Human ferritin H- and L-chain genes (hfH and hfL) were cloned into the yeast shuttle vector YEp352 containing the GAL1 (galactokinase) and GAL10 (epimerase) divergent promoters and the vectors constructed were used to transform Saccharomyces cerevisiae 2805. SDS-PAGE displayed expression of the introduced hfH and hfL in both recombinant strains of Y1H10L and Y1L10H. The ferritin subunits, that represented ca. $22\%$ and $15\%$ of the soluble proteins in Y1H10L and Y1L10H, were spontaneously assembled into active ferritin heteropolymers. The H subunit content of the purified recombinant human ferritin heteropolymers was proven to reflect the relative expression yield of the subunits. When the cells of 2d culture were incubated with 14.3 mM Fe(2), the cellular iron concentration of Y1H10L and Y1L10H was 1.7 and 2.0 times, respectively, that of the control strain. It is assumed that increase in the iron uptake of the recombinant yeasts is closely related to ferritin expression and H subunit content.
This study was conducted to analyze the effects of fowl manure application on growth and quality of Ficus benjamiana. The growth of F. benjamiana was the best at the application of 10% fowl manure. The nutrient uptake increased as the dates passed after transplanting. By the elements, the uptake amount was high in order of N>K>Ca>P>Mg. By fowl manure application rates, the nutrient uptake was the highest in 10%. The mot growth characteristics improved in higher fowl manure application rates, and it was the best in 10%.
This study was conducted to response the growth, seed yield, nitrogen content and different cation content of two soybean, flooding-tolerant cv. Pungsannamulkong (PNSK) and flooding-sensitive cv. Tawonkong (TWK) when these were subjected to flooding stress at R1 stage for cultivation in paddy field. Flooding, underground water levels (UWL) of 0 cm, 10 cm and 40 cm, was experimented from flowering time to harvest time. The dry matter and seed yield of soybean with UWL of 0 or 10 cm declined in comparison with UWL of 40 cm and these were more reduction in TWK than in PNSK. The amount of nitrogen uptake decreased in higher UWL and there was a high significant relationship $(R^2=0.872)$ between nitrogen content and seed yield at flooding stress. K content of leaf and stem in soybean plants had a small change with UWL but Ca content had a decrease (leaf and stem) or increase (root). Mn and Fe content were increased at higher UWL and were more in TWK than in PNSK.
The purpose of the present study was to examine the effect of naltrexone, an opioid antagonist, on secretion of catecholamines (CA) evoked by cholinergic nicotinic stimulation and membrane-depolarization from the isolated perfused rat adrenal gland and to establish the mechanism of its action. Naltrexone $(3{\times}10^{-6}M)$ perfused into an adrenal vein for 60 min produced time-dependent inhibition in CA secretory responses evoked by ACh $(5.32{\times}10^{-3}M)$ , high $K^+$$(5.6{\times}10^{-2}M)$ , DMPP ($10^{-4}$ M) and McN-A-343 $(10^{-4}M)$ . Naltrexone itself did also fail to affect basal CA output. In adrenal glands loaded with naltrexone $(3{\times}10^{-6}M)$ , the CA secretory responses evoked by Bay-K-8644, an activator of L-type $Ca^{2+}$ channels and cyclopiazonic acid, an inhibitor of cytoplasmic $Ca^{2+}-ATPase$, were also inhibited. However, in the presence of met-enkephalin $(5{\times}10^{-6}M)$ , a well-known opioid agonist, the CA secretory responses evoked by ACh, high $K^+$, DMPP, McN-A-343, Bay-K-8644 and cyclopiazonic acid were also significantly inhibited. Collectively, these experimental results demonstrate that naltrexone inhibits greatly CA secretion evoked by stimulation of cholinergic (both nicotinic and muscarinic) receptors as well as that by membrane depolarization. It seems that this inhibitory effect of naltrexone does not involve opioid receptors, but might be mediated by blocking both the calcium influx into the rat adrenal medullary chromaffin cells and the uptake of $Ca^{2+}$ into the cytoplasmic calcium store, which are at least partly relevant to the direct interaction with the nicotinic receptor itself.
The present study was designed to investigate the effect of naloxone, a well known opioid antagonist, on the secretion of catecholamines (CA) evoked by cholinergic stimulation and membrane-depolarization in the isolated perfused rat adrenal glands, and to establish its mechanism of action. Naloxone ($10^{-6}\~10^{-5}$ M), perfused into an adrenal vein for 60 min, produced dose- and time-dependent inhibition of CA secretory responses evoked by ACh ($5.32\times10^{-3}$ M), high K+ ($5.6\times10^{-2}$ M), DMPP ($10^{-4}$ M) and McN-A-343 ($10^{-4}$ M). Naloxone itself also failed to affect the basal CA output. In adrenal glands loaded with naloxone ($3\times10^{-6}$ M), the CA secretory responses evoked by Bay-K-8644, an activator of L-type $Ca^{2+}$ channels, and cyclopiazonic acid, an inhibitor of cytoplasmic $Ca^{2+}$-ATPase, were also inhibited. In the presence of met-enkephalin ($5\times10^{-6}$ M), a well known opioid agonist, the CA secretory responses evoked by ACh, high $K^+$, DMPP, McN-A-343, Bay-K-8644 and cyclopiazonic acid were also significantly inhibited. Taken together, these results suggest that naloxone greatly inhibits the CA secretion evoked by stimulation of cholinergic (both nicotinic and muscarinic) receptors as well as that by membrane depolarization. It seems that these inhibitory effects of naloxone does not involve opioid receptors, but might be mediated by blocking both the calcium influx into the rat adrenal medullary chromaffin cells and the uptake of $Ca^{2+}$ into the cytoplasmic calcium store, which are at least partly relevant to the direct interaction with the nicotinic receptor itself.
Tobacco plant(8-leaf seedlings) were grown on water culture fertilized with different N sources ($NO_3-N$, $NH_4-N$, $NO_3+NH_4-N$) during 15 days. Daily uptake of nutrients and inorganic constituents in plants were investigated in relation to growth responses of them. 1. Nitrate-fed plant showed higher daily uptake of inorganic cations than those in other treatments, and reached about two times higher uptake of nitrogen and three times more uptake of cations (K, Ca, Mg). Potassium was preferentially uptaken at a very fast rate from the beginning after treatment. Also $NO_3-N$ tended to be taken up selectively by the plant from the mixture of nitrate and $NH_4-N$. 2. The initial pH (pH 6.0) of culture medium drastically changed into acid (pH 4.0) in the $NH_4-N$ medium, but into slightly higher (pH 6.4) in the nitrate when measured after exposure of 24 hours. The mixture also tended to show an acidity but much weaker than $NH_4-N$ solution. 3. Nitrate-fed plant had a normal growth pattern but $NH_4-N$ fed plant almost stopped growing. Those plants containing both nitrate and ammonium N were also showed very poor growth.
Undaria pinnatifida oxidized by nitric acid had a high capacity of Cu/sup 2+/ uptake (3.5 mmol Cu/sup 2+/g dry mass) at pH 4 and showed high affinity to Cu/sup 2+/ and Pb/sup 2+/, in a mixed-metal system, compared to Ca/sup 2+/ and Mg/sup 2+/. The IR spectrum showed increase of carboxylic acid on the surface of Undaria pinnatifida, mostly due to the effect of the oxidation reaction.
Proton extrusion by hairy roots of Panax ginseng C.A. Meyer was enhanced by iron-deficiency or single salt solutions of nitrate or ammonium salts. The enhancement effect of iron-deficiency was confined to the apical zones, whereas that of nitrate and ammonium was confined to the basal root zones. tinder iron-deficiency medium, the proton extrusion of ginseng hairy roots was higher at two times than that grown in the medium of iron-sufficiency. According to pH in the medium, uptake of inorganic elements showed various patterns for the kind of inorganic elements. $Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$ and Fe$^{2+}$ were highest uptake at the pH 4.8 and Mn$^{2+}$, Zn$^{2+}$ and Cu$^{2+}$ were highest uptake at the pH 3.8. Free sugars and ginsenosides were analyzed by HPLC. Five kinds of free sugars were indentified in ginseng hairy roots. Glucose, fructose and sucrose were a major sugar in ginseng hairy roots and contents of free sugars were highest at pH 6.8 and pH 4.8, respectively. The contents of ginsenosides and phenolic compounds were highest at pH 5.8. This physiological responses in ginseng hairy root indicated that it may well be a good model system for the study of mechanism of mobilization and uptake of inorganic elements related with the red-colored phenomenon in ginseng roots.
In order to find out the appropriate in vitro method for high correlation with in vivo, we com-pared the sensitivities of phototoxicity (PT) in vitro method between in human keratinocytes, HaCaT cells and in 3T3 fibroblast cells derived from Balb/c mice. Both cells were exposed to six known phototoxic chemicals : promethazine, neutral red, chlortetracycline, amiodarone, bithionol, 8-methoxypsoralen, or non-phototoxic chemical, ALS (ammonium laureth sulfate) and then irradiated with 5 J/$cm^2$ of UVA. Cell viability ($IC_{50}$ ) was measured by neutral red uptake (NRU) assay. The ratio of $IC_{50}$ value of chemicals in the presence and absence of UVA was determined by the cut-off value. The phototoxic potential of test chemicals in NRU assay was determined by measuring the photoirriation factor (PIF) with a cut-off value of 5. In both 3T3 and HaCaT cells, all known phototoxic chemicals were positive (over 5 of PIF value), except that bithionol was found to be non-phototoxic to HaCaT cells, and ALS, non-phototoxic chemical was negative. These results suggest that Balb/c 3T3 cell was more sensitive than HaCaT cell to predict phototoxicity potential.
Water culture studies were conducted in the greenhouse with mulberry plants to investigate the nutrient uptake, especially Zn and Cu, under high phosphrous concentration. Mulberry plants were grown with five phosphorus levels(0, 0.2, 0.5, 2.0, 5.0 mM). Leaves and roots were analyzed for water content, total nitrogen, P, K, Ca, Mg, Fe, Mn, total Zn, soluble Zn, Cu, Cl, $NO_3HPO_4$ and $SO_4$. Dry matter increased upto 2.0mM phosphorus level, and then decreased. Water content, total nitrogen, P, K, and Fe in leaves increased with increasing phosphorus level. Total Zn content in leaves showed little change, whereas soluble Zn increased and Cu decreased with increasing phosphorus level. With increasing phosphous level. $SO_4$ and Cl decreased and then sharply increased above 2.0mM phosphorus. Lower uptake of Cu and higher uptake of $SO_4$ and Cl suggest a cause of mulberry yield decline with high accumulation of soil phosphorus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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