A highly efficient, rapid, and reliable multiplex polymerase chain reaction based method for distinguishing ten species of genus Cynoglossus (C. senegalensis, C. abbreviates, C. macrolepidotus, C. arel, C. semilaevis, C. interruptus, C. joyneri, C. lingua, C. robustus, and C. monodi) is described. The species-specific primer sets were designed base on the cytochrome oxidase subunit I gene (1,500 bp). The optimal PCR conditions and primers were selected for ten of Cynoglossus species to determine target base sequences using single PCR. Multiplex PCR using the ten pairs of primers either specifically amplified a DNA fragment of a unique size or failed, depending on each species DNA. The length of amplification fragment of 208 bp for C. senegalensis, 322 bp for C. abbreviates, 493 bp for C. macrolepidotus, 754 bp for C. arel, 874 bp for C. semilaevis, 952 bp for C. interruptus, 1,084 bp for C. joyneri, 1,198 bp for C. lingua, 1,307 bp for C. robustus, and 1,483 bp for C. monodi with the species-specific primers, visualized by agarose gel electrophoresis, allowed perfectly distinction of the Cynoglossus species. The multiplex PCR assay can be easily performed on multiple samples and attain final results in less than 6 hours. This technique should be a useful addition to the molecular typing tools for the tentative identification of Cynoglossus species.
Keonhee Kim ;Hyeonjin Cho ;Jeong-Hui Kim;Yun-mo Yang;Hyunji Ju;Hyun-Gi Jeong
Korean Journal of Ecology and Environment
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v.56
no.3
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pp.250-258
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2023
Freshwater jellyfish, a type of jellyfish exclusively found in freshwater, has a limited number of species but is found globally. However, their ecology and causes of occurrence are largely unknown. Therefore, understanding the distribution of polyps, which produce the larvae of freshwater jellyfish, can provide important data for comprehending their ecology. This study aims to explore the COI gene of freshwater jellyfish using environmental DNA from the microbial film in the Miho River system. Among the 12 survey points in the Miho River watershed, genetic material of freshwater jellyfish was detected in 8 points, mainly located upstream near reservoirs. These genetic materials were identified as genes of the well-known freshwater jellyfish species, Craspedacusta sowerbii. Notably, the C. sowerbii genes found in the Miho River watershed survey points were closely related to a species previously discovered in Italy. Consequently, utilizing environmental DNA to explore the genetic traces of freshwater jellyfish enables rapid screening of areas with a high likelihood of freshwater jellyfish occurrence. This approach is deemed to provide crucial information for understanding the distribution and ecology of freshwater jellyfish in Korea.
Population genetic studies of 10 groups of Iksookimia pacifica were conducted to investigate the genetic diversity and population genetic structure across its known range in South Korea. Population DNA sequences of one mitochondrial gene (mtCOI) and three nuclear genes (IRBP, EGR2B, RAG1) were examined in samples collected from ten streams that flow into the East Sea. Both mitochondrial and nuclear sequences exhibited significant differentiation among populations except a few cases. The Bayesian analysis of the multi-locus genotypes inferred from the DNA sequences of nuclear genes clustered the individual fish largely into two geographical groups: a northern group (from Baebong stream to Cheonjin stream) and a southern group (Yangyangnamdae stream to Gangneungnamdae stream). Given that the streams flowing into the East Sea are geographically isolated water systems, such separation of genotypes can be interpreted by the geographical separation of common ancestors into north and south that had colonized South Korea. Since the initial geographical separation of the ancestral population by north and south, the ancestral groups seem to have experienced further differentiation into the current genetic clusters through the physical isolation of streams by the East Sea in each region. It is notable that many individuals in the Jasan stream formed a genetic cluster with those of Yangyangnamdae and Gangneungnamdae streams which are distant from each other. In addition, mitochondrial gene showed low genetic differentiation between some neighboring populations and very low level of genetic diversity in several populations. The present population genetic study will provide valuable information for the conservation and management of the Korean endemic fish species, I. paicifica.
Kim, MoonJung;Kim, Byoung-Hee;Kim, SoMin;Truong, A Tai;Kim, Jung-Min;Kim, Seonmi;Yoon, Byoung-Su
Journal of Apiculture
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v.34
no.1
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pp.15-26
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2019
Tracheal mite (Acarapis woodi) is an internal parasite that is parasitic on the bronchus of adult bees and sucks fluid from the trachea. Since its first report by Rennie, it has been spread throughout Europe and in some Asian regions, with adjacent Japan and China reported in 2011 and 2012, respectively. Korea detected specific genes of A. woodi in 2015, but only one of 99 samples has been identified and the being of A. woodi has not been confirmed. In this study, we established a specific nested PCR method to confirm for detecting low-copy number of A. woodi-specific gene in bee samples. As a result, A. woodi-specific COI gene was amplified in 15 of 23 samples, and they were judged positive by melting point analysis and sequencing analysis. Although we could not observe the existence of the mites in bees, our results suggest that tracheal mit might exist in nature.
DNA barcoding without assessing reliability and validity causes taxonomic errors of species identification, which is responsible for disruptions of their conservation and aquaculture industry. Although DNA barcoding facilitates molecular identification and phylogenetic analysis of species, its availability in clariid catfish lineage remains uncertain. In this study, DNA barcoding was developed and validated for clariid catfish. 2,970 barcode sequences from mitochondrial cytochrome c oxidase I (COI) and cytochrome b (Cytb) genes and D-loop sequences were analyzed for 37 clariid catfish species. The highest intraspecific nearest neighbor distances were 85.47%, 98.03%, and 89.10% for COI, Cytb, and D-loop sequences, respectively. This suggests that the Cytb gene is the most appropriate for identifying clariid catfish and can serve as a standard region for DNA barcoding. A positive barcoding gap between interspecific and intraspecific sequence divergence was observed in the Cytb dataset but not in the COI and D-loop datasets. Intraspecific variation was typically less than 4.4%, whereas interspecific variation was generally more than 66.9%. However, a species complex was detected in walking catfish and significant intraspecific sequence divergence was observed in North African catfish. These findings suggest the need to focus on developing a DNA barcoding system for classifying clariid catfish properly and to validate its efficacy for a wider range of clariid catfish. With an enriched database of multiple sequences from a target species and its genus, species identification can be more accurate and biodiversity assessment of the species can be facilitated.
A new species of Eudactylopus Scott A., 1909 is described from the southern coast of Korea. The specimens were collected using a light trap set overnight at the entrance near a pier. Eudactylopus yokjidoensis n. sp. is similar to E. andrewi Sewell, 1940 and E. spectabilis (Brian, 1923) in two key respects: similar length of proximal and distal inner setae on female P2 enp-2, and modification of two subapical setae on male P2 endopod. However, E. yokjidoensis can be differentiated from the two species by following morphological characteristics: in females, the length ratio of cephalothorax/2nd-4th thoracic somites combined is smaller in E. yokjidoensis than other two species (1 : 0.8 vs. 1 : 1); antennule has nine segments (vs. 7-segmented in E. andrewi); P2 to P4 each bears a process in medial distal margin of basis, while it is just smooth in E. spectabilis; in males; the length ratio of cephalothorax to 2nd-4th thoracic somites combined is smaller in E. yokjidoensis than other two species (1 : 0.6 vs. 1 : 1 in E. andrewi and 1 : 0.8 in E. spectabilis); and P5 exopod has a comb-like innermost seta, while it is bipinnate seta in E. spectabilis. To prove the Korean species of Eudactylopus to be new, full descriptions of both sexes are given here, and the claim is supported by distinct genetic differences between E. yokjidoensis and E. spectabilis (22.3-22.7%) in the mitochondrial gene cytochrome oxidase subunit I(mtCOI) sequence.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.18
no.1
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pp.41-48
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2009
The large bumblebee, Bombus terrestris, indigenous to Europe and used extensively for high-value crop pollination, has been artificially introduced in several parts of the world. Here we show the interspecific hybridization between bumblebee species, B. terrestris and B. ignitus, under laboratory conditions. The mating and oviposition percentages of the interspecific hybridization of a B. terrestris queen with a B. ignitus male were higher than those of the intraspecific mating of B. ignitus. Furthermore, the competitive copulation experiment indicated that the mating of B. ignitus males with B. terrestris queens was 1.8-fold more frequent than with B. ignitus queens. The interspecific hybridization of a B. ignitus queen with a B. terrestris male produced either B. ignitus workers or the B. ignitus male phenotype, and the hybridization of a B. terrestris queen with a B. ignitus male produced B. terrestris males. Genetic tests using a portion of the mitochondrial COI gene for the parent and hybrid phenotypes indicated that mitochondrial DNA in the interspecific hybridization was maternally inherited. Our results indicated that interspecific hybridization occurred between B. ignitus and B. terrestris, which suggests that the hybridization will have a negative impact of competition and genetic pollution of native bumblebees.
Moniligastrids are an important yet often ignored earthworm group commonly found in cultivated soils, especially paddy, in the tropical East. Seven new taxa are: Drawida koreana austri, D. koreana nanjiro, D. koreana shindo, D. odaesan, D. jeombongsan, D. companio and D. csuzdii Blakemore spp. or sub-spp. nov. from Korea. Drawida csuzdii is the first new species from North Korea since Lumbricidae Eisenia koreana (Zicsi, 1972). Historical East Asian moniligastrids are reviewed chronologically and Drawida barwelli (Beddard, 1886), D. japonica (Michaelsen, 1892) and D. siemsseni Michaelsen, 1910 are compared on their museum types. These three taxa were thought similar and related to D. nepalensis Michaelsen, 1907 and its possible synonym D. burchardi Michaelsen, 1903 (priority!) and both of these to prior D. uniqua (Bourne, 1887). Indian Drawida calebi Gates, 1945 is compared to new material of D. japonica from Japan, and D. willsi Michaelsen, 1907 to the new sub-species of D. koreana Kobayashi, 1938 from Korea. Where available, mtDNA COI gene barcodes are provided to help objective determinations and a phylogram is provided with outgroup Ocnerodrilidae Eukerria saltensis (Beddard, 1895) itself found in rice paddy/irrigation. The challenge now is comparison of all early taxa in their various homelands in order to assess the genetic variability and taxonomic boundaries acceptable, especially for unpigmented D. barwelli and also for pink/grey D. japonica and blue/grey D. koreana. A checklist of moniligastrids is appended showing 22 species from China (including Hainan and Taiwan), 21 from Korea, nine from Japan and the Drawida ghilarovi Gates, 1969 species-complex from far eastern Russian (Siberia). Recent Drawida dandongensis Zhang & Sun, 2014 from Sino-Korean border is misdescribed and cannot be meaningfully compared to any other Drawidas.
Ji, Jae-Min;Yu, Hyo-Jae;Hwang, Kang-Seok;Park, Jeong-Ho;Lee, Jeong-Hoon;Kim, Jin-Koo
Korean Journal of Ichthyology
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v.29
no.4
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pp.244-251
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2017
A total of 15 larvae [3.53~19.49 mm standard length (SL)] belonging to the family Bothidae collected from the southern sea of Korea in 2016 were identified as Psettina tosana based on 434 base-pair sequences of mitochondrial DNA cytochrome c oxidase subunit I. Larvae of Psettina tosana have anterior-most two elongated dorsal fin rays. Uniserial melanophores present on the dorsal and anal fin base, whereas melanophores on the body absent. An inflection point in the relative growth of head length and head depth against SL was shown between 9.93 mm and 10.73 mm SL. The examined larvae of Psettina tosana are clearly distinguished from the most similar species, Psettina iijimae in having no melanophore patches in the proximity of dorsal and anal fin base.
Potato Rpi-blb2 encodes a protein with a coiled-coil-nucleotide binding site and leucine-rich repeat (CC-NBSLRR) motif that recognizes the Phytophthora infestans AVRblb2 effector and triggers hypersensitive cell death (HCD). To better understand the components required for Rpi-blb2-mediated HCD in plants, we used virus-induced gene silencing to repress candidate genes in Rpi-blb2-transgenic Nicotiana benthamiana plants and assayed the plants for AVRblb2 effector. Rpi-blb2 triggers HCD through NbSGT1-mediated pathways, but not NbEDS1- or NbNDR1-mediated pathways. In addition, the role of salicylic acid (SA), jasmonic acid (JA), and ethylene (ET) in Rpi-blb2-mediated HCD were analyzed by monitoring of the responses of NbICS1-, NbCOI1-, or NbEIN2-silenced or Rpi-blb2::NahG-transgenic plants. Rpi-blb2-mediated HCD in response to AVRblb2 was not associated with SA accumulation. Thus, SA affects Rpi-blb2-mediated resistance against P. infestans, but not Rpi-blb2-mediated HCD in response to AVRblb2. Additionally, JA and ET signaling were not required for Rpi-blb2-mediated HCD in N. benthamiana. Taken together, these findings suggest that NbSGT1 is a unique positive regulator of Rpi-blb2-mediated HCD in response to AVRblb2, but EDS1, NDR1, SA, JA, and ET are not required.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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