Newcastle disease (ND) is acute respiratory disease with high mortality in chicken and pet birds. Two ostriches aged on 51 days old submitted had showed clinical signs of severe torticolis and poor locomotion. In gross, fibrinous air-sacculitis and hemorrhagic enteritis were present. The significant lesions were histopathologically lymphocytic encephalitis such as perivascular cuffings and gliosis in neuropil. The velogenic ND virus was isolated ftom 10 day-old embryonated eggs inoculated with hemogenized cecal tonsils. These results suggest that NO occurred in the ostrich in Korea.
Objective: Ovarian follicular development, which dependent on the proliferation and differentiation of granulosa cells (GCs), is a complex biological process in which miRNA plays an important role. Our previous study showed that miR-458b-5p is associated with ovarian follicular development in chicken. The detailed function and molecular mechanism of miR-458b-5p in GCs is unclear. Methods: The luciferase reporter assay was used to verify the targeting relationship between miR-458b-5p and catenin beta-1 (CTNNB1), which is an important transcriptional regulatory factor of the Wnt/β-catenin pathway. The cell counting kit-8 (CCK-8) assay, flow cytometry with propidium iodide (PI) and annexin V-fluorescein isothiocyanate (FITC) labeling were applied to explore the effect of miR-458b-5p on proliferation, cell cycle and apoptosis of chicken GCs. Quantitative real-time polymerase chain reaction and Western blot were used to detect the mRNA and protein expression levels. Results: We demonstrated that the expression of miR-458b-5p and CTNNB1 showed the opposite relationship in GCs and theca cells of hierarchical follicles. The luciferase reporter assay confirmed that CTNNB1 is the direct target of miR-458b-5p. Using CCK-8 assay and flow cytometry with PI and Annexin V-FITC labeling, we observed that transfection with the miR-458b-5p mimics significantly reduced proliferation and has no effects on apoptosis of chicken GCs. In addition, miR-458b-5p decreased the mRNA and protein expression of CD44 molecule and matrix metallopeptidase 7, which are the downstream effectors of CTNNB1 in Wnt/β-Catenin pathway and play functional roles in cell proliferation. Conclusion: Taken together, the data indicate that miR-458b-5p regulates ovarian GCs proliferation through Wnt/β-catenin signaling pathway by targeting CTNNB1, suggesting that miR-458b-5p and its target gene CTNNB1 may potentially play a role in chicken ovarian follicular development.
The study aimed to compare the necrotic enteritis (NE)-induced transcriptome differences between the spleens of Marek's disease resistant chicken line 6.3 and susceptible line 7.2 co-infected with Eimeria maxima/Clostridium perfringens using RNA-Seq. Total RNA from the spleens of two chicken lines were used to make libraries, generating 42,736,296 and 42,617,720 usable reads, which were assembled into groups of 29,897 and 29,833 mRNA genes, respectively. The transcriptome changes were investigated using the differentially expressed genes (DEGs) package, which indicated 3,255, 2,468 and 2,234 DEGs of line 6.3, line 7.2, and comparison between two lines, respectively (fold change ${\geq}2$, p<0.01). The transcription levels of 14 genes identified were further examined using qRT-PCR. The results of qRT-PCR were consistent with the RNA-seq data. All of the DEGs were analysed using gene ontology terms, the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) database and the DEGs in each term were found to be more highly expressed in line 6.3 than in line 7.2. RNA-seq analysis indicated 139 immune related genes, 44 CD molecular genes and 150 cytokines genes which were differentially expressed among chicken lines 6.3 and 7.2 (fold change ${\geq}2$, p<0.01). Novel mRNA analysis indicated 15,518 novel genes, for which the expression was shown to be higher in line 6.3 than in line 7.2 including some immune-related targets. These findings will help to understand host-pathogen interaction in the spleen and elucidate the mechanism of host genetic control of NE, and provide basis for future studies that can lead to the development of marker-based selection of highly disease-resistant chickens.
Eosinophilic lung diseases are heterogeneous disorders characterized by varying degrees of pulmonary parenchyma or blood eosinophilia. Causes of eosinophilic lung diseases range from drug ingestion to parasitic or fungal infection as well as idiopathic. The exact pathogenesis of eosinophilic lung disease remains unknown. Urushiol chicken can frequently cause allergic reactions. Contact dermatitis (both local and systemic) represents the most-common side effect of urushiol chicken ingestion. However, there has been no previous report of lung involvement following urushiol chicken ingestion until now. A 66-year-old male was admitted to our hospital with exertional dyspnea. Serial chest X-ray revealed multiple migrating infiltrations in both lung fields, with eosinophilic infiltration revealed by lung biopsy. The patient had ingested urushiol chicken on two occasions within the 2 weeks immediately prior to disease onset. His symptoms and migrating lung lesions were resolved following administration of oral corticosteroids.
Duck viral hepatitis is an acute, highly infectious viral disease of young dacklings aged from two days to three weeks. The significant lesion associated with the disease was enlarged liver including necrotic foci and numerous hemorrhagic spots. We have isolated five strains of duck hepatitis virus (DHV) from field cases showing about 20% mortality with a sign of opisthotonos. When a-day-old ducklings were intramuscularly inoculated with one of the isolates, 92% of the birds were died within 5 days. We attempted to develop an attenuated strain of duck hepatitis virus (DHV) using one of the isolates by serial chicken embryo passages. The propagation of DHV in chicken embryos was carried 140 passages. The virus titer increased gradually from the $21^{st}$ through the $50^{th}$ passage, but there was no significant increase of virus titer in subsequent passages after then. Through the serial passages, the virulence of the virus for chicken embryos was gradually increased but decreased for ducklings. The pathogenicity of the virus for ducklings was preserved up to the $21^{st}$ passage but disappeared at the $50^{th}$passage. An attenuated Korean isolate which was passaged 140 times in chicken embryos gave good protection in ducklings against both challenge infection to a Korean virulent strain and to a DHV-DRL strain, a type 1 reference strain of DHV, which indicated that the Korean isolates could be classified as DHV type 1. And the above results suggest that an attenuated Korean isolate can be used for developing a live DHV vaccine.
Attempts to isolate chicken anemia agent (CAA) were made by inoculating tissue homogenates into MDCC-MSBl or LSCC-1104B1 cell lines and passaging the cells serially. CAA was isolated from the liver and thymus of 11 weeks old layer chickens and from the liver of 10 weeks old broiler breeder chickens. The layer flock experienced approximately 45% mortality during 9 to 14 week of age from gangrenous dermatitis and lymphoid organs of affected chickens were severely atrophied. The broiler breeder flock experienced approximately 7% mortality during 7 to 9 weeks of age and affected birds showed lesions of colibacillosis, staphylococcal arthritis, and coccidiosis together with atrophied lymphoid organs. The isolated viruses were identified as CAA by the indirect fluorescent antibody test and virus neutralization test using CAA immune sera including one to Gifu-1 strain of CAA. The CAA isolate 89-69, when inoculated into susceptible 1 day old SPF chicks, induced anemia 14 to 16 days after inoculation. It did not induce any cytopathic effects in chicken embryo liver and chicken embryo fibroblast cell cultures. Infectivity of the isolate was not affected by the treatment of chloroform or heat ($70^{\circ}C$ for 15 minutes).
Clostridium perfringens has been identified as a causative organism in necrotic enteritis in chicken. The bacterium has been classified into five toxigenic types (A through E) based on the pattern of the production of major lethal toxins. Seroneutralization with mice or guinea pigs usually has been used to type the organism. Of the types, types A and C of the bacterium had been recognized as the major pathogenic types in chicken. In this experiment, we isolated nine field strains of C perfringens from chicken showing necrotic enteritis in clinical symptoms and pathologic findings and identified by biochemical tests. In order to type the organism, a multiplex polymerase chain reaction (PCR) was used with primers on major lethal toxin genes instead of seroneutralization. Amplification of only a toxin gene with the PCR suggested that the disease in chicken was due to type A of C perfringens in Korea. Furthermore, the PCR method can be replaced with seroneutralization to type C perfringens in future.
Gal-13 is an antimicrobial peptide isolated from chicken intestine. Ninety chickens were randomly divided into two groups (45 chickens for each group) to determine the effect of oral administration of Gal-13 on the acquired immune response. The chickens in the first group were fed a diet without Gal-13 as the control, and the chickens in the second group were fed the same diet, except that Gal-13 ($1{\mu}g/ml$) was suspended in drinking water just after hatching. Samples of blood, thymus, bursa of fabricius and spleen were taken at day 1, 4, 7, 10 and 17. The chickens in both groups received infectious bursal disease virus vaccine at day 20, and then sera samples were collected for analysis at 14, 21, 28 and 35 days after vaccination. The results showed: (1) Gal-13 could enhance the content of immunoglobulin (Ig)G at the age of 4 to10 days (p<0.05) and IgM at the age of 4 and 10 days (p<0.05) in the serum; (2) In vitro experiments showed that Gal-13 (0.625-1.250${\mu}g/ml$) enhanced the proliferation of peripheral blood lymphocytes of the chickens stimulated by lipopolysaccharide (LPS) and concanavlin A (ConA). Compared to the control, Gal-13 (1 ${\mu}g/ml$) enhanced the proliferation of bursa lymphocytes at 17 days of age (p<0.01) and thymus lymphocytes at 7 days of age (p<0.01), but restrained lymphocyte proliferation in chicken spleen and differed significantly at day 10 (p<0.01); (3) Gal-13 enhanced infectious bursal disease virus antibody in sera of chickens 21 days after infectious bursal disease virus vaccine administration (p<0.05). These results suggested that Gal-13 could modulate adaptive immune responses of chickens.
Antioxidants present in fruits and vegetables have a potential to reduce disease risk, and increase the shelf life of food products by reducing lipid oxidation. The effect of marination with antioxidants-rich fruit juices on quality characteristics of vacuum-packed chicken wings were examined during frozen storage. Chicken wings were mixed separately with marinades containing pineapple juice, June plum juice, and mango juice and kept for 12 h and 24 h. Three best marination conditions were selected based on a sensory evaluation. Antioxidant activity and total phenolic content of fruit juices, and marinade uptake, and marinade loss of marinated chicken wings were determined. In addition, vacuum packed marinated chicken wings were tested for pH, water holding capacity (WHC), 2-thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) value and antioxidant activity over a 4-wk frozen storage. The best sensory properties were reported from chicken wings marinated with pineapple juice for 24 h, mango juice for 24 h, and June plum juice for 12 h (p<0.05) compared to other marinade-time combinations. Mango juice showed the highest antioxidant activity (92.2%) and total phenolic content (38.45 ㎍/mL; p<0.05) compared to other fruit juices. The pH and WHC of vacuumpacked chicken wings were slightly decreased over the frozen storage (p<0.05). Moreover, chicken wings marinated with mango juice had the lowest TBARS values and the highest 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl-hydrate free radical scavenging activity. In conclusion, mango juice was selected among tested as the most effective marinade for enhancing the oxidative stability of lipid while maintaining the other meat quality traits of vacuum-packed chicken wings.
Fowl cholera is an infectious disease caused by Pasteurella multocida that contributes to high economic loss in the commercial chicken industry. Three Pasteurella multocida strains were isolated from outbreaks of acute fowl cholera in the Korean layer farms from 2018 to 2019. One strain was identified and serotyped using capsular PCR typing. This strain was also genotyped by lipopolysaccharide (LPS) PCR typing as A: L3, whereas other strains were non-typable. The multilocus sequence typing (MLST) result showed that the A: L3 strain is sequence type (ST) 134; the non-typable strains were recorded as the following new STs: ST 366 and ST 374. Using phylogenetic tree analysis based on MLST sequences, we determined that ST 366 and ST 374 are closely related to the reference strains that were previously isolated from duck and chicken in Korea, and they were highly prevalent within the Korean cluster. In conclusion, Pasteurella multocida strains were identified and isolated in this study. Furthermore, this is the first report of using MLST to determine the prevalence of fowl cholera in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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