We investigated the role of L-type $Ca^{2+}$ channel in receptor activator of nuclear factor-kappaB ligand (RANKL)-induced osteoclast formation. BayK 8644, a L-type $Ca^{2+}$ channel agonist, was shown to increase the RANKLinduced osteoclastogenesis and actin ring formation in mouse bone marrow-dereived macrophage (BMM) culture system. BayK 8644 stimulated RANKL-induced extracellular signal-regulated kinase (ERK) and p38 MAP kinase (MAPK) activation, which leads to increased nuclear factor of activated T cells (NFAT)c1 expression. Taken together, these data indicate that L-type $Ca^{2+}$ channel regulates osteoclast formation possibly through ERK- and p38-mediated NFATc1 expression.
Qui Anh Le;Tran Nguyet Trinh;Phuong Kim Luong;Vu Thi Van Anh;Ha Nam Tran;Joon-Chul Kim;Sun-Hee Woo
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제28권4호
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pp.335-344
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2024
Diphenyleneiodonium (DPI) has been widely used as an inhibitor of NADPH oxidase (Nox) to discover its function in cardiac myocytes under various stimuli. However, the effects of DPI itself on Ca2+ signaling and contraction in cardiac myocytes under control conditions have not been understood. We investigated the effects of DPI on contraction and Ca2+ signaling and their underlying mechanisms using video edge detection, confocal imaging, and whole-cell patch clamp technique in isolated rat cardiac myocytes. Application of DPI suppressed cell shortenings in a concentration-dependent manner (IC50 of ≅0.17 µM) with a maximal inhibition of ~70% at ~100 µM. DPI decreased the magnitude of Ca2+ transient and sarcoplasmic reticulum Ca2+ content by 20%-30% at 3 µM that is usually used to remove the Nox activity, with no effect on fractional release. There was no significant change in the half-decay time of Ca2+ transients by DPI. The L-type Ca2+ current (ICa) was decreased concentration-dependently by DPI (IC50 of ≅40.3 µM) with ≅13.1%-inhibition at 3 µM. The frequency of Ca2+ sparks was reduced by 3 µM DPI (by ~25%), which was resistant to a brief removal of external Ca2+ and Na+. Mitochondrial superoxide level was reduced by DPI at 3-100 µM. Our data suggest that DPI may suppress L-type Ca2+ channel and RyR, thereby attenuating Ca2+-induced Ca2+ release and contractility in cardiac myocytes, and that such DPI effects may be related to mitochondrial metabolic suppression.
국내산 고품위 석회석은 그 지질 배경과 광상 유형에 따라 (1) 제천-단양 지구, (2) 삼척-태백-정선 지구 및 (3) 울진-안동 지구의 유형들로 구분된다. 제천-단양 지구에서 산출되는 석회석을 제외한 대부분의 국내산 고품위 석회석들은 석회암이 열수변질작용과 열변성작용을 받아 재결정되고 Ca이 부화된 양상을 이룬다. 국내산 고품위 석회석은 광물조성, 화학조성, 결정도 및 광물상의 차이에 따라 결정질 석회암형, 대리암형, 미정질 및 거정질 방해석 유형으로 구분된다. 이들에 대해 응용광물학적 관점에서 그 조성과 특성을 밝히기 위한 체계적인 시험 및 분석이 이루어졌다. 제천-단양 지구의 고품위 석회석들은 외견상 원암에 가까운 결정질 석회암 유형으로서, 낮은 결정도와 세립질 조직, 비교적 높은 CaO 함량(51~54 wt.%) 및 낮은 백색도의 광석 특성을 갖는다. 삼척-태백-정선 지구에서 산출되는 미정질(대개 0.2~0.3 mm) 및 거정질(2~15 cm) 고품위 석회석은 전형적인 열수변질형 광석으로서, 결정도에서 유형별로 서로 현격한 차이를 보이고 다소 편차가 심한 CaO 함유도(50~55 wt.%) 및 높은 백색도를 보이는 것이 특징이다. 특히 이 지역의 주된 광체인 미정질 방해석형 광석은 미세하고 균일한 결정도와 보다 균질한 조성(대개 > 52 wt.%)을 이룬다. 울진-안동 지구의 변성퇴적암류에서 산출되는 석회석들은 그 광상 유형과 산출상태에 따라 품위와 품질면에서 현격한 차이를 보인다. 이 같은 국내산 고품위 석회석의 광물특성과 화학조성상의 특징에 의거하여 지역별로의 광석 유형에 따라 적절한_개발 용도를 제시하였다.
Ion implantation, photo-lithography, Ar ion milling과 hot press 법을 이용한 micro-fabrication techrique을 사용하여 고순도 알루미나 단결정인 사파이어의 내부에, 조절된 Ca의 첨가량을 갖고 있는, crack과 비슷한 형태의 기공들을 형성시켰다. 이 bi-cryslal을 각각의 온도에서 열처리하여 Ca 이온이 고온에서 알루미나의 morphology와 hcaling에 미치는 영향을 관찰하였다. 열처리 온도가 올라감에 따라서 crack-like pore의 내부에 hcxagonal bridging ligaments가 생성되었는데, 열처리 온도와 Ca의 첨가량이 증가할수록 크기가 커지는 것을 관찰할 수 있었고, 생성된 hexagonal bndgmg ligaments는 열처리가 진행됨에 따라 서서히 커지면서 모서리가 둥글어지는 현상을 관찰할 수 있었다. Bicrystal 내부에 형성된 crack-like pore는 열처리가 진행되면서 edge regression. ligamcnt growth 및 flow의 3가지의 특징적인 형태로 진행되었다. 이때 edge regression은 상대적으로 저온에서부터 전체 crack-like pore에서 서서히 일어나기 시작하였으며, ligament growth는 일부 crack-like pore에서 진행되있으며, 대단히 빠른 속도로 crack healing이 진행됨을 추정할 수 있었다. Flow는 $1800^{\circ}C$ 이상의 고온에서 모든 crack-like pore에 걸쳐서 느리게 일어남을 알 수 있었다.
Turtle bladder 상피세포(上皮細胞)의 수송기작(輸送機作)을 in vitro에서 효과적으로 연구하기 위하여 Lucite chamber 한가운데 상피조직을 두고 전압고정법(電壓固定法)을 적용하여 상피 세포층의 막전위(膜電位)를 측정한 후 급속 동결(凍結)하고 투과 및 주사형 전자현미경(電子顯微鏡)으로 탄산 탈수효소를 함유하는 세포의 표면막 특성을 분석(分析)하였다. 방광(膀胱)의 점막층(粘膜層)은 두 타입의 탄산탈수효소를 함유한 세포가 특징적인데 정단부(丁端部)와 기저부(基底部) 세포막에서는 각기 다른 수송의 특성을 나타내고 있다. 즉 ${\alpha}$ 및 ${\beta}$형 탄산탈수효소가 풍부한 세포는 정단세포막(丁端細胞膜)의 proton 펌프를 이용하여 $H^+$ 분필(分泌)에 관여하거나 bicarbonate의 재흡수(再吸收) 기능을 가지는 것으로 믿어진다. 본 연구에서 탄산탈수효소를 함유한 ${\alpha}$형의 세포의 proton 분필수송(分泌輸送)과 세포막 투과성 변화와의 상관관계를 관찰하였는 바, 이들 세포에서 $H^+$을 분비하는 과정에서 정단부의 표면세포막(表面細胞膜) P-face에는 특이한 구조로서 세포막내(細胞膜內) 입자(粒子)들이 다량으로 분포하였다. 이와같은 세포막내(細胞膜內) 입자(粒子)들은 proton 펌프를 함유하는 것으로 생각되며 ${\beta}$형의 세포에서는 기저세포막(基底細胞膜)에서 관찰되고 있다. 이와같은 결과는 방광상피(膀胱上皮) 세포내 탄산탈수효소는 $H^+$과 $HCO_{3}^{-}$의 생성에 관여하지만, 특히 ${\alpha}$형 세포에서 정단세포막의 proton 펌프를 이용한 $H^{+}$ 분필수송(分泌輸送)과 기저세포막을 통한 bicarbonate의 재흡수(再吸收) 기능을 설명해 주는 중요한 사실로서 사료된다.
Glibenclamide, a sulfonylurea derivative, has been used in tile treatment of type II diabetes mellitus. Recent studies provided evidence that glibenclamide, in addition to blocking ATP-sensitive $K^{+}$ channels, also affected Na$^{+}$-K$^{+}$ pumps and L-type $Ca^{2+}$ channels in noncardiac cells. The effect of glibenclamide on the cardiac muscle is not clearly known. In the present study, the effects of glibenclamide on intracellular Na$^{+}$ concentration ([Na$^{+}$]$_{i}$ ), twitch tension, $Ca^{2+}$ transient, and membrane potential were investigated in isolated guinea-pig ventricular myocytes. Glibenclamide at concentration of 200 $\mu$M increased [Na$^{+}$]$_{i}$ by 3.9$\pm$0.4 mM (mean $\pm$ SE, n=12), decreased twitch tension by 36.1 $\pm$ 4.0% (mean $\pm$ SE, n=8), reduced $Ca^{2+}$ transient by 24.4$\pm$5.1% (mean $\pm$ SE, n=3), slightly depolarized diastolic membrane potential, and did not change action potential duration. To determine whether inhibitions of Na$^{+}$-K$^{+}$ pumps and L-type $Ca^{2+}$ channels are responsible for the increase of [Na$^{+}$]$_{i}$ and the decrease of twitch tension, we tested effects of glibenclamide on Na$^{+}$-K$^{+}$ pump current and L-type $Ca^{2+}$ current. Glibenclamide decreased Na$^{+}$-K$^{+}$ pump current and L-type $Ca^{2+}$ current in a concentration-dependent manner.t in a concentration-dependent manner.
Analysis of chromosome aberration (CA) and cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay in peripheral lymphocytes of nurses exposed to low levels of anticancer drug and Ethylene Oxide(EO) gas in a hospital were performed. The frequency of CA was increased in the exposed compared to the controls whereas no increase of the frequency of MN was found. The frequencies of chromatid type CA were 1.2, 3.91 and 9.67 per 500 cells in the controls, workers exposed to anticancer drug and workers exposed to EO, respectively. Lower frequency of CA in nurses handling anticancer drugs with safety covers compared to those without safety covers was observed, but it was not statistically significant. The frequency of CA in nurses handling anticancer drugs increased by the frequency of mixing anticancer drugs. Poisson regression analysis showed a significant association of the frequency of chromatid type CA with age, duration of wort exposure to anticancer drug and EO gas exposure, but no association of the frequency of chromosome type CA with any variables. The results suggested that there were associations between CA and the occupational exposure to low levels of anticancer drug and EO gas.
최근 비점오염 물질로 인한 수계 오염이 보고되고 있으며, 이러한 비점오염 물질에 의한 수계 오염을 방지하기 위한 연구가 활발히 수행되고 있다. 본 연구에서는 LID 시설의 적정 용량 설계 여부를 평가하기 위해 식생형 LID 시설의 모니터링 결과를 분석에서 얻은 SA/CA 그래프에 용인시의 누적강우량 80%에 해당하는 강우를 적용시켜 보았다. 분석결과, 누적강우량 80%에 해당하는 강우의 유량저감 효율 80%를 달성하기 위한 SA/CA 비율은 0.6%, TSS 제거효율 80%를 달성하기 위한 SA/CA 비율은 0.5%로 나타났다. 본 연구에서 제시한 식생형 LID 시설의 적정 SA/CA 비율은 향후 식생형 LID 시설 설계의 기초자료로 활용될 수 있으며, 지속적인 연구를 통해 더 많은 식생형 LID 시설의 데이터를 추가한다면 신뢰도를 높일 수 있을 것이다.
Purpose: It is generally accepted that smooth muscle contraction is triggered by intracellular $Ca^{2+}$ ($[Ca^{2+}]_i$) released from intracellular $Ca^{2+}$ stores such as sarcoplasmic teticulum (SR) and from the extracellular space. The increased $[Ca^{2+}]^i$ can phosphorylate the 20,000 dalton myosin light chain $(MLC_{20})$ by activating MLC kinase (MLCK), and this initiates smooth muscle contraction. In addition to the $[Ca^{2+}]_i$MACK-tension pathway, a number of intracellular signal molecules, including mitogen-activated protein kinase (MAPK), protein kinase C (PKC) and others, play important roles in the regulation of smooth muscle contraction. However, the mechanisms regulating contraction of depletion of SR $Ca^{2+}$ in mouse gastric smooth muscle strips is not still clear. Methods: To investigate the rotes of $Ca^{2+}$ influx and SR $Ca^{2+}$ release channel on gastric motility, isometric contraction and $[Ca^{2+}]_i$ were examined in mouse gastric smooth muscle strips. Results: High KCl, ryanodine, an activator of $Ca^{2+-}$induced $Ca^{2+}$ release channel, and cyclopiazonic acid (CPA), an inhibitor of SR $Ca^{2+-}$ATPase evoked a sustained increase in muscle contraction and $[Ca^{2+}]_i$. These increases induced by high KCl, ryanodine, and CPA were partially blocked by application of verapamil ($10{\mu}M$), a L-type $Ca^{2+}$ channel inhibitor. Additionally, in $Ca^{2+-}$free solution (1 mM EGTA), ryanodine and CPA had no effect contraction and $[Ca^{2+}]_i$ in fundic muscle strips. Conclusion: These results that extracellular $Ca^{2+}$ influx and depletion of SR trigger $Ca^{2+}$ influx through verapamil-sensitive $Ca^{2+}$ channel, and extracellular and SR $Ca^{2+}$ store may functionally involve in the subcellular $Ca^{2+}$ mobilization in mouse gastric muscle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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