To identify genes involved in the decolorization of brilliant green, we isolated random mutants generated by transposon insertion in brilliant green-decolorizing bacterium, Citrobacter sp. The resulting mutant bank yielded 19 mutants with a complete defect in terms of the brilliant green color removing ability. Southern hybridization with a Tn5 fragment as a probe showed a single hybridized band in 7 mutants and these mutants appeared to have insertions at different sites of the chromosome. Tn5-inserted genes were isolated and the DNA sequence flanking Tn5 was determined. By comparing these with a sequence database, putative protein products encoded by bg genes were identified as follows: bg 3 as a LysR-type regulatory protein; bg 11 as a MalG protein in the maltose transport system; bg 14 as an oxidoreductase; and bg 17 as an ABC transporter. The sequences deduced from the three bg genes, bg 2, bg 7 and bg 16, showed no significant similarity to any protein with a known function, suggesting that these three bg genes may encode unidentified proteins responsible for the decolorization of brilliant green.
역상 액체크로마토그래피에 의한 지방족 알코올, 케톤 및 에스테르를 분리하는데 검출 시약으로 brilliant green 에 관하여 연구하였다. 발색단을 가지고 있지 않은 이들 시료들을 brilliant green을 사용함으로써 가시영역인 625nm에서 분광광도 검출기로서 간접적으로 검출할 수 있었다. 또한 몇가지 혼합시료들을 좋은 분리도와 비교적 높은 감도로서 분리 및 검출할 수 있었다.
제올라이트에 대한 수용액으로부터 brilliant green의 흡착 평형과 동역학 및 열역학 파라미터들을 다양한 초기농도(10-30 mg/L), 접촉시간(1-24 h) 및 흡착온도(298-318 K)를 변수로 하여 회분식 실험을 통하여 연구하였다. 흡착평형 값들은 Langmuir, Freundlich 및 Dubinin-Radushkevich 식으로 해석하였다. 그 결과는 Langmuir 식과 Freundlich 식에 잘 맞았으며, 평가된 Langmuir 무차원 분리계수 값($R_L=0.041{\sim}0.057$)와 Freundlich 상수값(1/n=0.30~0.47)은 제올라이트에 의한 brilliant green의 흡착이 효과적인 공정이 될 수 있음을 나타냈다. Dubinin-Radushkevich 식에 의해 평가된 흡착 에너지값(1.564~1.857 kJ/mol)은 물리흡착에 해당하였다. Brilliant green의 흡착 동력학은 유사이차반응속도식에 잘 맞았으며, 입자내 확산식에 잘 따랐다. 흡착 특성을 평가하기 위하여 주로 활성화에너지, Gibbs 자유에너지, 엔탈피 및 엔트로피와 같은 열역학 파라미터가 계산되었다. Gibbs 자유에너지-10.3~-11.4 kJ/mol), 엔탈피(49.48 kJ/mol) 및 활성화에너지(27.05 kJ/mol)는 흡착이 자발적이고, 흡열 및 물리흡착 공정임을 나타냈다.
건강도쇄돈(健康屠殺豚)의 장간막임파선(腸間膜淋巴膳)과 분(糞)(대장내용물(大腸內容物))으로부타 살모넬라균(菌)의 분리방법(分離方法)을 비교연구하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 비교적 다른 세균에 의한 오염도(汚染度)가 낮은 장간막임파선(腸間膜淋巴膳)을 검사하였을 경우, 증균배지(增菌培地)로서는 tetrathionate broth(TB)가 selenite broth(SB) 보다 살모넬라균(菌) 분리율(分離率)이 월등히 높았으며, 선택배지(選擇培地)로서는 brilliant green agar (BG)가 SS agar(SS) 보다 역시 월등히 높았다. 2. 여러가지 장내세균(腸內細菌)에 의한 오염도(汚染度)가 높은 분(糞)을 검사하였을 경우에는, 살모넬라균(菌)의 분리율(分離率)에 있어서 증균배지(增菌培地)로 사용한 TB와 SB의 우열(優劣)을 인정할만한 차이를 보지 못하였으며, 선택배지(選擇培地)로 사용한 BG와 SS의 성적도 비슷하였다. 증균배지(增菌培地)나 선택배지(選擇培地)를 어느 한가지 배지(培地)만 사용한 경우보다는 두가지 배지(培地)를 동시에 같이 사용함으로써 살모넬라균(菌)의 분리율(分離率)이 크게 높았다. 3. Brilliant green McConkey broth 를 증균배지(增菌培地)로 사용하였을 경우에는 장간막임파선(腸間膜淋巴膳)과 분(糞)의 두 가지 재료중 어느것이나 TB 보다 살모넬라균(菌)의 분리율(分離率)이 훨씬 낮았다. 분(糞)을 brilliant green McConeky agar 에 직접 배양(培養)하는 방법은, TB나 SB에 증균배양(增菌培養)을 한 뒤에 BG나 SS의 증균배지(增菌培地)를 사용하는 방법보다 또한 훨씬 분리율(分離率)이 낮았다. 4. TB 및 SB의 증균배양시간(增菌培養時間)은 $37^{\circ}C$에서 24, 48 및 72 시간(時間)등 세가지를 비교해본 결과 장간막임파선(腸間膜淋巴膳)은 48 시간(時間) 배양(培養)했을 때에 살모넬라균(菌)의 분리율(分離率)이 가장 높았으나 분(糞)은 24 시간(時間)배양했을 때에 가장 분리율(分離率)이 높았다.
야자계 입상활성탄에 대한 Brilliant Green의 흡착 평형과 동역학 및 열역학 파라미터들을 다양한 초기농도($300{\sim}500mg\;L^{-1}$), 접촉시간(1 ~ 12 h) 및 흡착온도(303 ~ 323 K)를 변수로 하여 회분식 실험을 통하여 연구하였다. 흡착평형 값들은 Langmuir, Freundlich, Temkin, Harkins-Jura 및 Elovich 식으로 해석하였다. 그 결과는 Langmuir 식에 가장 잘 맞았으며, 평가된 Langmuir 무차원 분리계수 값($R_L=0.018{\sim}0.040$)과 Freundlich 상수값(1/n = 0.176 ~ 0.206)은 활성탄에 의한 Brilliant Green의 흡착이 효과적인 공정임을 보여주었다. Temkin 식에 의해 평가된 흡착열 관련상수($B=12.43{\sim}17.15J\;mol^{-1}$)는 물리흡착에 해당하였다. Harkins-Jura 식에 의한 등온선 매개변수($A_{HJ}$)는 온도가 증가할수록 이종 기공 분포도 증가함을 나타내었고, Elovich 식에 의한 최대흡착용량은 실험값보다 매우 적은 것으로 나타났다. 흡착공정은 유사이차반응속도식에 더 잘 맞았으며, 흡착과정은 입자내 확산이 율속단계였다. 입자내 확산속도 상수는 초기 농도가 커질수록 염료의 운동이 활발해졌기 때문에 증가하였다. 그리고 초기농도가 커질수록 경계층의 영향이 커졌다. Gibbs 자유에너지($-3.46{\sim}-11.35kJ\;mol^{-1}$), 엔탈피($18.63kJ\;mol^{-1}$) 및 활성화에너지($26.28kJ\;mol^{-1}$)는 흡착공정이 자발적이고, 흡열 및 물리흡착임을 나타냈다.
ZnS:Mn-glycine (ZnS:Mn-Gly) nanocomposites were synthesized by capping ZnS:Mn nanocomposites with glycine. Zinc sulfate heptahydrate ($ZnSO_4{\cdot}7H_2O$), glycine ($C_2H_5NO_2$), manganese sulfate monohydrate ($MnSO_4{\cdot}H_2O$), and sodium sulfide ($Na_2S$) were used as the source reagents. $ZnS:Mn-Gly-C_{60}$ nanocomposites were obtained by heating the ZnS:Mn-Gly nanocomposites and fullerene ($C_{60}$) at a 2:1 mass ratio in an electric furnace at $700^{\circ}C$ for 2 h. X-ray diffraction (XRD) was used to characterize the crystal structure of the synthesized nanocomposites. The photocatalytic activity of the $ZnS:Mn-Gly-C_{60}$ nanocomposites was evaluated, via the degradation of brilliant green (BG) dye under 254 nm irradiation, with a UV-vis spectrophotometer.
본 연구에서는 수용액 중에서 유해한 brilliant green (BG) 제거를 위한 탄소와 산화철 나노복합재료의 흡착특성을 살펴보았다. 탄소와 산화철 나노복합재료는 화학침전법과 $750^{\circ}C$에서 질산 철과 탄소를 열처리 함으로서 합성하였다. 그 생성물은 TEM, XRD, 그리고 TGA를 이용하여 확인하였다. 나노복합재료에 대한 BG의 흡착 연구는 열역학적 인자와 반응속도론적인자들을 이용하여 수행하였다. 흡착 속도식은 준 이차 속도식이 준 일차 속도식에 비해 잘 들어맞는다고 보여준다. 실험 결과는 Langmuir 과 Freundlich 흡착 등온선을 이용하여 분석하였다. 평형 데이터는 Langmuir모델에 잘 들어맞으며 최대 단일 층 흡착 용량 64.1 mg/g 을 갖는다. 열역학적 인자들은 나노복합재료에 BG의 흡착 으로부터 유도하며 흡착은 자발적이며 흡열 과정임을 확인하였다.
여러 가지 난분해성 색소에 대하여 탈색능을 나타내는 Klebsiella pneumoniae WL-5이 염색폐수처리장의 활성슬러지로부터 분리되었다. 이 세균은 정치배양과 at pH 6-8 및 $30-35^{\circ}C$에서 높은 탈색능을 나타내었다. Congo Red색소에 대해서는 $200\;{\mu}M$ 농도에서 12시간 배양하였을 때 90% 이상이 탈색되었고, Malachite Green, Brilliant Green, Reactive Black-5에 대해서는 $10\;{\mu}M$ 농도에서 80% 이상이 탈색되었지만, Reactive Red-120, Reactive Orange-16, Crystal Violet에 대해서는 $10\;{\mu}M$ 농도에서 각각 46%, 25%, 13%의 비교적 낮은 탈색능을 나타내었다. 트리페닐메탄계 색소는 세포표면에의 흡착에 의한 탈색을 나타내었고, 아조계 색소는 지금까지 알려져 있지 않는 새로운 효소반응계에 의해서 탈색된다는 것을 제시하였다.
The Optimal condition for degradation of crystal violet and other triphenylmethane dyes by Citrobacter sp. SK-3 isolated from the activated sludge of dye manufacturing factory was investigated. The optimal culture medium for the degradation of triphenylmethane dye was composed of minimum inorganic salt medium supplemented with 0.5% galactose, 0.1% beef extract, with the initial pH of 8.0 to 9.0. Under this condition, Citrobacter sp. SK-3 degraded 200 ppm of crystal violet completely within 24 hours. Citrobactre sp. SK-3 also degraded efficiently malachite green, pararosaniline, brilliant green, methyl violet, basic fuchsin and methyl red. Analysis of the degradation products of crystal violet through this layer chromatography and high performance liquid chromatography indicated that the methyl groups bound to crystal violet backborn were gradually demethylated to pentamethyl-, tetramethyl- and trimethylpararosaniline.
리그닌 분해효소 군을 가진 백색부후균들은 다핵방향족 화합물을 포함하여 염료와 폭약 및 내분비장애 물질의 분해 등 다양한 난분해성 물질을 분해할 수 있다. 리그닌 분해효소 중 laccase와 manganese peroxidase (MnP)를 각각 발현하는 벡터를 국내에서 분리한 백색부후균류의 하나인 아교버섯(Phlebia tremellosa)에 형질전환 방법으로 도입시킨 형질전환체를 사용하여 염료의 탈색능력을 분석하였다. Methyl green의 경우 3일 후 약 50%의 탈색을 보인 야생형에 비하여 laccase 형질전환체(TF2-1)와 MnP 형질전환체(T5) 모두 90% 이상의 탈색을 보였다. Remazol brilliant blue R (RBBR)에서는 야생형이 약 67%의 탈색을 보인 반면 두 가지 형질전환체들은 약 85%의 탈색을 보였다. 각각의 형질전환체들은 laccase와 MnP의 활성 및 유전자 발현도 활발한 것으로 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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