Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2002.11b
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pp.52-52
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2002
Chitosan is a key compound of shrimp waste. It is a biopolymer, which is widely used in the field of medical Sciences. Chitosan-TPP (Tripolyphosphate) complex has more or less similar physical properties as Ca-alginate which can be used for the production of synthetic seeds. Possibility of the use of Chitosan-TPP complex as a matrix for encapsulation of somatic embryos was tested against the Ca-alginate complex (2.5w/v Na-alginate, 100mM CaCl2 at pH 5.5). Somatic embryos grown in the induction medium (IM) were drawn into the viscous chitosan solution (1%) and mixed well by inverting the tube carefully. Then the mixture was dropped at regular intervals into the tripolyphosphate (TPP) solution kept on a magnetic stirrer for bead formation. Synthetic seeds formed were washed and transferred into the incubation medium, then allowed either to air-dry or freeze-dry.(중략)
2 (Langmuir, Freundlich, Elovich, Temkin, and Dubinin-Radushkevich) and 3 (Sips and Redlich-Peterson)-parameter isotherm models were applied to evaluated for the applicability of adsorption of Cu(II) and/or phosphate isotherm using chitosan bead. Non-linear and linear isotherm adsorption were also compared on each parameter with coefficient of determination (R2). Among 2-parameter isotherms, non-linear Langmuir and Freundlich isotherm showed relatively higher R2 and appropriate maximum uptake (qm) than other isotherm equation although linear Dubinin-Radushkevich obtained highest R2. 3-parameter isotherm model demonstrated more reasonable and accuracy results than 2-parmeter isotherm in both non-linear and linear due to the addition of one parameter. The linearization for all of isotherm equation did not increase the applicability of adsorption models when error experiment data was included.
In order to utilize the processing wastes of squid, chitosan was prepared by intermittent deacetylation treaoent of $\beta-chitin$ contained richly in the pen of squid. Acetylchitosan also was synthesized from squid pen chitosan with anhydrous acetic acid and their characteristics were investigated. The amounts of nitrogen and ash of squid pen chitosan were $5.80.2\% and 0.2\pm0.03\%$ respectively, the yield of squid pen chitosan was $25\pm3\%$, the degree of deacetylation was $92\%$, and the molecular weight was $1.15\times10^6$, Acetyl contents of N-acetylchitosan powder, acetylchitosan bead, N-ACF-1 (N-acetylchitosan film-1) and N-ACF-2 (N-acetylchitosan film-2) were $55.9\%, 63.2\%, 56\% and 58.7\%$ respectively. Two major peaks, amide I ($1,653 cm^{-1}$) and II ($1,558 cm^{-1}$) bent, on FT-IR spectra of the N-acetylchitosan from squid pen were almost similar to these of $\beta-chitin$, While there was a broad single peak at $1,601 cm^{-1}$assigned to be an amide I bend in squid pen chitosan. The CP/MAS NMR spectra of $\beta-chitin$, squid pen chitosan and N-acetylchitosan from squid pen showed a relative broad and single peak at 74 ppm assigned to fifth carbon (C-5) and third carbon (C-3). In case of $\beta-chitin$ and N-acetylchitosan from squid pen, single peak at 74 ppm was showed as the same of $\beta-chitin$ type.
Alginate-chitosan (anion-cationic polymeric complex) was prepared to control the release rate of silver sulfadiazine (AgSD). Na-alginate (2%) solution containing AgSD was gelled in $CaCl_2$ solution. The gel beads formed were immediately encapsulated with chitosan (CS). The gel matrix and membrane were then reinforced with chondroitin-6-sulfate (Ch6S). Release rate of AgSD from the gel matrix was investigated by placing alginate beads in the sac of cellulose membrane simmered in HEPES-buffer solution. The concentration of AgSD released was analyzed by UV at 264 nm. Incorporation capacity of AgSD in Ca-alginate gel was more than 90%. Alginate-Ch6S-CS could control the release rate of AgSD. The amount of AgSD release was dependent on the AgSD loading dose. Incorporation of tripolyphosphate (polyanionic crosslinker) onto the alginate-Ch6S-CS bead increased the release rate of AgSD. Collagen-coating had no influence on the AgSD release rate. Alginate-Ch6S-CS beads with a sufficiently high AgSD encapsulation were capable of controlling the release of the drug over 10 days. In summary, alginate-Ch6S-CS beads could be used as a sustained delivery for AgSD and provide local targeting with low silver toxicity and patient discomfort.
Plant-derived natural products have been and will continue to be valuable sources. Elicitors have been employed to modify cell metabolism in order to enhance the productivity of useful metabolites in plant cell/tissue cultures. In this study, several elicitors were used to improve the productivity of useful metabolites and to reduce culture time for archiving high concentration in P. ginseng hairy root cultures. The addition of chitosan, chitosan oligosaccharide and alginate oligosaccharide to the culture of P. ginseng hairy roots caused growth to be inhibited with the increase in elicitor concentration. The usage of the chitosan elicitor and D-glucosamine caused a slight decrease in hairy root growth, whereas total ginseng saponin accumulated slightly with the increase in elicitor concentration. When gel beads were added to the culture medium at the initial period, hairy root growth was enhanced. The maximum growth was 1.35 times higher than that of the control at $1\%$ (w/v). Total ginseng saponin content decreased due to the addition of alginate beads. This would result in consistent diffusion of lower levels of calcium ions during the culture period that promotes biomass growth.
Keratinases are exciting keratin-degrading enzymes; however, there have been relatively few studies on their immobilization. A keratinolytic protease from Chryseobacterium sp. kr6 was purified and its partial sequence determined using mass spectrometry. No significant homology to other microbial peptides in the NCBI database was observed. Certain parameters for immobilization of the purified keratinase on chitosan beads were investigated. The production of the chitosan beads was optimized using factorial design and surface response techniques. The optimum chitosan bead production for protease immobilization was a 20 g/l chitosan solution in acetic acid [1.5% (v/v)], glutaraldehyde ranging from 34 g to 56 g/l, and an activation time between 6 and 10 h. Under these conditions, above 80% of the enzyme was immobilized on the support. The behavior of the keratinase loading on the chitosan beads surface was well described using the Langmuir model. The maximum capacity of the support ($q_m$) and dissociation constant ($K_d$) were estimated as 58.8 U/g and 0.245 U/ml, respectively. The thermal stability of the immobilized enzyme was also improved around 2-fold, when compared with that of the free enzyme, after 30 min at $65^{\circ}C$. In addition, the activity of the immobilized enzyme remained at 63.4% after it was reused five times. Thus, the immobilized enzyme exhibited an improved thermal stability and remained active after several uses.
Porous chitosan and chitin membranes were prepared by using silica particles as porogen. Membrane preparation was achieved via the following three steps: (1) chitosan film formation by casting an chitosan solution containing silica particles, (2) preparation of porous chitosan membrane by dissolving the silica particles by immersing the film into an alkaline solution and (3) preparation of porous chitin membrane by acetylation of chitosan membrane with acetic anhydride. The optimum preparation conditions which could provide a chitosan and chitin membranes with good mechanical strength and adequate pure water flux were determined. To allow protein affinity, a reactive dye (Cibacron Blue 3GA) was immobilized on porous chitosan membrane. Binding capacities of affinity chitosan and chitin membranes for protein and enzyme were determined by the batch adsorption experiments of BSA protein and lysozyme enzyme. The maximum binding capacity of affinity chitosan membrane for BSA protein is about 22 mg/mL, and that of affinity chitin membrane for lysozyme enzyme is about 26 mg/mL. Those binding capacities are about $several{\sim}several$ tens times larger than those of chitosan and chitin-based hydrogel beads. Those results suggest that the porous chitosan and chitin membranes are suitable in affinity filtration chromatography for large scale separation of proteins.
Chang, Jie;Park, In-Hye;Lee, Yong-Seok;Chung, Soo-Yeol;Fang, Shu Jun;Chandra, M. Subhosh;Choi, Yong-Lark
Journal of Life Science
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v.20
no.11
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pp.1589-1594
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2010
Glutaraldehyde was used to cross-link chitosan beads to immobilize the crude enzyme $\beta$-glucosidase from Exiguobacterium sp. DAU5. The conditions for preparing cross-linking chitosan beads and immobilization such as concentration of glutaradehyde, cross-linking time, immobilization pH and time were optimized. The chitosan beads were cross-linked with 1.5% glutaraldehyde for 1.5 hr. The immobilized $\beta$-glucosidase had an overall yield of 20% and specific activity of 5.22 U/g. The optimized pH and temperature were 9.0 and $55^{\circ}C$, respectively. More than 80% of its activity at pH 7.0-10.0, 80% at $40^{\circ}C$ for 2 hr and 48% at $50^{\circ}C$ for 1 hr, were retained. However, the immobilization product showed higher pH and thermal stabilities than free enzymes. It also showed high hydrolyzing activity on soybean isoflavone glycoside linkage. These results suggest the broad application prospects of immobilization enzymes.
The World Health Organization(WHO, 1998) and the United States Environmental Protection Agency (USEPA, 1992) recommended $2{\mu}\;guranium/{\ell}$ in drinking water as a guideline. The Korea Institute for Environmental Research recently reported that the radioactive pollution in ground water was almost negligible In Korea$(1999\~2002)$. Cs were cast into beads(2mm in wet form) and treated with hexamethylene diisocyanate for stability in acidic aqueous solution through cross-linking of the beads surfaces. The removal study was carried out in a static batch system and a flow system. In the static system, a certain amount of sample water was confined in a vessel and beads(dry weight 0.5g) were packed into it in order to adsorb uranium for a certain period of time. Afterwards the remaining uranium in water vessel was determined by inductively coupled plasma mass spectrometry. The effective pH range was 4 to 8. The smaller the size of beads, the better the removal efficiency. Furthemore, the lower the flow rates, the higher the removal efficiency. The results showed that chitosan beads can be effectively used for the removal of uranium contained in water.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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