Because mesenchymal stem cells (MSCs) maintain distinct capacities with respect to self-renewal, differentiation ability and immunomodulatory function, they have been highly considered as the therapeutic agents for cell-based clinical application. Of particular, differentiation condition alters characteristics of MSCs, including cellular morphology, expression of gene/protein and cell surface molecule, immunological property and apoptosis. However, the previous results for differentiation-related apoptosis in MSCs have still remained controversial due to varied outcomes. Therefore, the present study aimed to disclose periodical alterations of pro- and anti-apoptosis in MSCs under differentiation inductions. The human dental pulp-derived MSCs (DP-MSCs) were differentiated into adipocytes and osteoblasts during early (1 week), middle (2 weeks) and late (3 weeks) stages, and were investigated on their apoptosis-related changes by Annexin V assay, qRT-PCR and western blotting. The ratio of apoptotic cell population was significantly (p < 0.05) elevated during the early to middle stages of differentiations but recovered up to the similar level of undifferentiated state at the late stage of differentiation. In the expression of mRNA and protein, whereas expressions of pro-apoptosis-related makers (BAX and BAK) were not altered in any kind and duration of differentiation inductions, anti-apoptosis marker (BCL2) was significantly (p < 0.05) elevated even at the early stage of differentiations. The recovery of apoptotic cell population at the late stage of differentiation is expected to be associated with the response by elevation of anti-apoptotic molecules. The present study may contribute on understanding for cellular mechanism in differentiation of MSCs and provide background data in clinical application of MSCs in the animal biotechnology to develop effective and safe therapeutic strategy.
This research was undertaken to determine the effect of cyclophosphamide(CP) on the Leydig cells and macrophages in the interstitial tissue of the mice(ICR strain). To evaluate how this drug could affect the these cells, during administration(200mg/kg) 1 time to 3 times at intervals of 48hrs. In the Leydig cells of the control and 1 time treated group, a number of microperoxisomes were observed interspersed among the network of smooth endoplasmic reticulum(SER) in cellular regions where the SER predominantes. Microperoxisomes were also founded in close proximity to the cell membrane. The interstitial tissue were exhibited degenerating Leydig cells but macrophages wer containd greatly increased numbers of cytoplasmic inclusion body and secondary lysosomes. In the 1 time treated group. A very small number of Leydig cells were observed, from 2 to 3 time group, but macrophages were more increased than 1 time group in number. CP thus offers a valuable opportunity to study further the interaction between Leydig cells and macrophages in the interstitial tissue. These alteration could be direct mediated by toxic effect of the drug on the interstitial tissue.
T cell exhaustion develops under conditions of antigen-persistence caused by infection with various chronic pathogens, such as human immunodeficiency virus (HIV) and myco-bacterium tuberculosis (TB), or by the development of cancer. T cell exhaustion is characterized by stepwise and progressive loss of T cell function, which is probably the main reason for the failed immunological control of chronic pathogens and cancers. Recent observations have detailed some of the intrinsic and extrinsic factors that influence the severity of T cell exhaustion. Duration and magnitude of antigenic activation of T cells might be associated with up-regulation of inhibitory receptors, which is a major intrinsic factor of T cell exhaustion. Extrinsic factors might include the production of suppressive cytokines, T cell priming by either non-professional antigenpresenting cells (APCs) or tolerogenic dendritic cells (DCs), and alteration of regulatory T (Treg) cells. Further investigation of the cellular and molecular processes behind the development of T cell exhaustion can reveal therapeutic targets and strategies for the treatment of chronic infections and cancers. Here, we report the properties and the mechanisms of T cell exhaustion in a chronic environment.
The glutathione S transferase (GST) family is a major part of cellular defense mechanisms against endogenous and exogenous substances, many of which have carcinogenic potential. Alteration in the expression level or structure of the glutathione-S-transferase (GST) enzymes may lead to inadequate detoxification of potential carcinogens and consequently contribute to cancer development. A member of the glutathione-S-transferase (GST) family, GSTP1, is an attractive candidate for involvement in susceptibility to carcinogen-associated colorectal cancer. An $Ag{\rightarrow}G$ transition in exon 5 resulting in an Ile105Val amino acid substitution has been identified which alters catalytic efficiency. The present study investigated the possible impact of Ile105Val GSTP1 polymorphism on susceptibility to colorectal cancer. in Jordan We examined 90 tissue samples previously diagnosed with colorectal carcinoma, and 56 non-cancerous colon tissues. DNA was extracted from paraffin embedded tissues and the status of the GSTP1 polymorphism was determined using a polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (RFLP) method. No statistically significant differences were found between colorectal cancer cases and controls for the GSTP1 Ile/Ile, Ile/Val and Val/Val genotypes. The glutathione S-transferase polymorphism was not associated with risk in colorectal cancer cases in Jordan stratified by age, sex, site, grade or tumor stage. In conclusion, the GSTP1 Ile105Val polymorphism is unlikely to affect the risk of colorectal cancer.
To elucidate the effect of elevated sublethal temperature ($33\pm1^{\circ}C$) on polyamine metabolism and oogenesis, we investigated alterations in the major polyamines and ornithine decarboxylase (ODC) and arginine decarboxylase (ADC), and ovarian development during the pupal-adult development of the tobacco budworm, Helicoverpa assulta. Ovaries ODC activity under the elevated sublethal temperature ($33\pm1^{\circ}C$) were lower than those of the optimal rearing temperature ($25\pm1^{\circ}C$). whereas ovarian ADC activity was consistently higher than the optimal rearing temperature ($25\pm1^{\circ}C$). When the gonads were exposed to the higher temperature, ovarian putrescine showed somewhat suppressed levels throughout development, indicating a relatively high correlationship with the alteration aspects in ODC or ADC activity under elevated sublethal temperature. A somewhat precocious ovary was observed in an early stage of development at $33\pm1^{\circ}C$, but cellular abnormalities occurred in this ovary. The ovary developed under elevated sublethal temperature was observed the inhibitional effect of polyamine metabolism and the abnormal development of ovariole, which seem to be related to the sterility.
한국응용약물학회 2003년도 Annual Meeting of KSAP : International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Sciences on Obesity
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pp.113-113
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2003
A number of studies have demonstrated recently nonthermal interactions of extremely low frequency electromagnetic fields with cellular systems, such as the cells of the immune system. Particular concern came from epidemiological findings, which correlated environmental exposure of human body to weak electromagnetic fields with an elevated risk for developing certain type of leukemias and cancers. Several home/environmental sources generating extremely low frequency electromagnetic fields, such as 50 - 60 Hz high-voltage transmission lines, video display terminals, electric blankets, clinical nuclear magnetic resonance imaging procedures, etc., may interact with the human body. In this study we examined the effects of static magnetic fields (SMF) on the phagocytosis of the murine peritoneal macrophages (C57BL/6). The cells were exposed in vitro for 24 h at 37$^{\circ}C$ to 400 G SMF. The phagocytic activity of peritoneal macrophages was determined with a luminometer. Exposure to the SMF decreased phagocytic activity of murine peritoneal macrophages. In order to provide a more exact mechanism of the phenomenon, we analyzed peritoneal macrophages for alteration in their proteomes. The expression levels of these 5 proteins were increased in the SMF. In total 5 proteins which were differentially expressed in the SMF compared with control group were identified. The expression levels of these 5 proteins were increased in the SMF.
To compare the effects of nanometer-sized silver ions and support materials (nano-silver coating material, NM-silver) and silver ions, we exposed zebrafish embryos to both types of nano-silver ions and compared the acute responses during embryogenesis. The amount of silver in the NM-silver (17.16%) was greater than that in the silver ion (4.56%). Both of these materials have different atomic compositions. The silver ion-exposed groups (10 and 20 ppt) showed lower survival rates than the NM-silver-exposed groups (10 and 20 ppt). NM-silver penetrated the skin and blood tube of zebrafish larvae as aggregated particles, whereas, silver ions penetrated the organelles, nucleus and yolk in a spread-out pattern. Micro-array analysis of RNA from zebrafish larvae (72 hours post-fertilization) that were treated with either NM-silver or silver ions, showed alteration in expression of the BMP, activin, TGF-$\beta$, and $GSK3{\beta}$ genes pathway. Additionally, $GSK3{\beta}$ gene pathway for apoptosis that was related with left-right asymmetry. Gene expression changes in the NM-silver or silver ions-treated zebrafish embryo led to phenotypic changes in the hatched larvae, reflecting increased apoptosis and incomplete formation of an axis.
Park, Dae-Hun;Li, Yong-Chun;Shim, Jae-Gal;Xu, Hong-De;Li, Lan;Lee, Min-Jae;Kwon, Myung-Sang
Molecular & Cellular Toxicology
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제5권1호
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pp.93-98
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2009
Stephania delavayi Diels. has been used as an immune activator or an anti-inflammatory drug in China. We examined the immune modulation effect and 7-days repeated-dose toxicity to validate its biological safety and efficiency. Mice were repeatedly administrated with 50 mg/kg S. delavayi Diels. daily by I.P for 7 days. S. delavayi Diels. induced B cell activation but had no effect on other immune cells such as T cell, natural killer (NK) cell, and macrophage ($M{\varphi}$). S. delavayi Diels.-treated group exhibited no statistical significance from the control group in physical conditions; body weight, complete blood count (CBC), serum biochemical indexes etc. There was no difference between the control group and S. delavayi Diels.-treated group in gross findings such as histopathological alteration. In conclusion, S. delavayi Diels. is safe above the dose of immune modulation.
Moon, Il Soo;Cho, Sun-Jung;Jin, IngNyol;Walikonis, Randall
Molecules and Cells
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제24권1호
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pp.76-82
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2007
By combining in situ hybridization (ISH) and immunocytochemistry (IC), microscopic topological localization of mRNAs and proteins can be determined. Although this technique can be applied to a variety of tissues, it is particularly important for use on neuronal cells which are morphologically complex and in which specific mRNAs and proteins are located in distinct subcellular domains such as dendrites and dendritic spines. One common technical problem for combined ISH and IC is that the signal for immunocytochemical localization of proteins often becomes much weaker after conducting ISH. In this manuscript, we report a simplified but robust protocol that allows immunocytochemical localization of proteins after ISH. In this protocol, we fix cultured cortical or hippocampal neurons with 4% paraformaldehyde (PFA), rinse briefly in PBS, and then further fix the cells with $-20^{\circ}C$ methanol. Our method has several major advantages over previously described ones in that (1) it is simple, as it is just consecutive routine fixation procedures, (2) it does not require any special alteration to the fixation procedures such as changes in salt concentration, and (3) it can be used with antibodies that are compatible with either methanol (MeOH-) or PFA-fixed target proteins. To our best knowledge, we are the first to employ this fixation method for fluorescence ISH + IC.
Radioprotective effects of ginger essential oil (GEO) on mortality, body weight alteration, hematological parameters, antioxidant status and chromosomal damage were studied in irradiated mice. Regression analysis of survival data in mice exposed to radiation yielded LD50/30 as 7.12 and 10.14 Gy for control (irradiation alone) and experimental (GEO-treated irradiated) mice, respectively, with a dose reduction factor (DRF) of 1.42. In mice exposed to whole-body gamma-irradiation (6 Gy), GEO pre-treatment at 100 and 500 mg/kg b.wt (orally) significantly ameliorated decreased hematological and immunological parameters. Radiation induced reduction in intestinal tissue antioxidant enzyme levels such as superoxide dismutase, catalase, glutathione peroxidase and glutathione was also reversed following administration of GEO. Tissue architecture of small intestine which was damaged following irradiation was improved upon administration of GEO. Anticlastogenic effects of GEO were studied by micronuclei assay, chromosomal aberration and alkaline gel electrophoresis assay. GEO significantly decreased the formation of micronuclei, increased the P/N ratio, inhibited the formation of chromosomal aberrations and protected agaisnt cellular DNA damage in bone marrow cells as revealed by comet assay. These results are supportive of use of GEO as a potential radioprotective compound.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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