부추 건조 분말을 제조하기 위한 최적 열풍건조온도 조건을 확립하고 건조온도 조건에 따른 부추 건조 분말의 생리활성을 가진 클로로필과 SOD 유사활성의 변화정도를 살펴본 결과는 다음과 같다. 건조온도는 부추의 수분함량의 변화에 큰 영향을 미쳤으며 건조온도가 증가함에 따라 건조시간은 현저하게 단축되었다. 부추의 전처리에서 건조시간은 건조 온도가 $70^{\circ}C$ 또는 $80^{\circ}C$에서는 건조 완결시간이 200분 이상소요되었으나 $100^{\circ}C$에서는 120분 이내에 건조가 거의 완료되었다. $100^{\circ}C$에서 30분간 건조하고 그 이후는 $70^{\circ}C$에서 건조하는 조건에서는 약 160분, $100^{\circ}C$에서 60분간 건조하고 그 이후는 $70^{\circ}C$에서 건조하는 조건에서는 건조완료 시간이 120분으로 건조조건의 변화로 건조시간을 단축시킬 수 있었다. 또한 건조온도는 부추의 색도의 결과에도 큰 영향을 미쳤으며 L값은 대조구인 동결 건조한 시료가 49.56, $100^{\circ}C$에서 30분간 건조한 다음 $70^{\circ}C$에서 건조를 완료하는 조건의 시료가 49.19, $100^{\circ}C$에서 60분에서 건조한 다음 $70^{\circ}C$에서 건조한 것으로 각각 48.55로 높았으며, 녹색도(a)는 대조구인 동결 건조한 시료가 -13.24, $100^{\circ}C$에서 30분간 건조한 다음 $70^{\circ}C$에서 건조를 완료하는 조건의 시료가 -9.15, $100^{\circ}C$에서 60분에서 건조한 다음 $70^{\circ}C$에서 건조를 완료하는 조건의 시료는 -8.86로 가장 높았으며, 황색도(b)값 역시 대조군인 동결 건조한 시료는 22.01, $100^{\circ}C$에서 30분에서 건조한 다음 $70^{\circ}C$에서 건조를 완료하는 시료는 15.71, $100^{\circ}C$에서 60분에서 건조한 다음 $70^{\circ}C$에서 건조한 시료는 15.31로 가장 높게 나타내어 부추의 건조에 적정 조건이라 생각되었다. 또한 건조 조건별 클로로필 함량 역시 $100^{\circ}C$에서 30분에서 건조한 다음 $70^{\circ}C$에서 건조를 완료하는 시료가 177 mg%로 가장 낮은 온도인 $70^{\circ}C$에서 건조시킨 부추 시료 179 mg%와 유사한 값을 나타내어 여러 건조 조건 중에서 가장 엽록소 함량이 높았다. SOD 유사활성 역시 대조구인 동결건조 부추에서 1,250(unit/g)으로 가장 높았으며 다음은 $100^{\circ}C$ 60분$-70^{\circ}C$ 건조완료한 부추가 1,176, $100^{\circ}C$ 30분$-70^{\circ}C$ 건조완료한 부추가 1,141로 고온이나 비교적 장시간 열풍에 노출되는 조건에 비해서 높은 값을 나타내었다. 이렇듯 $100^{\circ}C$에서 제한된 시간 동안 건조하고 $70^{\circ}C$에서 건조를 완료하는 것이 부추의 색도와 생리활성 물질을 최대로 유지하면서 건조시간을 단축시킬 수 있는 조건임을 확인하였으며 열풍건조 이후에도 색도와 생리활성 물질인 클로로필과 SOD 유사활성 물질의 효과가 상당량 존재하여 부추 건조 분말의 저장성 및 생리활성 효과를 기대할 수 있을 것으로 판단된다.
한국의 고급 양식대상 어종인 붉바리(Epinephelus akaara)로부터 새로운 heat shock protein (Hsp) 70을 동정하였다. 붉바리 Hsp70 (RgHsp70)의 cDNA는 RACE (rapid amplification of cDNA ends)법을 사용하였고, RgHsp70 cDNA의 전장은 2,152 bp이고, 5'-terminal untranslated region (UTR)은 105 bp, 3'-terminal UTR은 274 bp, 590개의 아미노산을 암호화하는 open reading frame (ORF)는 1,773 bp였으며, 분자무게(molecular weight)는 64.9 kDa 및 등전위값(isoelectric point, pI)은 5.2였다. 추정되는 아미노산 비교 및 계통발생학적 분석 결과, 다른 어종과 마찬가지로 Hsp70 고유의 signature를 포함하는 것을 비롯하여 높은 유사성을 나타내었으므로 RgHsp70이 Hsp70 family임을 확인할 수 있었다 RgHsp70 mRNA는 간과 두신 조직에서 높은 발현을 보였으며, 48시간 동안 수온별(21, 18, 15 및 $12^{\circ}C$) 노출 후 간 조직에서 대조구인 $21^{\circ}C$보다 $12^{\circ}C$에서 발현이 증가함을 확인하였다. 본 연구에서는, 수온이 하강함에 따라 RgHsp70 mRNA 발현에 주요한 영향을 미치는 것으로 보아, 수온변화에 따른 스트레스로 인해 발현의 변화를 나타내는 주요 스트레스성 단백질임을 확인할 수 있었다.
풀러렌[$C_{60},\;C_{70}$]을 benzoylperoxide, trichloroisocyanuric acid, methyltrioxorhenium(VII), iodosobenzene 그리고 phosphorous pentoxide 등의 산화제를 사용하여 상온, 초음파 조건에서 풀러렌 산화물을 제조하였다. MALDI-TOF MS, UV-VIS 그리고 HPLC를 사용하여 분석한 결과 생성된 풀러렌 산화물은 [$C_{60}(O)_n$], ($n=1{\sim}3$ 또는 n=1)과 [$C_{70}(O)_n$], ($n=1{\sim}2$ 또는 n=1)임을 알 수 있었다. 한편, 동일한 실험 조건에서 $C_{60}$ 반응속도는 $C_{70}$ 보다 높았다.
Competitive binding of $C_{60}$ and $C_{70}$ to meso-substituted porphyrins was studied by mass spectrometry (MS). Electrospray ionization MS was employed to acquire the mass spectra of 1 : 1 porphyrin-fullerene complexes formed in a mixture of mesosubstituted porphyrin and fullerite to determine the ratio of complexes between $C_{60}$ and $C_{70}$. Matrix-free laser desorption ionization MS was used to obtain the mass spectra of fullerite to measure the mole fraction of $C_{60}$ and $C_{70}$. The binding constant ratio ($K_{70}$/$K_{60}$) was determined from the mass spectral data. The difference in standard Gibbs free energy change, ${\Delta}({\Delta}G^o)_{70-60}$, for the competitive binding of $C_{60}$ and $C_{70}$ was calculated from $K_{70}$/$K_{60}$. Of the five porphyrins, tetraphenyl, tetra(4-pyridyl), tetra(4-carboxyphenyl), tetra(3,5-di-tert-butylphenyl), and tetra(pentafluorophenyl) porphyrins, the first three non-bulky porphyrins yield negative values of ${\Delta}({\Delta}G^o)_{70-60}$, whereas the other two bulky porphyrins result in positive values of ${\Delta}({\Delta}G^o)_{70-60}$. This result indicates that $C_{70}$ binding to porphyrin is thermodynamically favored over $C_{60}$ binding in non-bulky porphyrins, but disfavored in bulky ones. It also suggests that the binding mode of $C_{70}$is different between non-bulky and bulky porphyrins, which is in line with previous experimental findings of the "side-on" binding to non-bulky porphyrins and the $C_{60}$-like "end-on" binding to bulky porphyrins.
3-aminopropyltrimethoxysilane을 처리한 반응성 있는 유리표면 위에 'dirt-ball' 방법을 사용하여 $C_{70}$-금 나노입자 다중성막 필름을 자기조립하였다. 표면처리한 유리막을 $C_{70}$ 과 ${\omega}$-아미노기를 가진 금 나노입자를 포함하고 있는 용액속에 담그었다. 유기반응(아민화 반응)은 여러층으로 쌓인 다중성막 $C_{70}$-금 나노입자 필름을 용이하게 자기조립 할 수 있었다. $C_{70}$-금 나노입자 필름의 화학적 안정성은 산성용액에 필름을 담근후 흡수도의 변화를 측정함으로 조사되었다. 또한 나노입자 필름의 초음파적 안정성은 초음파 조건에 $C_{70}$-금 나노입자 필름을 노출하여 초음파를 조사 시킨후 고체 표면 위에 부분적인 탈착도의 변화와 작은 정도의 응집성이 일어남을 알 수 있었다.
풀러렌[$C_{70}$]을 3-chloroperoxy benzoic acid, chromium (VI) oxide, benzoyl peroxide, trichloroisocyanuric acid 등의 산화제를 사용하여 마이크로파 조건에서 반응시켜 풀러렌 난화물[$C_{70}O_n$] ($n=1{\sim}3$ or n=1)을 합성하였다. 동일한 마이크로파 조건에서 여러가지 산화제와 풀러렌[$C_{70}$]의 고체상태 반응성은 3-chloroperoxy benzoic acid > chromium(VI) oxide > trichloroisocyanuric acid $\simeq$ benzoyl peroxide 순으로 증가함을 나타냈다. MALDI-TOF-MS, UV-visible, 그리고 HPLC를 사용하여 분석한 결과 생성된 풀러렌 산화물은 [$C_{70}O_n$] ($n=1{\sim}3$ or n=1)임을 알 수 있었다.
Sevoflurane postconditioning (SPostC) has been proved effective in cardioprotection against myocardial ischemia/reperfusion injury. It was also reported that heat shock protein 70 (HSP70) could be induced by sevoflurane, which played a crucial role in hypoxic/reoxygenation (HR) injury of cardiomyocytes. However, the mechanism by which sevoflurane protects cardiomyocytes via HSP70 is still not understood. Here, we aimed to investigate the related mechanisms of SPostC inducing HSP70 expression to reduce the HR injury of cardiomyocytes. After the HR cardiomyocytes model was established, the cells transfected with siRNA for HSP70 (siHSP70) or not were treated with sevoflurane during reoxygenation. The lactate dehydrogenase (LDH) level was detected by colorimetry while cell viability and apoptosis were detected by MTT and flow cytometry. Reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) and Western blotting were used to detect HSP70, apoptosis-, cell cycle-associated factors, iNOS, and Cox-2 expressions. Enzyme-linked immuno sorbent assay (ELISA) was used to measure malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD). SPostC decreased apoptosis, cell injury, oxidative stress and inflammation and increased viability of HR-induced cardiomyocytes. In addition, SPostC downregulated Bax and cleaved caspase-3 levels, while SPostC upregulated Bcl-2, CDK-4, Cyclin D1, and HSP70 levels. SiHSP70 had the opposite effect that SPostC had on HR-induced cardiomyocytes. Moreover, siHSP70 further reversed the effect of SPostC on apoptosis, cell injury, oxidative stress, inflammation, viability and the expressions of HSP70, apoptosis-, and cell cycle-associated factors in HR-induced cardiomyocytes. In conclusion, this study demonstrates that SPostC can reduce the HR injury of cardiomyocytes by inducing HSP70 expression.
연안의 다양한 환경변화는 서식 생물에 영향을 미치고, 양식장의 생산량 감소와 연결되고 있는 추세이다. 본 연구에서는 가막만의 대표적인 양식종인 패류 C. gigas와 M. galloprovincialis의 서식환경에 따른 스트레스 정도를 파악하고자 하였다. 이를 위해, 각 종의 체중량, 각장과 각고, 양식장 사육기간을 조사하고, 각 종의 계통학적 HSP 70 sequence를 비교한 후, 각 종의 HSP 70 유전자 발현을 분석하였다. 그 결과, C. gigas의 체중량, 각장과 각고는 C2 양식장이 높게 나타났으나, 양식장 환경 사육기간과 HSP 70 유전자 발현은 C3 양식장이 가장 높았다. M. galloprovincialis는 M1 양식장의 체중량이 높게 나타났으며 각장과 각고, 사육기간은 M2와 유사하였으나, HSP 70 유전자 발현은 M2 양식장이 통계적으로 유의한 수준으로 높게 나타났다. 그리고 C. gigas와 M. galloprovincialis의 HSP 70 sequence 분석을 통해서 다른 해양 종들과 높은 유사성이 있음을 확인하였다. 이 결과는 서식환경에 따라 생물의 외부적 형질뿐만 아니라 내부적 스트레스를 HSP 70 유전자 발현을 통하여 파악할 수 있으며 HSP 70은 외부환경 스트레스를 평가하는 지표 유전자로서 활용할 수 있을 것이다.
공기 중 초음파 조건에서 풀러렌$[C_{70}]$과 금속 헥사카르보닐 착물 $M(CO)_6$ (M=Cr, Mo, W)을 반응시켜 풀러렌 산화물 $[C_{70}O_n](n=1{\sim}2)$을 합성하였다. 동일한 초음파 조건에서 풀러렌$[C_{70}]$과 여러 가지 금속 헥사카르보닐 착물 $M(CO)_6$ (M=Cr, Mo, W)의 반응성은 $Mo(CO)_6$ > $W(CO)_6$ > $Cr(CO)_6$ 순으로 증가함을 나타냈다. MALDI-TOF-MS, UV-visible 스펙트럼과 HPLC를 사용하여 분석한 결과 초음파화학 반응의 생성물은 $[C_{70}O_n](n=1{\sim}2)$ 임을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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