Objectives : Gram-positive bacteria have became increasing resistant to antibacterial agents, and hence multi-drug-resistant bacterial pathogens are now a major problem in clinical medicine. There is, therefore, a need for new antibacterial agents. In the course of our screening program for potent antibacterial agent from medicinal plants, the extract of Salvia miltiorrhiza (S. miltiorrhiza) showed antibacterial activity against methcillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and antibiotic-resistant S. aureus. Methods : S. miltiorrhiza was extracted with 80$\%$ EtOH. The extract was suspended in H2O and fractionated successively with hexane chloroform, ethyl acetate, and n-buthanol. The chloroform fraction, which showed the highest antibacterial activity(MICs, 78㎍/ml) against MRSA, was chromatographed on a silica gel column and recycling prep-LC to give the pure antibacterial component. Results and Conclusions : The second fraction among the chloroform soluble portion of an aqueous EtOH extract of S. miltiorrhiza root showed outstanding antibacterial activity against MRSA and antibiotic-resistant S. aureus compared to the other fraction. An active compound was isolated from the second fraction using silica gel column chromatoraphy and recycling prep-LC. Based on these data together with the IH-, 13C-NMR, mass and mp, the active compounds were identified tanshinone Ⅰ, dehydrotanshinone Ⅰ and cryptotanshinone. Among tanshinones, cryptotanshinone and dihydrotanshinone Ⅰ MICs against MRSA and antibiotics-resistant S. aureus were 12.5, 12.5 and 6.3㎍/ml, respectively.
This study was designed to determine the antioxidant activity of solvent fractions of broccoli sprouts grown by controlling the growing environment at the plant factory system. Fractionation was achieved with chloroform, n-hexane, ethyl acetate, butanol, water by 70% EtOH extract of the broccoli sprouts. Each solvent fraction was put through TLC and HPLC to separate active components. Higher antioxidant activities were observed for the butanol and ethyl acetate layers. Further evaluation of each of the 5 layers (LH1 to LH5) of the butanol fraction showed that the refined LH3 extract had a high antioxidant effect. Components with similar Rf values from TLC had the same retention times and peaks in the HPLC analysis. It was also determined that the sulforaphane content was high at the chloroform and butanol layers and the sulforaphane was responsible for, the high antioxidant activity. Thus, to use for functional materials, the butanol extract/layer of broccoli sprouts is recommended as the most effective.
This study was carried out to investigate the antibacterial activity against pathogens of acne and the anti-inflammatory effect of 75% ethanol extract and its fractions from the leaves of Prunus sargentii. In the antibacterial activity by the disc diffusion assay, the extract showed the highest effect against Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis in 5 mg/disc. However, the ethyl acetate fraction showed the highest antibacterial activity in 1 mg/disc. On the other hand, the hexane and chloroform fraction showed strong nitric oxide (NO) production inhibitory effect in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated Raw 264.7 cell. In the cell viability of Raw 264.7 by MTT assay, the extract and all fractions were exhibited normal viabilities as nontoxic result. Consequently, the extract from the leaves of P. sargentii and its ethyl acetate fraction could be applicable to functional materials for antibacterial activity related fields. Moreover, the hexane and chloroform fraction could be applicable to candidate materials as anti-inflammatory agent.
전통기호음료성분에 의하여 나타나는 기능특성을 조사하기 위한 연구의 일환으로 결명자의 메탄올 추출물을 유기용매에 의한 분획, silica gel column chromatography, thin layer chromatography에 의하여 여러가지 획분으로 분획하여 아질산염 소거작용을 조사한 결과, 아질산염 소거율은 ethyl acetate 획분>chloroform 획분>수용성 획분>ethyl ether 획분의 순으로 나타났으며, ethyl acetate 획분에서 분리한 compound D의 아질산염 소거효과는 매우 강력하여 ascorbic acid보다 10배 뛰어났다.
The study was carried out to evaluate the antimutagenic and anticancer effects of small water dropwort. The methanol extracts from small water dropwort significantly reduced the mutagenicity induced by aflatoxin $B_1\;(AFB_1)$ and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) in Salmonella typhimutium TA 100. Also, the methanol extracts inhibited the growth of AZ-521 human gastric cancer cells and HT-29 colon cancer cells. The chloroform fraction from methanol extracts of small water dropwort inhibited $40\;to\;80\%$ of the mutagenicity by $AFB_1$ in Sal. typhimurium TA 100 by the addition of 2.5 to $10\%$. To separate active compounds, the chloroform fraction was subjected to column chromatography on a silica gel and separated into five fractions. Among the five fractions, fraction 4 showed the highest antimutagenic effect against $AFB_1$ and an anticancer effect in the HT-29 colon cancer cell. As the result of the analysis in GC-MS, 1-napthalene carbonitrile, 5,6,7,8-tetrahydrol and benzene, 1,1'-(1,4-pentadiene-1,5-diyl) bis-,(E,E) were identified potentially from fraction 4.
The rhizoma of Zingiber officinale has been used as antiemetic, expectorants, stomachache relieving drugs and digestive accelerators. From the observation of antigastritic action of the methanol extract of the rhizoma, it was fractionated with hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol, followed by bioassay on antigastritic and antiulcerative activity. The hexane and the chloroform fraction reduced significantly HCl ethanol induced gastric lesion at the dose of 370 and 210 mg/kg, p.o., respectively. On the gastric ulceration and gastric secretion in pylorus-ligated rats, the hexane fraction decreased the volume of gastric secretion and acid output, and also increased pH at the dose of 370 mg/kg, i.d.. It showed considerable curative ratio of acetic acid induced ulcer without inhibition of indomethacin induced gastric lesion. The methanol extract showed low acute toxicity with minimum lethal dose of more than 3000 mg/kg, p.o. in mice. In conclusion, Zingiberis rhizoma exhibited antigastric and antiulcerative activity which might be attributable to inhibition of gastric secretion. It is revealed that the active component may be present in the hexane fraction.
Abu Affan, Md.;Karawita, Rohan;Jeon, You-Jin;Lee, Joon-Baek;Kang, Do-Hyung;Park, Heung-Sik
한국해양바이오학회지
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제2권3호
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pp.174-186
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2007
Amphora coffeaeformis and Achnanthes longipes are commonly found as dominant benthic microalgae in Jeju coastal water throughout the year. In order to investigate pharmaceutical uses of these diatoms, each single species was isolated with micropipette under phase contrast microscope and subcultured with synthetic seawater media which was enriched with F/2 media, trace metal solution and $Na_2SiO_3$). Growth characteristics of these species were also determined with different combination of salinity, nutrients concentration and temperature. Thereafter, mass culture of each species was done based on the maximum growth condition. Biomass was collected after two weeks of mass culture and freeze dried for antioxidant study. The antioxidant properties of different fractions (n-hexane, chloroform and ethylacetate) obtained by solvent fractionation of 80% methanolic extract of two microalgae were investigated for free radical, reactive oxygen species scavenging (Super oxide, Hydrogen peroxide, Hydroxyl radical and Nitric oxide), metal chelating and lipid peroxidation inhibition activities. All fractions of A. longipes showed higher $DPPH^{\cdot}$ (free radical) scavenging activities (n-hexane: 89.0%, Chloroform: 76.0%, Ethylacetate: 66.0%, Methanol: 90.6% and aqueous residue: 63.0%). N-hexane fraction of A. longipes showed significantly higher activity (49.0%) on nitric-oxide. Ethylacetate fraction of A. longipes and aqueous residue of A. coffeaeformis exhibited 64.0% and 75.6% metal chelating activity which was higher than commercial antioxidants (${\alpha}$-tocopherol: 18.0% and BHT: 16.0%). The n-hexane fraction of A. coffeaeformis had 67.5% activity on $DPPH^{\cdot}$. Chloroform and n-hexane fractions of A. coffeaeformis exhibited 46.2% and 47.6% $H_2O_2$ scavenging effects which were closely similar to commercial antioxidants (${\alpha}$-tocopherol: 49.2% and BHT: 58.6%). Chloroform and ethylacetate fractions of A. longipes and fraction of n-hexane and chloroform of A. coffeaeformis showed better lipid peroxidation activities than ${\alpha}$-tocopherol. These data suggest that both organic and aqueous fractions have good antioxidative compounds with different antioxidant properties.
본 실험은 Propolis ethanol 추출물과, chloroform, ethyl acetate, butanol 등 4가지 용매로 더 추출한 분획틀을 이용하여 DPPH radical 소거능 실험과 항진균활성을 알아보았고, 고체배지 및 액체배지에서 항진균활성을 측정하였다. 또한 luciferase mRNA를 이용한 in vitro translation으로 이들 추출물에 의한 단백질합성에의 영향을 검토하였다. 첫 번째로, 액체배지에서의 항진균 활성을 실험한 결과 Candida glabrata, Candida lusitaniae 그리고 Cryptococcos neoformans 등의 성장저해율이 chloroform 분획 존재하에서 각각 39%, 41%, 48% 이었으며 ethyl acetate 분획 존재하에서 각각 25%, 24%, 13%로 측정되었다. 이 결과는 ethyl acetate 분획에 비해 chloroform 분획에 진균 성장 저해물질이 가장 많이 존재함을 나타낸다. 두 번째로, 동일한 비율로 희석한 프로폴리스 분획물들과 합성 항산화제인 BHT의 수소공여능을 비교하였을 때 Ethanol 추출물의 수소공여능은 합성항산화제인 0.1% BHT의 수소공여능보다 높았으며, 분획들 중에서 chloroform 분획이 가장 수소공여능이 높았다. 세 번째로, luciferase mRNA를 이용한 in vitro, translation 실험에서는 Propoliis ethanol 추출물이 단백질합성을 저해하는 것으로 관찰되었다. Propolis 분획물들 중에서 chloroform 분획이 단백질 합성을 가장 많이 저해하였다. 이와 같은 결과는 chloroform 분획물이 다른 분획에 비해 수소공여능, 진균성장 저해율 및 단백질합성 저해활성이 가장 큰 것으로 보여지므로 이 분획물에 대한 생화학적인 연구가 요구된다.
In the present study, we have evaluated cytotoxic effects of the chloroform soluble fraction of the methanolic extract of Perilla frutescens in human oral epitheloid carcinoma cells. The light microscopic study showed morphological changes of the treated cells. Cell membrane damaging activity was measured by the lactate dehydrogenase (LDH) assay and disruptions in cell organelles were determined by 3-(4,5-dime-thylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT), neutral red (NR) and sulforhodamine protein B (SRB) of colorimetric assay. These results suggest that Perilla frutescens retains a potential antitumor activity.
본 실험은 인진쑥의 용매 분획물에 대하여 항균활성을 검색하였다. 이에 따라 가장 항균활성이 좋은 인진쑥의 클로로포름 분획물을 가지고 항균활성실험을 진행하였고, 기능성 물질인 페놀류의 함량 정도에 따라 항균활성을 보여주는 지에 대하여 총 폴리페놀과 총 플라보노이드 함량을 분석하였고, in vivo 실험을 통하여 장내미생물 균총의 변화를 확인하였다. 인진쑥 에탄올 추출물을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올로 분획하여 용매 분획물을 가지고 항균활성을 검색한 결과, paper disc agar diffusion법에서 장내유해균인 C. perfringens, C. difficile, E. limosum 및 B. fragilis 모두가 다른 용매 분획물들에 비해 클로로포름 분획물에서 생육 억제환의 크기가 가장 크게 생성되었다. 장내유익균인 B. bifidum, L. acidophilus는 인진쑥의 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올, 물 분획물에서 억제환이 생성되지 않은 결과를 보여주었다. 동물실험 결과, 인진쑥 추출물은 일반식이군에 비하여 비만식이군에서 장내유해균을 억제하고 장내 유익균을 증진시키는 결과를 보여주었다. 상기 결과들을 종합해 볼 때, 인진쑥 추출물은 장내 유해균은 억제시키고, 장내 유익균은 증식시키거나 별다른 영향을 주지 않는 결과, 인체 장내 균총 조성을 바람직한 방향으로 개선시켜 장내 기능을 향상시킬 수 있을 것으로 기대되고 인진쑥 추출물의 장내유해세균에 대한 항균효과를 확인함으로써 장내균총 개선을 위한 기능성식품으로 활용할 가치가 있는 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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