Six demographic parameters including life span (LS), maturation time (MT), net reproduction rate (Ro), mean generation length (G), innate capacity for increase $(r_m)$ and finite rate of increase $(\gamma)$ were estimated in the rotifer (Brachionus rotundiformis) cultured at three salinities of 5, 20 and 34 PSU and under a constant temperature of $28^{\circ}C$. The maximum life spans at salinities of 5, 20 and 34 PSU were 17, 12 and 13 days, respectively. The shortest maturation time (24 hr) was recorded at 5 PSU, and the rotifer at 20 PSU showed a most delayed maturation (192 hr). The maximum reproduction rate was 42 offspring per female in rotifer cultured at 5 PSU, while the longest generation length (8 days) was observed at 20 PSU. Maximum and minimum values of $r_m$ (1.56 and 0.46 individual per day) and $(\gamma)$ (6.67 and 1.70 individuals per day) were calculated at 5 and 34 PSU, respectively. Salinity also showed strong effect on correlation of the demographic traits examined. ANOVA revealed significant differences (P<0.05) between demographic parameters of the rotifer at the three salinity condition. Considering the higher values of life span, innate capacity and finite rate of increase, and shortest maturation time at 5 PSU, the rotifer we examined had a higher reproductive potential and longer life span at 5 PSU rather than at 20 or 34 PSU.
이 연구에서는 해산어의 종묘 생산에 필요한 대량 배양용 로티퍼, Brachionus rotundiformis의 종 보존 방법으로서 무균 로티퍼의 이용을 검토했다. 로티퍼는 개량형 항생제 혼합액 AM9을 사용하여 무균 처리한후, 무균 Nannochloropsis oculata를 먹이로 공급하여 연속 유지 배양했다. 각각 다른 시기의 3회 (trial 1, 2 and 3)에 걸친 로티퍼 배양결과, 무균 배양 (axenic culture)에서는 비교적 안정적인 증식을 보인 반면, 유균 배양 (non-axenic culture)에서 로티퍼의 증식은 불안정적으로 각 시기에 따라서 심한 증식의 차이가 관찰되었다. 이 결과는 유균 배양에서 로티퍼의 증식에 직접적으로 악영향을 미치는 박테리아가 무균 처리과정을 통해서 제거되었음을 증명한다. 로티퍼 무균 배양 방법의 일반화 또는 대량 배양용 로티퍼의 씨앗으로서의 무균 로티퍼의 이용은 로티퍼의 안정 배양은 물론 유용 수산 생물의 대량 폐사를 일으키는 원인 생물을 사전에 제거할 수 있는 유효한 방법이 될 수 있다고 생각된다.
넙치(Paralichthy olivaceus) 및 돌돔 (Oplegnathusfasciatus) 자어를 대상으로 각각 B.plicatilis와 B.rotundiformis의 내구란에서 갓 부화한 rotifer의 먹이효율과 지방산 조성을 대량배양한 rotifer와 비교 조사하였다. Rotifer 내구란은 Chlorella와 빵 효모를 먹이로 공급하여 $1~4m^3$에서 생산하였다. B.plicatilis와 B.rotundiformis 내구란은 $5^{\circ}C$ 암내장 상태에서 각각 3개월과 5개월 동안 보관하여 $28^{\circ}C$ 연속 조명하에서 부화시켰다. 내구란에서 갓 부화한 rotifer와 대량 배양한 rotifer(대조구)를 자어에게 공급하였다. B.rotundiformis 내구란에서 갓 부화한 rotifer를 공급한 돌돔자어의 성장과 생존률은 대조구와 비슷하였게 나타났고, B.plicatilis 내구란에서 갓 부화한 rotifer를 먹은 넙치자어의성장과 생존률은 각각 대조구에 비해 비슷하거나 높게 나타났다. 또한 내구란에서 갓 부화한 rotifer의 지방산조성은 대조구와 비슷하게 나타났다. 이와 같은 결과를 볼 때 내구란에서 갓 부화한 rotifer는 넙치 및 돌돔 자어의 먹이로서 이용 가능하다고 판단된다.
해수산 rotifer Brachionus rotundiformis의 내구란 대량생산을 위한 효과적인 유성생식자극요인을 구명하기 위해 염분자극과 기사용배양수의 효과를 9일 동안 조사하였다. 각 염분에 노출된 후 모든 실험구에서 배양 3일째부터 유성생식률이 증가하기 시작했으며 이후 배양 4-5일째 이후 감소하는 경향을 보였다. 내구란은 10‰, 15‰, 20‰, 25‰ 실험구에서 배양 4일째에 출현하였으며 특히 20, 25‰ 실험구는 배양 6일째 수정률이 각각 33.3%와 31.3%로 다른 실험구에 비해 높게 나타났다. 9일간 평균 유성생식률은 10‰와 20‰ 실험구에서 각각 25.3%와 20.2%로 높게 나타났다. 수정률은 25‰ 실험구에서 14.0%로 가장 높았다. 각 기사용배지농도에 노출된 후 모든 실험구의 유성생식률은 염분실험결과와 유사한 경향을 보였고 내구란은 0%과 25% 기사용배지에 노출되었을 때 만 출현하였다. 평균수정률은 모든 실험구가 차이를 보이지 않은 반면, 유성생식률은 25% 실험구가 22.3%로 대조구인 0%에 비해 높게 나타났다. 본 연구결과를 종합해보면, B. rotundiformis의 내구란 대량생산을 위한 효과적인 유성생식유발요인으로 기배양수자극보다 염분자극이 더 효과적이며 최적 염분은 비교적 높은 유성생식률과 수정률을 유도한 20-25‰로 판단된다. 본 연구결과는 차후 rotifer 내구란 대량생산을 위한 핵심적인 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
Myostatin (MSTN)은 TGF (transforming growth factor)-beta family에 속하며, 골격근 성장의 억제 조절인자로서 여러 포유류에서 MSTN 유전자 돌연변이는 골격근 증가를 유도한다. MSTN prodomain은 MSTN의 생물학적 활성을 저해하는데, MSTN prodomain이 과 발현된 쥐에서 과도한 근육축적이 확인되었다. 로티퍼(rotifer; Brachionus rotundiformis)는 치어기 어류의 양식산업에 있어 주요한 일차적 먹이생물이다. 그러나 로티퍼에서 MSTN 및 MSTN prodomain의 기능과 발현 유무는 알려져 있지 않다. 따라서 본 연구는 재조합 MSTN prodomains이로티퍼에 미치는 영향에 관하여 조사하고자 하였다. 로티퍼 개체배양 실험을 통하여 재조합 MSTN prodomains(pMALc2x-poMSTNpro, pAMLc2x-sMSTNpro)에 의한 로티퍼의 생식 전 단계, 순 생식단계, 생식 후 단계, 산란, 수명, 포란, 수컷 발생률을 확인하였으며, 또한 pMALc2x-poMSTNpro와 pAMLc2x-sMSTNpro이 밀집배양에서 로티퍼의 개체성장에 영향을 미치는지에 대하여 확인하였다. 그 결과 농도가 1, 2, 4 ${\mu}g/ml$에서 pMALc2x-poMSTNpro를 처리한 실험군과 0.25 ${\mu}g/ml$에서 4 ${\mu}g/ml$ 농도까지 pMALc2x-sMSTNpro를 처리한 실험군에서 로티퍼의 생식 전 단계가 아무처리하지 않은 대조군에 비하여 짧아졌다. 밀집배양 실험에 있어 pMALc2x-poMSTNpro와 pMALc2x-sMSTNpro 모두 로티퍼의 개체 수를 증가를 유도하여, 재조합 MSTN prodomains에 의해서 로티퍼의 reprodution에 영향을 주는 것으로 나타났다. 하지만, 재조합 MSTN prodomains이 어떠한 수용체를 이용하여 신호를 전달하는지에 대한 연구는 앞으로 더 진행되어야 하며, 본 연구의 결과는 재조합 MSTN prodomains이 미세조류에서의 기능 및 메커니즘연구에 중요한 기초자료가 될 것으로 사료된다.
Lipids were extracted from marine rotifer, Brachionus rotundiformis in order to examine the functionality of lipid enzymatic modification. The fatty acids, palmitic, linoleic, oleic and stearic acids were the dominant forms accounting for approximately 35.8%, 21.5%, 15.9% and 7.7% of the total lipid content, respectively. Lipid fractions were categorized as neutral lipids (38.5%), glycolipids (45.9%) and phospholipids (17.6%), and after extraction from the rotifer were isolated by thin-layer chromatography (TLC) as free fatty acids (FFA), monoacylglycerol (MAG), diacylglycerol (DAG) and triacylglycerol (TAG). The production of polyunsaturated fatty acid (PUFA) concentrate from rotifer lipids was studied using lipase-catalyzed hydrolysis. In addition, rotifer lipids were modified by hydrolysis using lipases such as porcine pancreas, Candida rugosa and Rhizomucor miehei. The lipase from Rhizomucor miehei was effective in extracting linoleic acid (C 18:2), while the lipase from Candida rugosa was effective in palmitic acid (C16:0) extraction.
Song, Choon-Bok;Kim, Yeon-Hee;Lee, Je-Hee;Rho, Sum
한국양식학회지
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제12권4호
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pp.267-274
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1999
A rotifer starin has been isolated from tide pools located near Sogwipo, Cheju Island and the effects of environmental factors (water temperature and salinity) and clonal differences have been examined with regard to size variation and cyclomorphosis. Adult female rotifers varied from 141.61 to $173.97 \mutextrm{m}$ in their mean lorica length under different rearing conditions in the laboratory and also had pointed anterior spines . Thus, this strain was classified as Brachionus rotundiformes. Mean lorica length tended to be smaller as rearing temperature increased although there were some exceptions. Statistical analysis indicated that lorica length was largely influenced by both clonal differences and rearing temperatures although the former as a genetic factor affected lorica length a little more than the latter did ; overall effect of salinity on lorica length was not statistically signicicant; furthermore, cyclomorphosis was also largely influenced by both clonal differences and rearing temperatures, but clonal differences as a genetic factor affected rotifer cyclomorphosis much more than temperature did.
해산어의 종묘생산 과정에서 로티퍼 B. rotundiformis와 코페포다 T. japonicus는 매우 대표적인 동물먹이생물이다. 그리고 이 두 종의 혼합배양 방법은 대량배양과 안정배양을 목적으로 하였을 때 매우 유용한 방법으로 널리 알려져 있다. 이 연구에서는 로티퍼 B. rotundiformis와 코페포다 T. japonicus의 혼합 배양 과정에서 미칠 수 있는 배양조건으로서 광주기가 미칠 수 있는 영향을 검토하였다. 그 결과 로티퍼 B. rotundiformis와 코페포다 T. japonicus의 혼합 배양에서는 배양 환경 조건 중 광주기 조건에 따라서 혼합배양수조내 로티퍼와 코페포다의 증식 양상이 매우 달라짐을 알 수 있었다. 로티퍼의 증식율을 비교하면 반일 광주기 조건의 최고 밀도에 비하여 전일 광주기 조건하에서 로티퍼의 최고 밀도는 200% 이상 향상되는 것을 알 수 있었다. 그러나 코페포다 T. japonicus의 증식은 12L:12D<24L:0D<0L:24D의 순으로 전일 암주기 조건의 광주기 조건하에서 가장 높은 증식이 관찰되었다. 그리고 코페포다의 증식과정을 각 발생 단계별로(nauplii, copepodites 그리고 female carrying eggs) 계수한 결과, 세 가지 광주기 조건별로 각 발생단계별(nauplius, copepodid 그리고 female carrying eggs)의 증식 양상은 매우 큰 차이를 보였다.
rotifer의 배양조에 혼재된 Artemia가 rotifer의 증식에 미치는 영향을 검토하였다. 실험에는 Koshiki주의 rotifer, Brachionus rotundiformis와 미국 샌프란시스코의 Great Salt lake주의 Artemia sp.를 사용했다. 그리고 모든 실험은 염분을 22ppt, 배양 온도는 $25^{\circ}C.$, 먹이로서 N. oculata을 2일 간격으로 ml 당 $7{\times}10^5$ 세포씩 공급하면서, 50 ml의 비이커에 N. oculata 현탁액을 40ml씩 넣고, rotifer 20마리 그리고 Artemia는 3마리씩 각 수조에 수용하여 각 생물들을 단일종 배양한 경우와 혼합 배양한 경우의 증식을 비교하였다. rotifer와 Artemia 유생을 혼합 배양한 경우, 두 생물은 한정된 먹이 N. oculata 조건하에서 먹이 경쟁(food competition)을 하였다. 또한, rotifer의 대량 배양조에 Artemia 성체의 급속한 섭식 활동에 의해서 심각한 먹이 부족 현상을 일으켰다. 결국, Artemia 성체는 rotifer의 안정적인 생산을 크게 방해하는 rotifer 증식 억제 요인으로서 작용했다. 즉, rotifer을 안정적으로 생산하기 위해서는 종묘 생산 과정에서 유발될 수 있는 Artemia의 혼재가 일어나지 않도록 각별한 주의가 필요하다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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