본 연구에서는 비타민나무 잎 추출물의 에틸아세테이트 분획 0.01, 0.03, 0.05, 0.10% 함유한 나노에멀젼을 제조하였고, 5주 동안 이들 나노에멀젼의 입자 크기, 입도분포 및 피부 투과능을 평가하였다. 나노에멀젼은 균질기(homogenizer) 처리 후 고압유화기(micro-fluidizer)를 이용하여 제조하였다. 비타민나무 잎 추출물의 에틸아세테이트 분획을 함유한 나노에멀젼은 단분산 형태를 나타내었다. 5주 동안 실험에서, 0.03% 에틸아세테이트 분획을 함유한 나노에멀젼이 가장 안정하였다. 0.03% 에틸아세테이트 분획 함유 나노에멀젼의 in vitro 피부 투과 실험을 Franz diffusion cell을 이용하여 수행하였다. Oil-in-water (O/W) 에멀젼과 비교할 때 나노에멀젼이 피부 흡수가 더 잘되는 것으로 나타났다. 이러한 결과들은 비타민나무 잎 추출물을 함유한 나노에멀젼이 O/W 에멀젼보다 안정성과 피부 투과능이 우수함을 나타낸다.
Yap, Polly Soo Xi;Krishnan, Thiba;Chan, Kok-Gan;Lim, Swee Hua Erin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권8호
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pp.1299-1306
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2015
This study aims to investigate the mechanism of action of the cinnamon bark essential oil (CB), when used singly and also in combination with piperacillin, for its antimicrobial and synergistic activity against beta-lactamase TEM-1 plasmid-conferred Escherichia coli J53 R1. Viable count of bacteria for this combination of essential oil and antibiotic showed a complete killing profile at 20 h and further confirmed its synergistic effect by reducing the bacteria cell numbers. Analysis on the stability of treated cultures for cell membrane permeability by CB when tested against sodium dodecyl sulfate revealed that the bacterial cell membrane was disrupted by the essential oil. Scanning electron microscopy observation and bacterial surface charge measurement also revealed that CB causes irreversible membrane damage and reduces the bacterial surface charge. In addition, bioluminescence expression of Escherichia coli [pSB1075] and E. coli [pSB401] by CB showed reduction, indicating the possibility of the presence of quorum sensing (QS) inhibitors. Gas-chromatography and mass spectrometry of the essential oil of Cinnamomum verum showed that trans-cinnamaldehyde (72.81%), benzyl alcohol (12.5%), and eugenol (6.57%) were the major components in the essential oil. From this study, CB has the potential to reverse E. coli J53 R1 resistance to piperacillin through two pathways; modification in the permeability of the outer membrane or bacterial QS inhibition.
Objective : Infectious diseases are a growing problem worldwide by Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Daehwangmokdan-tang is one of the oriental medicine prescriptions contained in Principles and Practice of Eastern Medicine. This study investigated the antibacterial activity of EtOH 70% extracts of Daehwangmokdan-tang (DMT) which prescription is composed of oriental medicine against MRSA. Methods : The antimicrobial activity and active concentration of MRSA were verified by measuring the minimum inhibitory concentration (MIC) of DMT. In addition, the effects of the disease were checked by treating the existing antibiotics and large ethanol extract in parallel, and the extent of growth suppression was checked over time. In addition, cell membrane permeability experiment confirmed the effect of large DMT on the immunity mechanism of MRSA. Results : TThe minimum inhibitory concentration of DMT against MRSA is 500 ~ 2000 ㎍/㎖ by broth dilution method. In the checkerboard method, the combinations of DMT with antibiotics has partial synergistic effect or synergy effect and DMT markedly reduced the MICs of the antibiotics oxacillin (OX), gentamicin (GEN) against MRSA. In the inhibition of resistance mechanism of DMT against MRSA, the expression of resistance gene and protein about β-lactam antibiotic was reduced. Also, we observed the effect of DMT about cell membrane permeability against MRSA, and confirmed that DMT suppressed growth of strains by increasing cell membrane permeability and energy metabolism. Conclusion : Basis on the result, we speculate that DMT may be useful for the treatment of MRSA infections when used in combination with β-lactam antibiotic.
We investigated the inducing effects of Rubus coreanus extract (RCE) on apoptosis and its related gene expressions in human breast cancer cells. MDA-MB-231 cells were cultured in the presence of 0, 200, 300, and $400{\mu}g/mL$ RCE for 24h. MTT assay demonstrated that relative cell viability measured a decrease in a dose-dependent manner (p<0.05). This dependency was also found in the increasing levels of cell death by a dual staining with Hoechst 33322 and propidium iodide (p<0.05). These close associations was also observed by different stages of apoptotic processes, as shown by an Apoptosis Detection Kit. To determine whether the alterations in such cell activities obtained above cause the induction of apoptotic genes, PT-PCR was performed expressions of both Bcl-2 and Bax mRNAs. The Bcl-2/Bax ratio which is an important indicator of apoptosis, was found to have significantly decreased dose dependence (p<0.05). Western blot analysis also demonstrated that Caspase-3 significantly increases in a dose-dependent manner (p<0.05) in addition to similar alterations of other proteins examined. Taken these results together, the ethanolic RCE used induces a reduction in cell viability along with increased membrane permeability. This leads to a precautious apoptotic process and, subsequently, cell death through the apoptotic pathway involving Bax and Caspase-3 in human breast cancer MDA-MB-231 cells.
The purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity of four root canal sealers(Tubliseal, AH26, Apatite Root Canal Sealer I, Apatite Root Canal Sealer II) in Vitro. The root canal sealers were mixed and filled in molds which were $14{\times}1.25mm$ in diameter, in height to use for cell counting and agar overlary method, and $7{\times}1.25mm$ for millipore filter method and set for 7 days to use for experiment. Silicone and copper plate were used for negative and positive control respectively. Using the culture of L929 fibroblast, total cell number and vital cell number were counted and the ratio of vital cell number to total cell number was calculated on 2 nd, 4 th, 6 th experimental day, and the change of cell membrane permeability was tested by agar overlay method, and the succinate dehydrogenase activity was tested by millipore filter method. The obtained results were as follows. 1. In ail experimental groups, the mitotic activity of fibroblast was reduced when compared with that of negative control group, so ail experimental groups showed cytotoxicity. Apatite Root Canal Sealer I group exhibited mild cytotoxicity, and Tubliseal, AH26, Apatite Root Cenal Sealer II groups exhibited severe cytotoxicity. 2. In the test of the change of cell membrane permeability by agar overlay method, all experimental groups showed cytotoxicity. AH26 group exhibited mild cytotoxicity, and Apatite Root Canal Sealer I group exhibited moderate cytotoxicity, and Tubliseal and Apatite Root Canal Sealer II group exhibited severe cytotoxicity. 3. In the test of SDH activity by millipore filter method, there was no cytotoxicity in Apatite Root Canal Sealer I and Apatite Root Canal Sealer II group, but Tubliseal and AH26 group showed mild cytotoxicity.
The ionic liquid-based sulfonated hydrocarbon composite membranes was prepared for use in anhydrous high temperature-polymer electrolyte fuel cells (HT-PEFCs). Ionic liquid behaves like water in the composite membranes under anhydrous condition. However the composite membranes show a low conductivity and high gas permeability as the content of ionic liquid increases due to its high viscosity and content of ionic liquid, respectively. Hence, in order to enhance the proton conductivity and to reduce the gas permeability of the composite membranes with low content of ionic liquids, the acid containing a common ion of ionic liquid was added to the composite membranes. The characterization of composite membranes was carried out using small-angle X-ray scattering (SAXS), thermogravimetric analyzer (TGA) and impedance spectroscopy. As a result, the composite membranes containing acid showed higher proton conductivity than those with no acid under the un-humidified condition due to a decrease in viscosity. In addition, the proton conductivity of composite membranes increased with increasing mole concentration of acid.
The 34 potently pig pheromonal odorants (1-32, 5755 & 7113) through structure-based virtual screening and ligand-based virtual screening method were selected and their ADMET and pharmacokinetics characters were evaluated and discussed quantitatively. The pheromonal odorants were projected on the following pre-calculated models, Caco-2 cell permeability, blood-brain barrier permeation, hERG inhibition and volume-distribution. From the results of in silico study, it is found that an optimal compound (31) either penetrating or have a little ($P_{caco2}$=-8.143) for Caco-2 cell permeability, moderate penetrating ability ($P_{BBB}$=0.082) for blood-brain barrier permeation, the low QT prolongation ($P_{hERG}$=1.137) for the hERG $K^+$ channel inhibition, and low distribution into tissues ($P_{VD}$=-5.468) for volume-distribution. Therefore, it is predicted that the compound (31) a topical application may be preferable from these based foundings.
Che, Jinxin;Chen, Xiumei;Ouyang, Qiuli;Tao, Nengguo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권6호
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pp.878-884
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2020
Penicillium digitatum and P. italicum are the two important postharvest pathogens in citrus, causing about 90% of the total loss of citrus fruit during storage and transportation. Natural fungicides such as essential oils have been widely used instead of chemical fungicides for preventing and controlling postharvest diseases. In this research, p-anisaldehyde exhibited a strong inhibitory effect on P. digitatum and P. italicum, with the minimum inhibitory concentration and minimum fungicidal concentration values of both being 2.00 μl/ml. Additionally, p-anisaldehyde visibly inhibited both the green mold and blue mold development of citrus fruits inoculated with P. digitatum and P. italicum. The mycelia morphologies of these pathogens were greatly altered, and the membrane permeability and cell wall integrity of mycelia were severely disrupted under p-anisaldehyde treatment. These results suggest that the antifungal activity of p-anisaldehyde against P. digitatum and P. italicum can be attributed to the disruption of the cell wall integrity.
한국미생물생명공학회 2001년도 Proceedings of 2001 KSAM Annual Meeting
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pp.14-16
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2001
The outer membrane (OM) of gram-negative bacteria acts as an effective permeability barrier against noxious agents including several antibiotics and organic solvents, and lipopolysaccharide (LPS) is the key molecule for this function. Outer membrane modified mutants (Ml-166, M2-42, M3-21) of E. coli DH5$\alpha$/pBSl were selected through a mutation using EMS (ethyl-methane-sulfonate). Among the selected mutants, M3-21 was twice as sensitive as LumisTo $x^{ }$ to benzene and M2-41 was 8 times as sensitive as LumisTo $x^{ }$ to toluene. To identify the structural change in the membrane by mutation, the relative cell surface hydrophobicities and the absorption of the crystal violet to the organisms were measured. All the mutants absorbed more crystal violet than their parent and the absorption of crystal violet increased in cell walls as carbohydrate of lipopolysaccharide decreased. When the cell surface hydrophobicities of DH5/pBSl and its mutants were measured by the BATH, the hydrophobicities of mutants increased compared to their parent in several organic solvents. The difference of lipopolysaccharide between DH5/pBSl and its mutants was identified by various ways such as the SDS-PAGE gel, the screening of LPS molecular weights, the mass spectrometry, and MALDI-TOF.F.
lonophores, uniquely, create specific pathways of ion permeability in model and cell membranes. Calcium-transporting ionophores of microbiological origin, such as A23187 and ionomycin, have been used as experimental tools to elucidate the physiological role of calcium as a second messenger in many cell types. These ionophores are believed to bypass the initial ligand-receptor step in the activation of cells by increasing membrane permeability to calcium. In this report, we shall discuss several naturally occurring substances that share some properties of calcium-ionophores, primarily concentrating on oxidized fatty acids. We have previously demonstrated that oxidized linoteic and arachidonic acids, obtained either by lipoxygenase catalysis or nonenzymatic processes, significantly promote calcium translocation in a two-phase partition model and modulate calcium-transporting function in the isolated sarcoplasmic reticulum vesicles obtained from mammalian hearts. We have also confirmed that calcium-ionophoric properties are due not to their general amphiphilic nature of certain lipids, but to distinct structural characteristics. Although there are some skeptical views on the occurrence of ionophores in higher organisms, increasing evidence suggests that membrane lipids or their derivatives may serve as physiological calcium-ionophores. Abnormal accumulation of lipid peroxidation products(particularly end products), however, may be associated with the general oxidative damages as seen in many pathological conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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