyl radical 소거능은 50.27~81.02%의 범위로 높은 반면 SOD 유사활성은 26.73~47.64%로 비교적 그 활성이 낮았다. Linoleic acid 반응계에서 항산화 활성을 측정한 결과 저장기간이 길수록, 시료의 첨가 농도가 높을수록 항산화 활성이 더 높았으며, 또 극성 용매보다는 비극성용매 분획물의 활성이 유의적으로 높았다. 아질산염 소거능의 경우 butanol 분획물을 제외한 모든 시료에서 비교적 그 활성이 높아 $100\;{\mu}g/mL$ 농도에서도 50% 이상의 소거능을 보였다.
Objectives : In the present study, we investigated anti-inflammatory effects of chloroform fraction of Coptidis rhizoma (CR-C) on the production of inflammatory mediators such as nitric oxide (NO) and proinflammatory cytokines, tumor necrosis factor-alpha (TNF-${\alpha}$) and interleukin-1beta (IL-1${\beta}$) in LPS-stimulated BV2 microglial cells. Methods : Copriditis rhizoma was extracted with 80% methanol, and then extracted with chloroform. BV2 cells were pre-treated with CR-C, and stimulated with LPS. The cytotoxicity was determined by MTT assay. The production of NO and cytokines was measured by Griess assay and ELISA. The mRNA expression of inducible nirtic oxide synthase (iNOS) and cytokines were determined by RT-PCR. Results : CR-C significantly inhibited the production of NO. TNF-${\alpha}$ and IL-1${\beta}$ in a dose-dependent manner in LPS-stimulated BV2 cells. In addition, CR-C suppressed the mRNA expressions of iNOS and inflammatory cytokines induced by LPS stimulation. These results indicate that CR-C was involved in anti-inflammatory effects in activated microglia. Conclusion : The present study suggests that chloroform extract of Coptidis rhizoma can be useful as a potential anti-inflammatory agent for treatment of various neurodegenerative diseases.
Ames test (S. typhimurium TA98, TA100)에서 6종의 직접변이원에 대한 가시오갈피(뿌리, 줄기, 잎)의 메탄을 추출물 및 용매 분획물의 항돌연변이 효과를 고찰하였다. Salmonella typhimuriun TA98, TA100에서, 6종의 직접변이원으로 유도된 각각의 변이원성에 대한 가시오갈피 뿌리, 줄기 및 잎의 메탄을 추출물의 돌연변이 억제효과를 검색한 결과 1-nitropyrene의 변이원성에 대하여 선택적으로 강한 억제효과를 나타내었다. 따라서 1-nitropyrene 변이원의 돌연변이원성에 대한 용매분획물의 활성을 비교한 결과 클로로포름 분획물이 가장 강한 억제효과를 나타내었다. S. typhimurium TA98, TA100에서, 뿌리의 클로로포름 분획물은 세포내 항돌연변이 효과를 강하게 나타낸 반면 줄기와 잎은 세포내 돌연변이 억제효과를 나타내지 않았다. 이 결과로부터 가시오갈피 뿌리에는 주로 세포내 항돌연변이 효과를, 줄기와 잎에는 세포외 항돌연변이 효과를 강하게 나타내는 활성 성분이 함유되어 있음을 알 수 있었다.
The anti-mutagenic effect of Orostachys japonicus (OJ) toward aflatoxin (AFB$_{1}$) and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) in the Salmonella assay system was studied. The methanol extract of OJ inhibited the mutagenicity induced by AFB$_{1}$ about 97% when 5% of the extract added to the system. Butanol fraction from the methanol extract was the most effective against AFB$_{1}$. However, other fractions of hexane, chloroform, and ethylacetate also showed considerable antimutagenic activity against AFB$_{1}$. Several identified compounds from the fractions of OJ exhibited anti-mutagenic effect. $\beta$-Sitosterol, astragalin and kaempferol-3-rhamnosyl-7-glucoside were selected from the compounds, and these compounds inhibited the mutagenicity dose-dependently. These 3 compounds also decreased the mutagenicity induced by MNNG. From these results, it is suggested that the major compounds such as triterpene, sterol and flavonoid in the OJ were responsible for the inhibition of the AFB$_{1}$ and MNNG-induced mutagenicities.
Paeonia japonica var. pilosa $N_{AKAI}$, (PJ; Baek-Jak-Yak) is a medicinal plant which has been widely used as a component or blood-building decoctions. This study was performed to investigate the immunomodulative effects of PJ in mice, using in vitro and in vivo experiments. The immunomodulative effects were studied in vitro by determining the proliferation or mice splenocytes and the production of three kinds of cytokines (IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$) by mire peritoneal macrophages which were cultured with sequential fractions of PJ methanol extract (methanol, hexane, chloroform, ethylacetate, butanol and water). In an in vivo experiment using mice, different concentrations of PJ water extract were orally administrated every other day for two weeks. The production of cytokines (IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$) secreted by activated macrophages, and the proliferation of mice splenocytes, were used as indices for immunocompetence. In vitro supplementation using a hexane fraction of PJ in the range of 1 to 100 $\mu$ g/ml enhanced splenocyte proliferation by 1.8 to 12%, and by 10-15% using an aqueous fraction, compared to the control. IL-l$\beta$ production was significantly increased with the supplementation of butanol, hexane and water extracts of PJ Higher levels of IL-6 production were detected with supplementation of chloroform or water extracts. However, there were no significant differences in the production of TNF-$\alpha$ among the treated groups and the control. From the in vivo study, the highest proliferation of splenocytes was seen in the mice orally administrated with the PJ water extract at the concentration of 500 mg/kg body weight. In the case of cytosine production, IL-1-$\beta$, IL-6, and TNF-$\alpha$ released by activated peritoneal macrophages were augmented by the oral administration of a PJ water extract. These results indicate that Pl may enhance the immune function by regulating splenocyte proliferation and cytokine production capacity in mice.
국내 식물자원 30 가지의 항산화활성을 탐색한 결과 방아잎, 형개, 택란의 methanol 추출물에서 높은 활성을 확인하였다. 그 중에서 항산화활성이 가장 높은 방아잎의 건조분말을 methanol로 환류냉각 추출하여 hexane chloroform, ethyl acetate, water 순으로 용매분획한 결과 ethyl acetate 분획에서 가장 높은 항산화활성을 확인하였으며, 이를 농축한 다음 Sephadex LH-20으로 chromatography하여 순수물질을 얻었다. 이물질을 ESIMS로 분석한 결과 분자량이 360임을 확인하였고, IR과 UV spectra에 의해서 phenol계 화합물임을 확인하였으며 NMR 분석에 의해서 이 항산화물질이 rosmarinic acid임을 확인하였다. 이 물질의 항산화활성을 검정한 결과 돈지와 팜유에 대해서 BHT나 ${\alpha}-tocopherol$보다도 우수한 지질과산화 억제효과를 나타냈다. 방아잎의 methanol추출물의 항산화력은 rosmary의 methanol 추출물과는 비슷하였으나, sage의 methanol추출물 보다는 높게 나타났다.
예로부터 약용으로 이용되어온 헛개나무 잎을 이용하여 항돌연변이원성 및 암세포 성장 저해효과를 조사하였다. 헛개나무 잎의 돌연변이 억제 효과를 Ames test로 검색한 결과, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 분획물 그 자체의 돌연변이원성은 없었으며, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물은 직접 변이원인 N-methyl-N#-nitro-N-nitroso-guanidine(MNNG)와 간접변이원인 benzo(a)pyrene(B(a)P)의 돌연변이 유발성을 크게 저해하였다. 또한 메탄올 추출물에서 분리한 분획물들도 유의성 있는 돌연변이 억제효과를 나타내었으며 특히 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물의 경우는 물 분획물보다 MNNG와 B(a)P에 대해서 더 큰 항돌연변이 효과를 나타내었다. 그리고 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 그 분획물들의 사람의 암세포주인 HT29와 HepG2에 대한 성장 저해 효과를 MTT assay로 검토한 결과 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 헥산, 클로로포름 분획물들이 높은 암세포 성장 저해 효과를 나타내었으며 농도 의존적인 경향을 보였다. 그러나 사람의 정상 간세포인 Chang cell에서는 세포독성이 나타나지 않았다. 이상의 실험 결과로 헛개나무 잎은 발암물질로부터 생체를 보호하는 물질을 함유하고 있을 것으로 사료된다.
Objective : This study was designed to investigate the anti-oxidative potentials to wide the usage of Morus alba L. derived from medicinal herbs on cosmoceutical fields. Methods : Anti-oxidative potentials were investigated by using several kinds of assays including electron donating ability, and the total contents of phenolic compounds were also measured. In some cases TLC (Thin Layer Chromatography) method were used to identify the patterns of phenolics in herbal extracts. Results : Aurones which are sub-types of flavonoids were observed in methanol extract of Mori Cortex Radidus, and total phenolic contents in Mori Cortex Radidus were more than in methanol extracts of Mori Folium and Mori Ramulus. Various kinds of phenolic compounds were observed in chloroform fraction of Mori Cortex Radidus. Conclusion : According to these results, the chloroform fraction of Mori Cortex Radidus could be the most possible resource that has potentials on anti-oxidant agents on cosmoceutical fields.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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