Focused electrospray (FES) deposition method is presented for matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) mass spectrometry. FES ion optics consists of two cylindrical focusing electrodes capped with a truncated conical electrode through which an electrospray emitter passes along the cylindrical axis. A spray of charged droplets is focused onto a sample well on a MALDI target plate under atmospheric pressure. The shape and size distributions of matrix crystals are visualized by scanning electron microscope and the mass spectra are obtained by time-of-flight mass spectrometry. Angiotensin II, bradykinin, and substance P are used as test samples, while $\alpha$-cyano-4-hydroxycinnamic acid and dihydroxybenzoic acid are employed as matrices. FES of a sample/matrix mixture produces fine crystal grains on a 1-3 mm spot and reproducibly yields the mass spectra with little shot-to-shot and spot-to-spot variations. Although FES greatly stabilizes the signals, the space charge due to matrix ions limits the detection sensitivity of peptides. To avoid the space charge problem, we adopted a dual FES/FES mode, which separately deposits matrix and sample by FES in sequence. The dual FES/FES mode reaches the detection sensitivity of 0.88 amol, enabling ultrasensitive of peptides by homogeneously depositing matrix and sample under atmospheric pressure.
($\pm$)-Higenamine is known as a cardiotonic principle of aconite root (root of Aconitum spp., Ranunculaceae). A simple and sensitive detection method for higenamine was developed by using gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). The recovery of higenamine after extraction and concentration with XAD-2 resin column was around 95% from rat biological fluids such as bile, plasma and urine. The limits of detection of higenamine in these biological fluids were approximately 0.1 ng/ml each. It has well been suggested that tetrahydroisoquinolines possessing catechol moiety such as higenamine should be subjected to the catechol-O-methyl transferase (COMT) activity in vivo. We detected two major peaks of presumed metabolites of higenamine in the total ion chromatogram obtained from the rat urine sample after the oral adminstration of ($\pm$)-higenamine. The scan mass spectrum of one of the metabolties coincided with those obtained from coclaurine $(C_6$-O-methyl higenamine) and those of the other metabolite are suggestive of isococlaurine $(C_7$-O-methyl higenamine).
A gas chromatography/mass spectrometric assay method was developed for the determination of persistent organochlorine pollutants (POPs) in hair. For the exact extraction study was used hair of rat exposed with POPs. Sonication of the hair matrix with 3 M HCl solution in methylene chloride of the extraction methods studied was the most efficient and rapid sample preparation method. After sonication of rat hair was achieved clean up with a solid phase extraction procedure using silica gel-florisil. Elution was performed with 8 mL of methylene chloride. The eluate was concentrated to approximately 100 ${\mu}L$ and analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Detection limits of POPs were in the concentration range of 0.6-1.2 ng/g in rat hair. Aldrin, dieldrin, p,p-DDT and mirex were dosed rat for 4 weeks at concentration of 0.01 mg/L in drinking water and detected in rat hair at concentration of 2.8, 11.3, 7.9 and 15.6 ng/g, respectively. Aldrin and p,p-DDT were metabolized to dieldrin and p,p-DDE, which were detected in concentration of 9.7 and 2.9 ng/g in rat hair, respectively. The developed method may be valuable to be used to analyze POPs in human hair.
The effect of obesity on the drug-metabolizing enzymes remains an important issue for clinician since obesity is a world wide epidemic problem. However, little is known about the effects of obesity on flavincontaining monooxygenase (FMO) production and activity. We show here for the first time that in vivo FMO activity determined by urinary ranitidine (RA) metabolites ratio in human, was higher in subjects with a high body mass index (BMI, kg/$m^2$, 21.97-30.32) than in those with an intermediate BMI (range 19.38-21.83). Moreover, there was a significant correlation between FMO activity and BMI in 209 subjects. In high fat diet-induced obese mice, we also observed that the hepatic expression of FMO (225% of lean mice) and the activity measured by the RA Noxidation rate ($513{\pm}58.1$ vs. $349{\pm}66.0$ pmol/hr per mg protein) were significantly higher than in lean mice fed a control diet. Unknown factors rather than leptin or insulin appeared to regulate the hepatic FMO production. Thus, FMO activity may be increased in obese or overweight individuals. Moreover, the regulation of FMO activity in subjects with morbid obesity, with or without complications and its clinical implications, should be investigated further.
Cho, Kun;Kim, Jin Young;Kim, Eunmin;Park, Gun Wook;Kang, Tae Wook;Yoon, Jung Hae;Kim, Seung U.;Byun, Kyunghee;Lee, Bonghee;Yoo, Jong Shin
Mass Spectrometry Letters
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제3권4호
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pp.93-100
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2012
Cellular processes such as proliferation, differentiation, and adaptation to environmental changes are regulated by protein phosphorylation. In order to enhance the understanding of molecular dynamics for biological process in detail, it is necessary to develop sensitive and comprehensive analytical methods for the determination of protein phosphorylation. Neural stem cells hold great promise for neural repair following an injury or disease. In this study, we made differentiated oligodendrocytes from human neural stem cells using over-expression of olig2 gene. We confirmed using quantitative phosphoproteome analysis approach that combines stable isotope labeling by amino acids in cell culture (SILAC) and $TiO_2$ micro-column for phosphopeptide enrichment with $MS^2$ and $MS^3$ mass spectrometry. We detected 275 phosphopeptides which were modulated at least 2-fold between human neural stem cells and oligodendrocytes. Among them, 23 phosphoproteins were up-regulated in oligodendrocytes and 79 phosphoproteins were up-regulated in F3 cells.
The mass cultivation of Ecklonia cava Kjellman was studied as a potential biomass source for the extract industry in Korea. Experiments were conducted to investigate the optimal conditions for artificial seed production and mass cultivation of this species. Maximum growth and young thalli development in the nursery culture area occurred at 2 m depth, whereas maximum growth of thalli in the main culture area occurred at 1 m depth. Production of E. cava was between 2.6 and 3.6 kg wet wt. $m^{-1}$ after depth control and removal of fouling organism, etc. The relationship between optimal water depth for culture and underwater irradiance during the E. cava cultivation was calculated as: y = -0.718x + 8.042 ($r^2$=0.976). The growth rates achieved in this trial indicate that E. cava cultures could produce and supply sufficient biomass.
One of the components that used in the satellite thermal control subsystem is the Mechanically Pumped Fluid Loop (MPFL) system; this system mostly used in geosynchronous orbit (GEO) satellites, and can transfer heat from a hot point to a cold point using the fluid which circulated in a closed loop. Heat radiates to the deep space at the cold plate to cool down the fluid temperature. In this research, the radiative heatexchanger (RHX) for a MPFL system is optimized. The genetic algorithm has been used for minimizing the total mass and pressure drop by considering a constant transferred heat rate at the heat exchanger. The optimization has been done in two cases. In case I, two parameters are considered as a goal function, so optimization is performed using NSGA-II method. Results of optimization are shown in the pareto diagram. In case II, the diameter of pipe is considered constant, so the optimized value for distances of the parallel pipes is obtained by using the genetic algorithm, in which the system has the least total mass. Results show that in the RHX, by increasing the pipe diameter, pressure drop decreases and total mass increases. Also by considering a constant value for pipe diameter, an optimum distance between pipes and pipe length are obtained in which the system has a minimum mass.
The present paper studies the variation of the natural frequencies and mode shapes of rectangular plates carrying a three degree-of-freedom spring-mass system (subsystem), when the subsystem changes (stiffness, mass, moment of inertia, location). An analytical approach based on Lagrange multipliers as well as a finite element formulation are employed and compared. Numerically reliable results are presented for the first time, illustrating the convenience of using the present analytical method which requires only the solution of a linear eigenvalue problem. Results obtained through the variation of the mass, stiffness and moment of inertia of the 3-DOF system can be understood under the effective mass concept or Rayleigh's statement. The analysis of frequency values of the whole system, when the 3-DOF system approaches or moves away from the center, shows that the variations depend on each particular mode of vibration. When the 3-DOF system is placed in the center of the plate, "new" modes are found to be a combination of the subsystem's modes (two rotations, traslation) and the bare plate's modes that possess the same symmetry. This situation no longer exists as the 3-DOF system moves away from the center of the plate, since different bare plate's modes enable distinct motions of the 3-DOF system contributing differently to the "new' modes as its location is modified. Also the natural frequencies of the compound system are nearly uncoupled have been calculated by means of a first order eigenvalue perturbation analysis.
Kwon, Yong Shik;Jung, Hye In;Kim, Hyun Jung;Lee, Jin Wook;Choi, Won-Il;Kim, Jin Young;Rho, Byung Hak;Lee, Hye Won;Kwon, Kun Young
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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제75권3호
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pp.116-119
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2013
Sarcoidosis, a systemic granulomatous disease of unknown etiology. The presentation of sarcoidal granuloma in neck nodes without typical manifestations of systemic sarcoidosis is difficult to diagnose. We describe the case of a 37-year-old woman with an increasing mass on the right side of neck. The excisional biopsy from the neck mass showed noncaseating epithelioid cell granuloma of the lymph nodes. No evidence of mycobacterial or fungal infection was noted. Thoracic evaluations did not show enlargement of mediastinal lymph nodes or parenchymal abnormalities. Immunohistochemistry showed abundant expression of tumor necrosis factor-${\alpha}$ in the granuloma. However, transforming growth factor-${\beta}$ was not expressed, although interleukin-$1{\beta}$ was focally expressed. These immunohistochemical findings supported characterization of the granuloma and the diagnosis of sarcoidosis. Sarcoidosis can present with cervical lymph node enlargement without mediastinal or lung abnormality. Immunohistochemistry may support the diagnosis of sarcoidosis and characterization of granuloma.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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