For the purpose of this study was to determine the growth of Candide albicans on the surface of the resilient denture liners. The discs$(40\times40mm)$ of 2 resilient lining materals (Molloplast B, Mollosil) and one conventional acrylic resin (K-33) and one metal plate were processed and disinfected. Firstly, the test discs were placed into petri dish, and Candide albicans suspensions was overlayed on the test discs. And the test discs were incubated with intermitant shaking for 1 hour, 2 hours, 6 hours, 12 hours, 24 hours. After incubation, imprint culture method was achived and counted the colony on the agar plate. Secondly, the effect of denture cleansing agents on the growth of Candide alibicans on the resilient dentureliners was evaluated. The results were as follows : 1. The growth of Candida albicans on discs of Molloplast B and Mollosil was increased than that on discs of acrylic resin and metal plate (p<0.05). 2. As Candide albicans suspensions were incubated for 2 hours, the growth of Candida albicans on discs of Mollosil was increased than that on discs of Molloplast B (p<0.05), and the growth of Candide albicans on discs of metal plate was increased than that on discs of acrylic resin (p<0.05). 3. As Candide albicans suspensions were incubated for 6 hours, the growth of Candide albicans on discs of Mollosil was increased than that on discs of Molloplast B (p<0.05). 4. The growth of Candide albicans on discs of Mollosil and Molloplast B in treating denture cleansing agent was inhibited than control discs (p<0.05).
A multiplex polymerase chain reaction (PCR) assay was developed for the identification of two Candida species-albicans and dubliniensis. Three sets of primers were selected from different genomic sequences to specifically amplify a 516 bp fragment within the tops gene, specific for several species of the genus Candida (CCL primers); a 239 bp fragment within the $\alpha$INT1 gene, specific for Candida albicans (CAL primers); and a 175 bp fragment within the ALSD1 gene, specific for Candida dubliniensis (CDL primers). Using the primers in conjunction (multiplex PCR), we were able to detect both C. albicans and C. dubliniensis and to differentiate between them. The detection limit of the PCR assay was approximately 10 cells per milliliter of saline. Thus, this multiplex PCR assay can be applied for differentiation of C. albicans and C. dubliniensis from clinical specimens.
Using two drugs, tunicamycin and brefeldin A, which affect protein processing, we investigated the intracellular processing mechanism of secreted aspartyl proteinase 1 (SAPl) of Candide albicans. Three intracellular forms of SAPI were detected by immunoblotting using menoclonal antibody (MAb) CAPl. Their molecular weights were approximately 40, 41 and 45 kDa, respectively. The 41 kDa protein is a glycoprotein and may be the same as the extracellular form judging by its molecular mass. The 40 kDa protein was the unglycosylated form and its molecular mass coincided with deglycosylated SAPl and the 45 kDa protein was also the unglycosylated form. Neither the 40 and 45 kDa proteins were detected in the culture supernatant of C. albicans. These suggested that the 40 and 45 kDa proteins might be intracellular precursor forms of SAPI. These results show that SAPI is translated as a 45 kDa precusor form in the endoplasmic reticulum and the 45 kDa precursor farm undergoes proteolytic cleavage after translocation into the Golgi apparatus, generating the 40 kDa precursor form. This 40 kDa precursor is converted into a 41 kDa mature form through glycosylation in the Golgi apparatus. The mature form of the 41 kDa protein is sorted into secretary vesicles and finally released into the extracellular space through membrane fusion. When the glycan region of SAPl was digested with N-glycosidase F, both stability and activity of the enzyme decreased. These results indicate that the glycan attached to the enzyme may, at least in parti be related to enzyme stability and activity.
Using two drugs, tunicamycin and brefeldin A, which affect protein processing, we investigated the intracellular processing mechanism of secreted aspartyl proteinase 1 (SAPl) of Candide albicans. Three intracellular forms of SAPI were detected by immunoblotting using menoclonal antibody (MAb) CAPl. Their molecular weights were approximately 40, 41 and 45 kDa, respectively. The 41 kDa protein is a glycoprotein and may be the same as the extracellular form judging by its molecular mass. The 40 kDa protein was the unglycosylated form and its molecular mass coincided with deglycosylated SAPl and the 45 kDa protein was also the unglycosylated form. Neither the 40 and 45 kDa proteins were detected in the culture supernatant of C. albicans. These suggested that the 40 and 45 kDa proteins might be intracellular precursor forms of SAPI. These results show that SAPI is translated as a 45 kDa precusor form in the endoplasmic reticulum and the 45 kDa precursor farm undergoes proteolytic cleavage after translocation into the Golgi apparatus, generating the 40 kDa precursor form. This 40 kDa precursor is converted into a 41 kDa mature form through glycosylation in the Golgi apparatus. The mature form of the 41 kDa protein is sorted into secretary vesicles and finally released into the extracellular space through membrane fusion. When the glycan region of SAPl was digested with N-glycosidase F, both stability and activity of the enzyme decreased. These results indicate that the glycan attached to the enzyme may, at least in parti be related to enzyme stability and activity.
Bud6p is a component of a polarisome that controls cell polarity in Saccharomyces cerevisiae. In this study, we investigated the role of the Candide albicans Bud6 protein (CaBud6p) in cell polarity and hyphal development. CaBud6p, which consists of 703 amino acids, had 37% amino-acid sequence identity with the Bud6 protein of S. cerevisiae. The homozygous knock-out of CaBUD6 resulted in several abnormal phenotypes, such as a round and enlarged cells, widened bud necks, and a random budding pattern. In hypha-inducing media, the mutant cells had markedly swollen tips and a reduced ability to switch from yeast to hypha. In addition, a yeast two-Hybrid analysis showed a physical interaction between CaBud6p and CaAct1p, which suggests that CaBud6p may be involved in actin cable organization, like Bud6p in S. cerevisiae. Taken together, these results indicate that CaBud6 plays an important role in the polarized growth of C. albicans.
Tissue conditioners have been used for treatment of denture stomatitis caused by wearing of dentures. Early studies pointed out Candide albicans (C. albicans) as main etiologic factor, and antifugal agents were added for control of the species. But there is a little information about broad comparison on the effect of tissue conditioners and antifungal agents added. The purpose of the present study was to compare the inhibiting effect of four tissue conditioners and one temporary soft liner on the growth of C. albicans for treatment of denture stomatitis using gel diffusion method by measuring diameter of the zone of growth inhibition. Three antifungal agents were added to each material for evaluation of the effect of added agents. Finally, observation was made to evaluate the effect of the loss of antifungal elements by aging of the specimen. The results of this study were obtained as follows : 1. Tempo had remarkable antifungal effect showing the zone of growth inhibition as 2.35 mm at 1st day, and was most effective on End: 4th and 7th day from incubation (p<0.05). But Coecomfort, Dura conditioner, Visco-gel, Coe-soft had little antifungal effect from the 1st day of incubation. 2. Nystatin was most effective showing 9.60-12.04 mm of zone of inhibition at the 1st day from incubation. The antifungal properties were reduced to amphotericin B, chlorhexidine and materials without agent (p<0.05), and the effect was diminished by time. 3. As pretreatment with amphotericin B, nystatin, chlorhexidine, Tempo was very effective at the 1st day from incubation showing zone of inhibition as 3.65, 12.04, 4.78 mm with addition of each agent. Dura conditioner had strongest antifungal effect at the next day as 2.86, 5.33, 1.29 mm of zone of inhibition, and yielding results of Coe-comfort, Tempo, Coe-soft was shown at 4th and 7th day from incubation (p<0.05). Taken all together, tissue conditioners have little antifungal effect except Tempo. Formation of the zone of growth inhibition was due to agents amphotericin B, nystatin, chlorhexidine and nystatin was most effective. Conclusively, it is advisable to select material which is effective on the growth of C. albican and consider addition of antifungal agents for treatment of denture stomatitis.
The antifungal activities of the essential oils from Anthemis nobilis, Ciderus atlantica, Juniperus communis, Lavandula angustifolia, Pelargonium graveolens, Pogestemon patchouli, Rosmarinus officinalis, and Styrax tonkinensis which are recommended for the treatment of microbial infections in aromatherapy and complementary medicines were tested against Candida spp. The activities were measured by broth dilution method and disk diffusion assay. Most of the test oils inhibited growth of Candida albicans, C. utilis and C. tropicalis. Especially, the essential oil from Pelargonium graveolens and its main component, citronellol showed the strongest activity among the herbs except benzoic acid from Styrax tonkinensis which is well-known antimicrobial compound. As a result of checkerboard microtiter test. synergistic effect of citronellol, was shown when the component was combinated with ketoconazole, displaying a fractional inhibiting concentration (FIC) index of 0.37 against C. albicans.
This study was done to elucidate the electron microscopic characteristics of certain pathogenic fungi. Four Candida species, (C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis and C. glabrate) and Cryptococcus neoformans were cultured for 3 days at $30^{\circ}C$ in the Sabouraud dextrose medium. After incubation, they were stored at $4^{\circ}C$ for 24hours. Fine structures were analyzed by morphometry, and Tukey's HSD test was used for statistics. On scanning electron microscopy C. albicans and C. neoformans were similar in size but different in shape, showing sphero-shape or ovalo-shape in C. neoformans. Surface of C. neoformans was coarse and spiny, but Candida species examined were uniformly smooth. In size, C. glabrata was the smallest among them. Budding scar as seen on the surface of Candida species by the number ranging from 1 to 7. Cryptococcus neoformans showed one or two budding scar. On transmission electron microscopy the cytoplasm of most yeast cells showed plentiful glycogen particles, mitochondria, peroxisomes and vacuoles. However, cell walls were different among four Candida species and Cryptococcus neoformans. The cell wall of Candida species consisted of fibrous layer, that was electron dense layer and transparent layer, in contrast to Cryptococcus neoformans consisted of electron dense layer with lamellar structure. This layer was two times thicker than that of Candida species. The outer layer of cell wall was of radiating pattern.
Many antibiotic monographs cite the induction of vaginal infections as a possible side effect. Invariably, this is believed to be due to Candide albicans, and empirical therapy is given. However, recent studies raise the question of the extent to which yeast do infect the host after antibiotic use. A double-blind, randomized, placebo-controlled study was undertaken on female patients to determine how many yeast infections occurred following 10 days antibiotic use. In addition, the study was designed to examine whether oval use of probiotic lactobacilli can reduce the risk of vaginal infection. Twenty four patients diagnosed with respiratory, oval or throat infections received one of several types of antibiotic for 10 days, and two capsules containing 10$^{9}$ dried Lactobacillus rhamnosus GR-1 and L. fermentum RC-14 from the day of commencement of antibiotic therapy for 21 days. The most commonly prescribed antibiotic was biaxin (clarithromycin). All but one patient had lactobacilli in the vagina upon entry to the study, and none developed yeast vaginitis or diarrhea during treatment or 20 days after completion of antibiotics. The mean Nugent score was higher in the placebo than the lactobacilli group (4.1 versus 2.4), and three cases of bacterial vaginosis arose (25 % incidence compared to 0% in the lactobacilli group) in the placebo group (2 receiving cefuroxime, 1 on biaxin). The study suggested that current antibiotic use is not necessarily associated with either diarrhea or yeast infection, as is often surmised. Nevertheless, daily use of probiotics was safe and could potentially reduce the risk of patients developing bacterial vaginosis after antibiotic use.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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