Vitrification has been suggested to be an effective method for the cryopreservation of human ES cells. However, the efficiency of vitrification with different vehicles remains a matter of ongoing controversy. The objective of this study was to assess the efficiency of cryopreservation in human ES cells by vitrification using different vehicles. A human ES cell line and a variety of vehicles, including micro-droplet (MD), open-pulled straw (OPS) and electron microscopic grid (EM-grid), were employed in an attempt to assess vitrification efficiency. In order to evaluate the survivability and the undifferentiated state of the post-vitrified human ES cells, we conducted alkaline phosphatase staining and characterization via both RT-PCR and immunofluorescence assays. The survival rates of the post-vitrified human ES cells using MD, OPS and EM-grid were determined to be 61.5%, 66.6% and 53.8%, respectively. There also exist significant differences between slow-freezing and vitrification (p<0.01). However, no significant differences were detected between the vehicle types. Finally, the pluripotency of human ES cells after thawing was verified by teratoma formation. Cryopreservation using vitrification is more effective than slow-freezing, and the efficiency of vehicles proved effective with regard to the preservation of human ES cells.
Microfluidics can provide unique experimental tools to visualize the development of neural structures within a microscale device, which is followed by guidance of neurite growth in the axonal isolation compartment. We utilized microfluidics technology to monitor the differentiation and migration of neural cells derived from human embryonic stem cells (hESCs). We co-cultured hESCs with PA6 stromal cells, and isolated neural rosette-like structures, which subsequently formed neurospheres in suspension culture. Tuj1-positive neural cells, but not nestin-positive neural precursor cells (NPCs), were able to enter the microfluidics grooves (microchannels), suggesting that neural cell-migratory capacity was dependent upon neuronal differentiation stage. We also showed that bundles of axons formed and extended into the microchannels. Taken together, these results demonstrated that microfluidics technology can provide useful tools to study neurite outgrowth and axon guidance of neural cells, which are derived from human embryonic stem cells.
Kim, Nam-Keun;Chung, Hyung-Min;Lee, Eu-Gene;Nam, Yoon-Sung;Choi, Dong-Hee;Sohn, Tae-Jong;Lee, Sook-Hwan;Ko, Jung-Jae;Cha, Kwang-Yul
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.27
no.2
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pp.173-177
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2000
연구목적: 한국여성의 다낭성 난포증후군 환자에서 황체형성 호르몬 exon 2 유전자의 변이를 탐색하여 이들 변이와 질환과의 관련성 여부를 밝히고자 하였다. 연구재료 및 방법: 21명의 다낭성 난포증후군 환자를 대상으로 황체형성 호르몬 exon 2(Trp8Arg;TGG to CGG and Ile15Thr; ATC to ACC)의 변이를 탐색하였다. 혈액에서 Genomic DNA를 추출하여 PCR로 증폭한 후 RFLP 방법으로 변이형을 구분하였다. 결과: 황체형성 호르몬 exon 2의 변이형이 다낭성 난포증후군 환자에서 28.6%로 이미 조사된 바 있는 대조군의 16.7% 보다 약간 높게 나타났으나 통계적으로 유의한 차이는 없었다(p>0.05). 결론: 황체형성 호르몬 exon 2의 변이가 한국인의 다낭성 난포증후군 발병과 관련이 있는지를 밝히기 위해 더 많은 개체에 대한 연구가 요구된다.
Hwang, Hye Jin;Oh, Jongsoo;Bang, Minji;Won, Eunsoo;Lee, Kang Soo;Choi, Tai Kiu;Lee, Sang-Hyuk
Korean Journal of Biological Psychiatry
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v.26
no.2
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pp.65-70
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2019
Objectives The objective of this study is to investigate differences in clinical characteristics between female panic disorder (PD) patients with abortion history (PD+A) and without abortion history (PD-A). Methods We examined data from 341 female patients diagnosed with PD. We divided the patients with PD into PD+A (82 patients) and PD-A (259 patients) to compare demographic and clinical characteristics. The following instruments were applied : stress coping strategies, NEO-neuroticism, the Anxiety Sensitivity Index-Revised (ASI-R), the Albany Panic and Phobia Questionnaire (APPQ), the Beck Depression Inventory, the Beck Anxiety Inventory (BAI) and the Sheehan Disability Scale. Results Compared to the PD-A, the PD+A group showed no significant difference in coping strategies. However, significantly higher scores in neuroticism, the ASI-R, the APPQ and the BAI were observed. In terms of health-related disability, the PD+A group did not show significant difference. Conclusions Our results suggest that the PD+A group may differ from the PD-A group in trait markers such as neuroticism and anxiety sensitivity, and abortion history may be associated with panic-related symptom severity. Our study suggests that further consideration is needed on such clinical characteristics in PD patients with abortion history.
Shin, Dong-Hyuk;Lee, Jeoung-Eun;Eum, Jin Hee;Chung, Young Gie;Lee, Hoon Taek;Lee, Dong Ryul
Development and Reproduction
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v.21
no.4
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pp.425-434
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2017
Polyploidy is occurred by the process of endomitosis or cell fusion and usually represent terminally differentiated stage. Their effects on the developmental process were mainly investigated in the amphibian and fishes, and only observed in some rodents as mammalian model. Recently, we have established tetraploidy somatic cell nuclear transfer-derived human embryonic stem cells (SCNT-hESCs) and examined whether it could be available as a research model for the polyploidy cells existed in the human tissues. Two tetraploid hESC lines were artificially acquired by reintroduction of remained 1st polar body during the establishment of SCNT-hESC using MII oocytes obtained from female donors and dermal fibroblasts (DFB) from a 35-year-old adult male. These tetraploid SCNT-hESC lines (CHA-NT1 and CHA-NT3) were identified by the cytogenetic genotyping (91, XXXY,-6, t[2:6] / 92,XXXY,-12,+20) and have shown of indefinite proliferation, but slow speed when compared to euploid SCNT-hESCs. Using the eight Short Tendem Repeat (STR) markers, it was confirmed that both CHA-NT1 and CHA-NT3 lines contain both nuclear and oocyte donor genotypes. These hESCs expressed pluripotency markers and their embryoid bodies (EB) also expressed markers of the three embryonic germ layers and formed teratoma after transplantation into immune deficient mice. This study showed that tetraploidy does not affect the activities of proliferation and differentiation in SCNT-hESC. Therefore, tetraploid hESC lines established after SCNT procedure could be differentiated into various types of cells and could be an useful model for the study of the polyploidy cells in the tissues.
Kim, Sung-Wan;Kim, Duk-Sil;Kim, Dong-Hoon;Byun, Kyung-Hwan;Lee, Gun;Lee, Hyeon-Jae;Lim, Chang-Young
Journal of Chest Surgery
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v.42
no.6
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pp.796-799
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2009
A 63 year-old woman visited our hospital with a palpable chest wall mass in the infrascapular region. We performed excision of the mass. The mass was histolocally diagnosed as elastofibroma. Elastofibroma is characterized by the proliferation of fibrous tissue with elastin. It is a relatively slow growing benign soft tissue tumor and it is most often found in the infrascapular region. We have experienced a cases of this rare disease and we report on it together with a review of the relevant literature.
Objective To suggest rotation angles of fluoroscopy that can bypass the carotid sheath according to vertebral levels for cervical transforaminal epidural steroid injection (TFESI). Methods Patients who underwent cervical spine magnetic resonance imaging (MRI) from January 2009 to October 2017 were analyzed. In axial sections of cervical spine MRI, three angles to the vertical line (${\alpha}$, angle not to insult carotid sheath; ${\beta}$, angle for the conventional TFESI; ${\gamma}$, angle not to penetrate carotid artery) were measured. Results Alpha (${\alpha}$) angles tended to increase for upper cervical levels ($53.3^{\circ}$ in C6-7, $65.2^{\circ}$ in C5-6, $75.3^{\circ}$ in C4-5, $82.3^{\circ}$ in C3-4). Beta (${\beta}$) angles for conventional TFESI showed a constant value of $45^{\circ}$ to $47^{\circ}$ ($47.5^{\circ}$ in C6-7, $47.4^{\circ}$ in C5-6, $45.7^{\circ}$ in C4-5, $45.0^{\circ}$ in C3-4). Gamma (${\gamma}$) angles increased at higher cervical levels as did ${\alpha}$ angles ($25.2^{\circ}$ in C6-7, $33.6^{\circ}$ in C5-6, $43.0^{\circ}$ in C4-5, $56.2^{\circ}$ in C3-4). Conclusion The risk of causing injury by penetrating major vessels in the carotid sheath tends to increase at upper cervical levels. Therefore, prior to cervical TFESI, measuring the angle is necessary to avoid carotid vessels in the axial section of CT or MRI, thus contributing to a safer procedure.
Jung Oh Kim;Kee Ook Lee;Hyun Woo Kim;Han Sung Park;Jinkwon Kim;Jung Hoon Sung;Doyeun Oh;Ok Joon Kim;Nam Keun Kim
Molecular Medicine Reports
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v.21
no.4
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pp.1973-1983
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2020
Silent brain infarction (SBI) is a cerebral infarction identified through brain imaging. In particular, studies have shown that the presence of SBI in elderly patients increases their risk of cognitive dysfunction, impairment and dementia. However, little research has been published on the relevance of SBI to these risks for the Korean population. The association between potassium voltage-gated channel subfamily Q member 2 (KCNQ2), transcription factor 4 (TCF4) and regulator of G-protein signaling 18 (RGS18) genotypes and SBI were investigated using whole-exome sequencing and PCR restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis. The study population included 407 patients with SBI (171 males) and 401 control subjects (172 males). Genotyping was performed using PCR RFLP. Interestingly, TCF4 rs9957668T>C polymorphisms were associated with SBI prevalence [TT vs. CC: adjusted odds ratio (AOR), 1.815, 95% confidence intervals (CI), 1.202-2.740; TT vs. TC+CC: AOR, 1.492, 95% CI, 1.066-2.088; TT+TC vs. CC: AOR, 1.454, 95% CI, 1.045-2.203]. The combination of KCNQ2 rs73146513A>G and TCF4 rs9957668T>C genotypes was associated with increasing SBI prevalence (AG/CC: AOR, 3.719, 95% CI, 1.766-7.833; AA/CC: AOR, 3.201, 95% CI, 1.387-7.387). The present study showed that TCF4 rs9957668T>C polymorphisms may be risk factors for SBI. Therefore, the TCF4 rs9957668T>C polymorphism may serve as a biomarker for increased risk of SBI in the Korean population.
Ko, J. J.;Chung, H. M.;Shim, S. W.;Kim, N. K.;Lim, J. M.;Lee, H. K.;Park, C.;Kim, S. Y.;Cha, K. Y.
Journal of Embryo Transfer
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v.13
no.2
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pp.89-96
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1998
Anti-phospholipid antihodies (aPL) have important roles in various pregnancy complications such as recurrent miscarrige, growth retardation, placental abruption and stillbirth. However, their biological actions on preimplantation development of oocytes are still unclear. In this study, we investigated whether either aPL containing sera or phospholipids could affect in vitro fertilization and development of mouse oocytes. Sera used in this study were collected from three patients and the presence of aPL in the sera was confirmed by enzymatic-linked immunosorbent assay. When mouse oocytes were cultured in a serum-free, Chatot, Ziomek and Bavister (CZB) medium (Experiment 1), addition of aPL-containing sera (10%) to CZB medium did not. significantly (P>0.05) influence sperm penetration of oocytes. However, development to the blastocyst stage was significantly (P<0.05) inhibited by serum addition, and formation of morulae (16-23% vs. 58%) and blastocysts (0-4% vs. 21%) was markedly reduced compared with no addition (Experiment 2). In Experiment 3, pronuclear stage embryos were cultured for 96 h in GZB medium supplemented with 1 $\mu$g /ml phosphatidyl ethanolamine, 1 $\mu$g/ml phosphatidyl inositol or 1 $\mu$g /ml phosphatidyl choline. No increase in embryo development was found after addition of the phospholipids to CZB medium. These results suggest that 1) aPL have an inhibitory role in preimplantation development of mouse embryos, and that 2) the action of aPL may be related to a specific phospholid (s) rather than the tested phospholipids in the present study.
Objective: To investigate the association of genetic background between MTHFR A1298C genotype and male infertility. Materials and Methods: We compared 377 infertile males with 396 healthy fertile males with one or more offspring. Infertile males were classified into four subtypes (281 azoospermia, 26 oligoasthenoteratozoospermia (OAT), 59 severe OAT and 11 remnants) by World Health Organization (WHO). Pyrosequencing analysis for MTHFR (methylenetetrahydrofolatereductase) A1298C variation was performed on polymerase chain reaction (PCR) product of study group. To validate pyrosequencing data of A1298C variation for randomly selected 50 samples, we compared the pyrosequencing result with the PCR-RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) result of MTHFR A1298C genotype. Results: We studied MTHFR A1298C variation by pyrosequencing. A1298C variation data (1298 AC; p=0.2166 and 1298 CC; p=0.5056) of MTHFR gene was no significant difference in between fertile and infertile males. Conclusion: The genetic analysis in MTHFR gene didn't appear genetic difference in Korean fertile and infertile males. We require further study for MTHFR gene in infertile males.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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