Lactofenicin is an antibacterial peptide fragment (about 5 kD) derived from lactoferrin (80 kD) that displays the various biological functions. The production of a human lactoferricin (Lactoferricin H) in mouse HC11 mammary epithelial cells was achieved by placing its cDNA under the control of the bovine ${\beta}$-casein gene. To express lactoferricin H in this cell culture system, constructed a hybride-splice signal consisting of bovine ${\beta}$-casein intron I and rabbit ${\beta}$-globin intron II, and a DNA fragment spanning intron 8 of the bovine ${\beta}$-casein gene. Expression of lactofenicin H from this expression vector was identified by RT-PCR, northern and dot blot analysis. RT-PCR using total RNA of HC11 cells transfected with pBL1-cin expression vector yielded a product identified as having a size of the 150bp. Northern blot analysis was identified about 2.3 kb. In dot blot analysis, recombinant lactofenicin H was recognized with anti-human lactofrrnin polyclonal antibody.
Kim, Moon-K.;Oh, Seung-H.;Gye, Myung-C.;Yoon, Hyun-S.;Lee, Joon-Y.
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.16
no.2
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pp.113-118
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1989
In order to study the effects of $Ca^{++}$ and dbcAMP on sperm motility, cauda epididyal spermatozoa of mouse were incubated in the media containing the various concentrations of $Ca^{++}$ and dbcAMP, and Its motility were observed and analyzed. The rate(%) of the sperm with forward motility which may be fertile, reached at the equilibrium state in 30-60 min. after the beginning of incubation. $Ca^{++}$ requirement for the maintenance of sperm motility obviously appeared in 3hrs. after the beginning of incubation. In the medium containing 0.01mM $Ca^{++}$, the rate of sperm forward motility was highest(30.6-40.6%), whereas in 10mM $Ca^{++}$ medium, the rate was rather reduced because of a severe agglutination phenomenon. On the other hand, 1mM dbcAMP in the medium was significantly effective for the maintenance of sperm forward motility.
The analogues of lichen components showing anti-tyrosinase activities were synthesized. 4-Alkylresorcinol derivatives showed both the inhibitory activity and cytotoxicity in B-16 melanoma cells at the doses of 10 mM to 1.2 mM. Resorcinol and 4-methylresorcinol showed the inhibitory effect with a low cytotoxicity at the doses of 2.5 mM and $600\;{\mu}M$ among 4-alkylresorcinols, respectively. Some diphenylmethane derivatives (Type A, B, and C) had strong activities with a low cytotoxicity. While xanthine derivatives had no effect. Glucosides of 4,5-alkylresorcinol and the diphenylmethane derivative (Type B) were prepared to decrease the cytotoxicity. As a result, no effect were observed. Liposome of the diphenylmethane derivative (Type B) was prepared for the same purpose, and the latter showed a remarkable effect at the dose of $15\;{\mu}M$ with a low cytotoxicity.
Objectives : In this study, the effect of Dipsaci Radix(DR, Dipsacus asperoides C.Y. Cheng et T. M. Ai) water extract on LPS-induced inflammatory response in RAW264.7 cells were investigated. Methods : Dried roots of DR was extracted with water for 3 h(DR-W extract). RAW264.7 cells, a mouse macrophage line, were incubated with different concentrations of DR-W extract for 30 min and then stimulated with LPS at indicated times. Cell toxicity was determined by MTT assay. The concentrations of nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) were measured by Griess assay and enzyme immunoassay (EIA), respectively. The expression of inducible nitric oxide synthease (iNOS) and cyclooxyganase (COX)-2 mRNA and protein was determined by RT-PCR and Western blot, respectively. Results : DR-W extract was significantly inhibited LPS-induced productions of NO and PGE2 in RAW264.7 cells. DR-W extract was not suppressed the expressions of iNOS mRNA and protein in LPS-stimulated RAW264.7 cells. Conclusions : This study suggests that DR-W extract can attenuate inflammatory response via inhibition of the NO and PGE2 production in activated macrophages.
The anemia-inducing strain of Friend virus (FVA) is a murine retrovirus which stimulates the proliferation of erythroid progenitor cells. The progenitor cells synthesized by FVA-stimulation are unable to proceed with differentiation and accumulate in the spleen resulting in splenomegaly in infected mice. Using FVA-inoculated mice as a model, we have investigated the antiretroviral effects of 2',3'-dideoxycytidine (ddC) and recombinant $interferon-{\alpha}-A\;(rIFN-{\alpha}-A)$ on FVA infection. The extent of the infection was determined by measuring the weights of the spleens. Daily intraperitoneal injection of ddC (100 mg/kg body weight), $rIFN-{\alpha}-A$ (10 KU/mose) and the combination of both drugs to FVA inoculated mice for 18 days resulted in suppression of the growth of spleens by 15.1%, 52.7% and 61.6%, respectively. When ddC was dissolved in drinking water (0.1 mg/ml) and administered to a group of FVA inoculated mice ad libitum, and $rIFN-{\alpha}-A$ (10 KU/mouse) was intraperitoneally injected daily to another group of ddC (0.1 mg/ml) drinking mice for 18days, the growth of spleens was suppressed by 38.4% and 83.2%, respectively. These results indicate that administration of ddC via drinking water is more effective in suppressing FVA infection than the daily injection of ddC, and that the combined effects ddC and $rIFN-{\alpha}-A$ are not synergistic but additive. In order to determine whether ddC treatment alters the characteristic of the progenitor cells with respect to $Ca^{++}$ uptake, $Ca^{++}$ uptake in erythroid cells and the effect of cyclohexyladenosine (CHA) on the $Ca^{++}$ uptake were studied. $Ca^{++}$ uptake in the erythroid progenitor cells was about 20-fold greater than in mouse erythrocytes and the inhibition of $Ca^{++}$ uptake by CHA was the greatest in the progenitor cells from FVA infected mice which were treated with ddC. The inhibition was obviated by theophylline. Results of CHA binding studies showed that the erythroid progenitor cells contain both high and low affinity CHA binding sites, whereas mose erythrocytes contain only the low affinity CHA binding sites.
Kim, H.S.;Ryu, B.Y.;Oh, S.K.;Suh, C.S.;Kim, S.H.;Choi, Y.M.;Kim, J.G.;Moon, S.Y.;Lee, J.Y.
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.25
no.1
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pp.59-64
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1998
This study was designed to evaluate the influence of pronuclear age on the survival and post-thawing development after cryopreservation of mouse embryos. Freezing and thawing were performed in the different pronuclear stages of mouse embryos after IVF. Embryos were obtained from $F_1$ hybrid mice and classified into 4 groups according to the pronuclear stage (6hr, 9hr, 12hr and 15hr after insemination). Pronuclear ova were slowly cooled in a biological freezer using 1.5M 1,2-propanediol and 0.1M sucrose as cryoprotectant. Thawing was done at room temperature and 1,2-propanediol was removed by multi-step dilutions. Both frozen-thawed embryos and control fresh embryos were cultured in vitro in Ham's F-10 medium supplemented with 4mg/ml BSA. In control group, the development rate after 48hr was 99.3%, and the complete hatching rate after 144hr was 61.3%. In experimental groups, the survival rate after thawing was 95.4% in 6hr, 88.7% in 9hr, 75.2% in 12hr and 62.4% in 15hr after insemination, the development rate after 48hr was 61.1, 77.0, 67.0 and 79.6%, respectively, and the complete hatching rate after 144hr was 25.7, 43.7, 42.2 and 60.0%, respectively. The survival rate in 15hr was significantly lower (p<0.05) compared with other groups. In vitro development rates after 48hr were similar in all groups, but complement hatching rate was significantly lower (p<0.05) in 6hr group. In conclusion, cryopreservation of mouse pronuclear ova with 2 distinct pronuclei (9hr and 12hr groups) showed better results after thawing compared with early (6hr group) or late pronuclear ova just prior to cleavage (15hr group).
The bacterial growth and pH of Cornus officinalis fermented with Lactobacillus rhamnosus during fermentation were evaluated. As the results, the number of the fermentation after fermentation always remained higher than 6 log CFU/mL and the pH of those ranged from 4 to 6. To evaluate the effect of Cornus officinalis fermented with Lactobacillus rhamnosus on hair growth promotion in C57BL/6 mice, Six weeks old male mice were divided into four groups including normal group (saline), negative control group (essence base), positive control group (minoxidil) and experimental group (Cornus officinalis and animal milk fermented with Lactobacillus rhamnosus mixed in negative control). And they were applied topically with test materials for 8 days. Hair regrowth effect in experimental group using gross and histological examination was higher than that in positive control group. Body weight and food intake of four groups didn't show significant difference. These results indicated that the Cornus officinalis fermented with Lactobacillus rhamnosus can be used practically for hair growth or prevention of hair loss.
To investigate the effect of extracellular matrix proteins on the in vitro development of ethanol-induced parthenogenetic eggs of ICR strain mice, those were cultured in vitro in fibronectin, gelatin, or collagen precoated culture dishes containing 1.5 ml of NaH-C03$_3$-BMOC-3 medium at 37$^{\circ}C$ for 96 hrs. under the atmosphere of 5% $CO_2$ and 95% air. Fibronectin, gelatin, or collagen significantly(P$\pm$1.4, 45.4i1.4, and 44.8$\pm$O.9, respectively. And the diameter of those eggs ranged 104.6$\pm$1.9, 102.8$\pm$2.3, and 103.4$\pm$O.8 $\mu$m, respectively.
Kim, Myung-Gyou;Kim, Chang-Ju;Hong, Mee-Suk;Chung, Joo-Ho;Boo, Yung-Min;Kim, Yun-Kyung;Hong, Seung-Heon;Leem, Kang-Hyun
Korean Journal of Oriental Medicine
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v.12
no.1
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pp.59-68
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2006
The present study was designed to investigate the effects of Ligustici Rhizoma on the expression of genes in the pain model induced by acetic acid. cDNA microarray (GenePlorer TwinChipTM Mouse 7.4K) was used to evaluate the gene expressions. The expressions of 32 genes were up-regulated in the Ligustici Rhizoma-treated group: they include the genes coding Casp6, Hrh3, Basp1, Sprr2h, Zfp131, Copz2, LOC432436, Itpr5, etc. The expressions of 16 genes were down-regulated in the Ligustici Rhizoma-treated group: they include the genes coding Il16, Zfpm1, Cacna2d1, Xpo7, Smpdl3b, Dscr1, Harp, etc. The conclusion is that the expressions of 32 genes were up-regulated and the expressions of 16 genes were down-regulated in Ligustici Rhizoma-treated group.
Among the strains isolated form the various sources, the strain AC-12 producing a powerful pectinase was selected by the extensive screening test. The selected strain was indentified and its toxicity investigated. The conditions of the pectinase production, the characteristics of the purified enzyme and the clarification effect on the apple juice were studied. 1. The selected strain AC-12 was identified by the classification method of paper and fennel and named as Aspergillus sp. AC-12. 2. As a result of the breeding test of the white mouse, no toxicity was found from this enzyme. 3. The yield of pectinase in the medium of defatted rice bran was much better than that in the medium of wheat bran. 4. The optimum conditions for the culture of the strain in the medium of defatted rice bran were that the cultural time was 72hrs, the amount of water to be added about 80%, temperature $30{\sim}35^{\circ}C$ and pH $3.0{\sim}5.0$. 5. The yield of pectinase was slightly increased by the addition of pectin to the medium of defatted rice bran and by the addition of pectin, $NaNO_3$ and $K_2HPO_4$ to the medium of wheat bran, respectively. 6. The optimum conditions for the enzyme activity were pH $3.0{\sim}4.0$ and temperature $40{\sim}50^{\circ}C$. The enzyme was stable below $40^{\circ}C$ and pH $2.0{\sim}8.0$, respectively. But above $50^{\circ}C,$ this enzyme was abruptly inactivated. The activity was slightly increased by the addition of $MnSO_4\;and\;CuSO_4.$ 7. It was regarded that the opimum temperature for the clarification of the apple juice was $40{\sim}50^{\circ}C$, the optimum pH 3.0 and the optimun concentration of the enzyme 0.1%, and the apple juice was almost clarified by the reaction at $45^{\circ}C$ for 60 minutes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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