• 한국동물번식학회:학술대회논문집
• /
• 한국동물번식학회 2001년도 춘계학술발표대회
• /
• pp.42-42
• /
• 2001

The objective of this study was to assess the development of porcine follicular oocytes fertilized by ICSI. Cumulus-oocyte-complexes (COCs) were collected by aspiration from follicles of 2-7 mm in diameter from a local slaughterhouse ovaries. Oocytes matured for 40-44 h were centrifuged at 12,000g for 6 min and then injected with sperm prepared by swim-up procedure in the presence or absence of 5 mM dithiothreitol (DTT). Injected oocytes were cultured in NCSU 23 medium during 6 to 8 days. IVF controls were compared to those of resulting embryos. The results obtained were as. follow: 1, The rates of cleavage and development rates into blastocyst by ICSI were not significantly (P<0.05) different between with (53.0% and 19.7%) or without (48.3% and 23.8%) centrifugation, respectively. 2. The cleavage and developmental rates to blastocyst after ICSI with or without 5mM DTT treated-sperm were not significantly (P<0.05) different (60.4% vs 16.4% and 48.5% vs 22.2%, respectively). 3. The cleavage and the developmental rates to blastocyst were not significantly (P<0.05) different between the zygotes obtained by IVF (51.8% vs. 22.4%) and ICSI (51.4% vs. 21.6%). 4. The number of blastomere in blastocyst stages after IVF or ICSI was not significantly different (46.7 $\pm$2.9 and 41.9$\pm$4.6).

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제14권6호
• /
• pp.433-439
• /
• 1986

Chlamydia trachomatis는 인간에게 각종 질병을 일으키는 병원균이며 최근 그 중요성 이 크게 증가하였다. Chlamydia trachomatis감염에 대한 재래식 진단방법은 낮은 정밀도와 낮은 특이성을 갖고 있으며 방법의 수행 자체도 어렵다는 문제점을 지니고 있다. 이들 재래식 진단방법들이 안고 있는 문제점들을 해결하기 위하여 항-병원균 모노클로날 항체를 생산하는 하이브리도마 세포주를 만들 최종목표를 갖고 우선 생쥐에 면역시킬 항원으로 사용할 Chlamydia trachomatis를 동물 숙주 세포내에서 증식시키는데 끼치는 각종 인자들에 대한 영향을 조사연구하였다. 동물 세포 유래의 McCoy 세포내에서 충분한 양의 Chlamydia tracthomatis를 증식시킨 후 불연속 Urografin 구배 원심분리에 의해 정제하였다. Mc-Coy 세포 내에서의 Chlamydia trachomatis의 생성 개체수를 늘리기 위하여 화학제제를 사용했던 바 IUdR 처리가 cycloheximide 처리보다 더 효과적이었으며 Chlamydia trachomatis 증식을 위해 쓸 수 있는 방법이었다. 원심력의 증가가 Chlamydia tracho chomatis의 McCoy 세포 표면에의 흡착을 증진시켰으며 약 3000g 근처에서 최대 감염율을 보였다. 분리 정제한 Chlamydia trachomatis는 SPG 용액 내에서 4$^{\circ}C$에서 48시간 동안 저장될 수 있었으며 더욱 오래 동안 저장시키기 위해서는 -7$0^{\circ}C$까지 냉동시키는 것이 필요하였다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
• /
• 제34권1호
• /
• pp.93-100
• /
• 2004

많은 연구들에서 hMSC를 얻기 위해 centrifugation, fluoroscence activated cell sorter(FACS), magnetic activated cell sorter(MACS)가 이용되어져 왔다. 그러나 centrifugation만을 이용한 경우 순도가 떨어지며 FACS나 MACS의 경우에는 비용, 시간이 많이 드는 단점이 있다. 따라서 이 연구에서는 antibody cocktail을 이용하여 hMSC를 좀더 쉽게 얻어내는 방법에 대해 알아보았다. 사람의 골반에서 12G의 바늘을 이용하여 골수를 흡입한 후 heparin이 들어있는 시험관에 넣고 처리과정을 시행하기 전에 냉장고에 보관하며 가능한 한 빨리 처리 과정을 실시한다. 얻은 골수에 적당량의 RosetteSep( Stemcell Technologies)을 첨가한 후 실온에서 20분간 반응시킨다. 그 후 적당량의 Ficoll-paque위에 골수와 RosetteSep의 혼합물을 섞이지 않게 올리고 원심분리를 이용하여 원하는 세포층을 얻어낸다. 이 세포층을 따로 분리한 뒤 배양한다. 배양 시 세포가 80%이상 차기 전에 계속 passage를 시행하며 배양한다. 이는 세포가 밀도가 높아져 원치 않는 세포로 분화되는 것을 막기 위함이다. 배양된 세포가 다양한 분화능력을 가지고 있는지 알아보기 위해 세 가지로 분화를 유도하였다. 적절한 배지와 적절한 환경에서 배양함으로써 얻어진 세포를 osteoblast, chondroblast, adipocyte로 분화를 유도하였다. 분화된 세포가 원하는 형질의 세포로 분화되었는지를 확인하기 위하여 osteoblast의 경우 alizarin red staining, alkaline phosphatase activity, chondroblast의 경우 toluidine blue staining, adipocyte의 경우 Oil-Red-O staining으로 염색하여 분화를 확인하였다. 분리해낸 세포는 각각 세 가지 세포로 분화가 되었으며 이는 RosetteSep이 hMSC를 성공적으로 분리해냈다는 것을 보여준다. 그러나 모든 세포가 분화를 보이지는 않았으며 따라서 hMSC의 순도를 높이기 위한 연구가 더 필요하다. RosetteSep을 이용하면 다른 방법들 보다 쉽게 hMSC를 얻을 수 있으나 기존의 방법과 순도의 측면에서 더 비교할 필요가 있다.

• ALGAE
• /
• 제24권4호
• /
• pp.257-265
• /
• 2009

Marine microalgae are a key diet component in finfish and shellfish aquaculture. Cryopreservation of the microalgae is suggested by many other studies as the best method for long-term storage. To test cryopreservation efficacy, 19 taxas of marine microalgal species were examined. In the first experiment we compared dimethylsulfoxide ($Me_2SO$) and glycerol, which are most widely used as cryoprotectant agents (CPAs). The cryopreservation comprised two freezing procedures. Firstly, the samples containing the CPAs were kept at $4^{\circ}C$ for 10 min before being plunged into liquid nitrogen ($-196^{\circ}C$). Secondly, samples containing CPAs were pre-cooled ($-1^{\circ}C$ $min^{-1}$ to $-80^{\circ}C$ before being plunged into liquid nitrogen. Most of the species were successfully cryopreserved using $Me_2SO$, whereas the Prasinophyceae (T. striata and T. suecica) were successfully cryopreserved using glycerol. In general, the cooling method had no influence on the survival of the microalgae except in the case of the Tetraselmis species. In the second experiment, the cultured solution was divided before cryopreservation into concentrated and non-concentrated groups to identify the effect of cell density during cryopreservation. After 12 months of storage, the samples were again divided into centrifugation and non-centrifugation groups to learn the effect of $Me_2SO$ on the culture. Viability and growth of the microalgae were not influenced by cell density or the centrifugal removal of the $Me_2SO$ after thawing.

• 한국식품과학회지
• /
• 제24권1호
• /
• pp.101-106
• /
• 1992

제주도 전통주인 좁쌀약주를 청징화시키기 위하여 원심분리에 의한 청징화 방법, 단백효소제(papain, bromelain, ficin)에 의한 청징화 방법과 한외여과에 의한 청징화 방법들을 검토하여 좁쌀청주의 가장 효과적인 청징화 방법을 모색하고자 하였다. 원심분리에 의해서만은 혼탁물질의 완전한 제거는 불가능하였으며, 단백효소제를 이용한 경우에서는 효소농도 $5{\times}10^{-4}%(w/v)$ 작용시간 2시간, 작용온도 $35^{\circ}C$에서 매우 우수한 청징효과를 나타냈다. 효소별 청징도는 papain과 bromelain은 거의 비슷한 효과를 보였으나, ficin의 청칭력은 약간 떨어졌다. 한외여과(여과막 크기 100k와 $0.22{\mu}m$막)에 의한 청징화는 효소에 의한 최고의 청징화 수준보다 약간 우수한 청징효과를 보였으며, 효소처리에 비하여 향미성분의 손실이나 색도가 좀더 나아서 UF에 의한 청징화 방법이 간단하고 경제적인 방법이었다.

• 대한수의학회지
• /
• 제47권2호
• /
• pp.157-162
• /
• 2007

Lactic acid bacteria (LAB) has been regarded as a useful microorganism and tried to manipulate plasmid DNA for increasing the usefulness. Although several methods have been developed to isolate plasmid DNA from Escherichia coli (E. coli), these methods were not sufficient to apply to LAB with exception of O'Sullivan's lysis method. So, we evaluated plasmid DNA extraction from LAB using general E. coli preparation methods and tried to improve the extraction yield and DNA purity by modifying O'Sullivan's alkaline lysis method. To improve the extraction yield, salt and carrier were added to precipitant and those were incubated at $-70{^{\circ}C}$. Only incubation at $-70{^{\circ}C}$ was the effective method of those modifications. Purity of plasmid DNA was improved by two times of each centrifugation and phenol/chloroform extraction. However, DNA was damaged by twice extraction with phenol/chloroform. Also, exclusion of ethidium bromide showed negative effect to purity. Additionally, it was recommended that improvement of the extraction yield may be due to centrifugation at high speed for more time and to dissolving complete DNA pellet before addition of 7.5 M ammonium acetate. Extraction using this modification produced higher quality of plasmid DNA.

• 한국식품과학회지
• /
• 제28권2호
• /
• pp.384-388
• /
• 1996

다시마 추출액의 향미성분을 분석하기 위하여 steam distillation방법으로 추출한 뒤 GC/MS를 이용하여 분석하였다. 다시마 분말과 100에서 2시간 추출한 대조구 그리고 효소분해와 NaCl용액에서 추출한 뒤 ultrafiltration으로 점성 물질을 제거한 추출액을 비교하였다. 그 결과 다시마 분말의 주요 향미성분은 2-nonen-1-ol, myristic acid, palmitic acid와 oleic acid이었고 $100^{\circ}C$에서 열수추출한 대조구에서는 pentadecane, 1,4-cyclooctadiene과 myristic acid로 나타났으며, 점성물질을 제거한 시료에서는 cyclohexanone, (E,Z)-octa-1,5-dien-3-ol, acetic acid, ethanone, benzaldehyde, 2,6-nonadienal 등으로 나타났다. 또한, 점성물질제거 과정중 분자량이 비교적 큰 지방산들과 3,5-nonadien-2-ol, 1-penton-3-ol 등이 현저히 감소하였다.

• 농촌의학ㆍ지역보건
• /
• 제17권1호
• /
• pp.46-55
• /
• 1992

A systematic study was conducted to identify and isolate a serologically pertinent antigen with high specific activity and low cross reactivity from P.westermani antigen. Differential centrifugation of the homogenate yield three particulate and one soluble fractions ; the $480{\times}G$ pellet(Pw1), the $7650{\times}G$ pellet(Pw2) treated with n-butanol(Pw3), and $100000{\times}G$ supernatnat(Pw4). Comparison of antigenicity of these antigens, based upon differential centrifugation, to that of saline extract of P. westermani worm(SEP) was performed by SDS-PAGE and immunoblot techniques. The results obtained were as follows : 1) The ratio of absorbance value of ELISA against paragonimiasis positive pool sera to that of negative sera was highest when using Pw3 as antigen and that was lowest using Pwl. 2) Silver stained and SDS-PAGE of each antigen showed 34 and 13Kd band as common antigen band, but Pw2 didn't show clear band. 3) By immunoblot 55 and 34Kd bands using SEP and Pw4 showed strong positive reaction without cross reaction with sera from other helmenthic infections. Using Pw3, 10Kd band was observed as specific band. In conclusion, Pw3($100000{\times}G$ pellet urea soluble, treated with n-butanol) and Pw4($100000{\times}G$ supernatant) were usable for ELISA and immunoblot technique.

• Korean Chemical Engineering Research
• /
• 제45권6호
• /
• pp.611-618
• /
• 2007

아민기로 코팅된 단분산 폴리스티렌 입자를 제조한 뒤 톨루엔-물로 구성된 유중수 액적(oil-in-water emulsion) 내부에서 입자를 자기 조립(self-assembly)시켜 다양한 다면체(polyhedra) 구조의 콜로이드 클러스터(colloidal cluster)를 제조하였다. 콜로이드 클러스터의 표면에서 솔-젤(sol-gel) 반응을 유발한 뒤 표면이 실리카로 코팅된 복합(composite) 콜로이드 클러스터를 제조할 수 있었고 이를 주형(template)으로 활용하여 고온 소성에 의해 내부의 폴리스티렌 입자를 제거하고 마이크로미터 크기의 다양한 구조의 비구형상 공동 입자(hollow particle)를 제조하였다. 밀도구배원심분리법 (density gradient centrifugation)에 의해 폴리스티렌 구성 입자의 수와 구조가 균일한 콜로이드 클러스터를 제조할 수 있었으며 표면 솔-젤 반응에 의해 비구형상 구조의 공동 입자를 제조하였다.

• 대한화장품학회지
• /
• 제11권1호
• /
• pp.21-31
• /
• 1985

폴리옥시에틸렌 도데실 에테르 유도체로 안정화된 헥산 - 물의 유화계에서 소량의 장쇄알칸 및 장쇄알칸올이 유화안정도에 미치는 효과를 비교 검토하였다. 장쇄알칸의 계면장력 및 원심분리에 의한 유화 안정도에 거의 영향을 주지 않았으나 장쇄알칸올은 계면장력을 현저히 저하시켰으며, 원심분리시 coalescence에 의한 유화파괴 방지에 효과적이었다. 그러나 시간 경과에 따른 유화안정도는 장쇄알칸이 장쇄알칸올 보다 더욱 효과적이었고 또 탄화수소쇄 길이가 길어질수록 더욱 효과적이었다. 이러한 것을 유화제를 변경시켰을 경우에도 마찬가지였다. 이것은 장쇄알칸을 첨가함으로써 분산상의 소수결합력을 증대시켜 물에 대한 용해도가 감소되어 분자확산에 의한 유화파괴가 어려워지기 때문이다. 즉 이러한 유화계에서 유화파괴는 coalescence보다는 분자확산에 의해 지배됨을 알 수 있다.